基于多重串联式PCR基因碟片研发利什曼原虫检测技术

目的 本研究基于多重串联式 PCR基因碟片（MT - PCR）技术,建立我国口岸重点关注的杜氏利什曼原虫(Leishmaniasis donovani)、婴儿利什曼原虫(Leishmaniasis infantum)、热带利什曼原虫(Leishmaniasis tropica)和硕大利什曼原虫(Leishmaniasis giganteum)高通量检测方法。方法 根据利什曼原虫基因组学结果,对比分析不同利什曼原虫,针对ITS - 1、ITS - 2、P0、RACK基因设计引物,同时设计品系特异性引物,使用巢式荧光定量 PCR 检测各个基因。结果 4个基因组的扩增产物都可以形成明显的特异熔解峰,4个基因组的扩增曲线差异明显。ITS - 1、P0、ITS - 2、RACK的检测限均可达到103 copies /μl,批内和批间重复变异系数都小于5%。针对4种利什曼原虫检测的灵敏度均为100%,特异性为99.42%,准确性为99.55%。结论 MT - PCR能够用于利什曼原虫高通量检测工作,有益于丰富传染病检测途径,提高口岸输入性传染病检测效率。     

自制裸磁珠对常见食源性致病菌吸附性能的研究

目的：研究自制裸磁珠对常见食源性致病菌和卫生指示菌的吸附性能，摸索从样品中快速分离和浓集细菌的方法。方法：试验裸磁珠对细菌的吸附性能，摸索温度和样品成分对其吸附性能的影响。结果：自制裸磁珠在37℃对常见食源性致病菌和卫生指示菌有很强的吸附，吸附率均高于97％。食品成分对其吸附有一定影响，吸附率最低为58．42％。结论：自制裸磁珠可望用于环境和食品样品中多种细菌的非特异性吸附分离和浓集，值得进一步研究和推广。     

森林脑炎、登革热和乙型脑炎病毒液相蛋白芯片多重检测方法的建立及应用

目的建立森林脑炎、登革热和乙型脑炎病毒液相蛋白芯片检测方法。方法将病毒抗原包被微球,利用病毒抗体和阳性血清建立并优化森林脑炎、登革热和乙型脑炎病毒液相蛋白芯片检测方法,评价方法的敏感性和准确性。结果建立的液相蛋白芯片检测方法病毒抗体和生物素标记二抗的孵育时间均为1 h,生物素标记羊抗兔Ig G和羊抗人Ig G最佳稀释度分别为1∶200和1∶100,能对3种病毒单一和混合感染准确检测。对295份临床样本的检测结果表明,该方法具有高通量、快速、敏感、特异的特点。结论本方法能对3种虫媒病毒同时进行快速检测,为虫媒病毒的筛查检测提供一种新方法。     

结核病现状及其实验诊断技术在卫生检疫中的应用

目的 国际旅行的迅速发展导致结核病在全球快速播散.通过对结核病流行现状和入世后卫生检疫面临的形势进行分析,探讨应用简便、快速、特异性高的方法进行结核病检测.方法 对正在应用和研究的结核病实验诊断技术进行分析比较.结核病细菌学检查方法常用的有痰涂片镜检法、结核菌分离培养法、结核菌快速培养法;新进发展建立的结核病的生物技术快速检测方法有:结核病的免疫学诊断、聚合酶链反应(PCR).结果 结核病细菌学检查方法存在技术缺陷,不能满足在出入境人员中进行结核病快速检测和诊断的要求.免疫学诊断技术和分子生物学诊断技术快速、特异、灵敏.结论 要认真履行法律赋予的职责,加强检验检疫系统结核病监测工作.应用快速诊断技术对于提高检验检疫工作时效具有相当重要的作用.     

3种梅毒筛杏方法的比较

目的:选择高敏感度、高特异度的梅毒血清学筛查方法,提高检出率,为卫生检疫执法提供技术支持.方法:分别用TP-ELISA、TRUST、金标法对102份TPPA确证阳性血清,5份TPPA可疑血清,220份TPPA确证阴性血清进行实验,比较3种梅毒初筛方法的敏感度和特异度.结果:TP-ELISA敏感度98.04%,特异度100%;TRUST敏感度78.43%,特异度99.55%;快速法敏感度72.55%,特异度100%.结论:作者认为对出入境人员的梅毒监测可采用,I'P-ELISA作为筛查方法,加急标本使用快速法.阳性用TPPA进一步确证.确证阳性做TRUST.根据滴度的变化判断梅毒的治疗效果及传染性,为检疫执法提供技术支持.     

2001年成都口岸从业人员HBsAg监测结果分析

应用血清学方法对2001年成都口岸从业人员HBsAg的感染情况作了调查。在1288名受检者中查出HBsAg阳性人数31人,阳性率为 2.41％。并对不同性别、不同年龄组、不同工种人员HBsAg阳性率进行比较,分析了他们之间的差异,为今后传染病监测工作提供依据。 肝病,特别是乙型肝炎,困扰着社会,危害人民的健康,影响正常的社交、升学、就业。当今世界各国都把攻克肝病这个课题提到重要位置。按照我国《食品卫生法》的规定,为加强口岸公共场所从业人员乙肝病毒感染者的管理,防止乙肝携带者对健康人群的危害,2001年6月,四川出入境检验检疫局对成都口岸1288名从业人员进行了血清学检验,检出HBsAg阳性人数31人,现将结果报告如下。1 材料和方法     

磁珠法结合实时荧光PCR试剂检测HBV-DNA临床性能验证

目的 分析磁珠法提取核酸结合实时荧光定量PCR试剂检测HBV-DNA的性能及其临床应用价值,有助于选择试剂。方法 按照CNAS-CL36能力验证要求,收集四川省人民医院乙肝病人血清样本,对三家磁珠法核酸提取实时荧光定量PCR试剂（A、B、C试剂）的精密度、正确度、检出限、可报告范围、抗干扰能力等等性能参数进行方法学性能验证和评价。结果 试剂A和B均能检出HBV-DNA,检出率100%,试剂C的检出率为83.3%,与厂家公布的定量检测下限20 IU/ml不一致。试剂A检测低浓度和高浓度标本的批内变异系数（CV）均低于5%;试剂B检测低浓度标本的批间CV≥5%,高浓度标本批间CV≤5%,试剂C检测低浓度和高浓度标本的批间CV均≥5%。3种试剂在分析测量范围内均线性关系良好。干扰试验显示,3种试剂均受到严重溶血、脂血标本的影响,但不受轻微溶血、脂血标本的影响。结论 通过对3种试剂的性能验证,达安基因公司的一步法（磁珠法）HBV-DNA定量检测试剂灵敏度高,有利于乙肝筛查和临床疗效的监测、随访。     

丙型肝炎病毒检测方法进展及应用

丙型肝炎病毒(HCV)感染的实验室检测是丙型肝炎诊断的重要依据。本文对目前主要应用的各种检测方法的主要内容、应用范围及主要特点进行系统综述。     

成都地区汉族人群15个STR基因座遗传多态性的研究

目的对成都汉族D3S1358,TH01,D21S11,D18551,PentaE,D55818,D13S317,D7S820,D16SS39,CSF1PO,Penta D,VWA,D8S1179,TPOX,FGA等15个STR基因座的遗传多态性进行群体遗传学研究。方法利用荧光标记复合扩增及毛细管电泳自动荧光检测的方法,对232名无关个体获得15个STR基因座等位基因的分布频率等群体遗传学数据。结果 D3S1358,TH01,D21S11,D18551,PentaE,D55818,D13S317,D7S820,D16SS39,CSF1PO,Penta D,VWA,D8S1179,TPOX,FGA等15个基因座上分别检出等位基因经检验在D3S1358、TH01、D21S11、D18551、PentaE、D55818、D13S317、D7S820、D16SS39、CSF1PO、Penta D、VWA、D8S1179、TPOX、FGA基因座上分别有8,6,16,16,20,9,8,8,8,8,11,12,8,6,18个等位基因。他们的等位基因频率分别在0.002-0.356、0.037-0.498、0.002-0.256、0.002-0.19、0.002-0.168、0.002-0.349、0.002-0.284、0.002-0.371、0.002-0.267、0.002-0.366、0.002-0.328、0.002-0.31、0.024-0.211、0.002-0.519、0.002-0.209之间。15个STR基因座的基因型在调查的群体中的分布符合Hardy-weinberg平衡,累积个人识别率(TDP)大于0.99999999,累积非父排除率(CEP)等于0.999999。结论这15个STR基因座多态性好,灵敏度高,可用于人类遗传分析及法医学中的亲子鉴定和个人识别。     

4种HIV筛查试剂的性能评价

目的 对3种HIV ELISA试剂以及1种胶体硒快检HIV筛查试剂检测性能进行对比分析,评估其检测效能。 方法 用荷兰生物梅里埃、法国伯乐、珠海丽珠HIV ELISA试剂以及美国雅培Alere Determine胶体硒法快检试剂,同时对202例HIV筛查阴性以及195例阳性（其中70例弱阳性）,共397例血清样本进行检测。以WB法为金标准对初筛阳性标本进行HIV确证。 结果 397例样本经WB确认共检测出HIV-1抗体阳性126例（31.74%）,259例HIV抗体阴性,另有12例HIV抗体不确定,经4周后复查判为阴性。梅里埃试剂的敏感度为100.00%,伯乐、丽珠以及Alere试剂的敏感度均为99.21%;梅里埃、伯乐、丽珠、Alere的特异度分别为74.54%、97.42%、98.89%、99.26%;阳性预测值为64.62%、94.70%、97.66%、98.43%,阴性预测值为100.00%、99.62%、99.63%、99.63%,功效为82.62%、97.98%、98.9%、99.24%;Youden指数分别为74.54%、96.63%、98.10%、98.47%。梅里埃的特异性高于WB法（χ2=24.181,P＜0.001）,其余3种筛查试剂与WB法检测结果相似。伯乐试剂的变异系数最小。 结论 梅里埃试剂在用于HIV初筛检测中假阳性率明显高于其他3种初筛试剂,伯乐、丽珠以及Alere试剂性能良好,满足出入境人员HIV筛查需要。