森林脑炎、登革热和乙型脑炎病毒液相蛋白芯片多重检测方法的建立及应用

目的建立森林脑炎、登革热和乙型脑炎病毒液相蛋白芯片检测方法。方法将病毒抗原包被微球,利用病毒抗体和阳性血清建立并优化森林脑炎、登革热和乙型脑炎病毒液相蛋白芯片检测方法,评价方法的敏感性和准确性。结果建立的液相蛋白芯片检测方法病毒抗体和生物素标记二抗的孵育时间均为1 h,生物素标记羊抗兔Ig G和羊抗人Ig G最佳稀释度分别为1∶200和1∶100,能对3种病毒单一和混合感染准确检测。对295份临床样本的检测结果表明,该方法具有高通量、快速、敏感、特异的特点。结论本方法能对3种虫媒病毒同时进行快速检测,为虫媒病毒的筛查检测提供一种新方法。     

3种梅毒筛杏方法的比较

目的:选择高敏感度、高特异度的梅毒血清学筛查方法,提高检出率,为卫生检疫执法提供技术支持.方法:分别用TP-ELISA、TRUST、金标法对102份TPPA确证阳性血清,5份TPPA可疑血清,220份TPPA确证阴性血清进行实验,比较3种梅毒初筛方法的敏感度和特异度.结果:TP-ELISA敏感度98.04%,特异度100%;TRUST敏感度78.43%,特异度99.55%;快速法敏感度72.55%,特异度100%.结论:作者认为对出入境人员的梅毒监测可采用,I'P-ELISA作为筛查方法,加急标本使用快速法.阳性用TPPA进一步确证.确证阳性做TRUST.根据滴度的变化判断梅毒的治疗效果及传染性,为检疫执法提供技术支持.     

丙型肝炎病毒检测方法进展及应用

丙型肝炎病毒(HCV)感染的实验室检测是丙型肝炎诊断的重要依据。本文对目前主要应用的各种检测方法的主要内容、应用范围及主要特点进行系统综述。     

成都地区汉族人群15个STR基因座遗传多态性的研究

目的对成都汉族D3S1358,TH01,D21S11,D18551,PentaE,D55818,D13S317,D7S820,D16SS39,CSF1PO,Penta D,VWA,D8S1179,TPOX,FGA等15个STR基因座的遗传多态性进行群体遗传学研究。方法利用荧光标记复合扩增及毛细管电泳自动荧光检测的方法,对232名无关个体获得15个STR基因座等位基因的分布频率等群体遗传学数据。结果 D3S1358,TH01,D21S11,D18551,PentaE,D55818,D13S317,D7S820,D16SS39,CSF1PO,Penta D,VWA,D8S1179,TPOX,FGA等15个基因座上分别检出等位基因经检验在D3S1358、TH01、D21S11、D18551、PentaE、D55818、D13S317、D7S820、D16SS39、CSF1PO、Penta D、VWA、D8S1179、TPOX、FGA基因座上分别有8,6,16,16,20,9,8,8,8,8,11,12,8,6,18个等位基因。他们的等位基因频率分别在0.002-0.356、0.037-0.498、0.002-0.256、0.002-0.19、0.002-0.168、0.002-0.349、0.002-0.284、0.002-0.371、0.002-0.267、0.002-0.366、0.002-0.328、0.002-0.31、0.024-0.211、0.002-0.519、0.002-0.209之间。15个STR基因座的基因型在调查的群体中的分布符合Hardy-weinberg平衡,累积个人识别率(TDP)大于0.99999999,累积非父排除率(CEP)等于0.999999。结论这15个STR基因座多态性好,灵敏度高,可用于人类遗传分析及法医学中的亲子鉴定和个人识别。     

4种HIV筛查试剂的性能评价

目的 对3种HIV ELISA试剂以及1种胶体硒快检HIV筛查试剂检测性能进行对比分析,评估其检测效能。 方法 用荷兰生物梅里埃、法国伯乐、珠海丽珠HIV ELISA试剂以及美国雅培Alere Determine胶体硒法快检试剂,同时对202例HIV筛查阴性以及195例阳性（其中70例弱阳性）,共397例血清样本进行检测。以WB法为金标准对初筛阳性标本进行HIV确证。 结果 397例样本经WB确认共检测出HIV-1抗体阳性126例（31.74%）,259例HIV抗体阴性,另有12例HIV抗体不确定,经4周后复查判为阴性。梅里埃试剂的敏感度为100.00%,伯乐、丽珠以及Alere试剂的敏感度均为99.21%;梅里埃、伯乐、丽珠、Alere的特异度分别为74.54%、97.42%、98.89%、99.26%;阳性预测值为64.62%、94.70%、97.66%、98.43%,阴性预测值为100.00%、99.62%、99.63%、99.63%,功效为82.62%、97.98%、98.9%、99.24%;Youden指数分别为74.54%、96.63%、98.10%、98.47%。梅里埃的特异性高于WB法（χ2=24.181,P＜0.001）,其余3种筛查试剂与WB法检测结果相似。伯乐试剂的变异系数最小。 结论 梅里埃试剂在用于HIV初筛检测中假阳性率明显高于其他3种初筛试剂,伯乐、丽珠以及Alere试剂性能良好,满足出入境人员HIV筛查需要。     

2007—2011年成都双流国境口岸入境人员HBsAg监测结果分析

目的了解成都双流国境口岸入境人员乙型肝炎病毒感染情况及变化趋势,为加强国境口岸乙型肝炎防控工作提供信息。方法对2007—2011年四川国际旅行卫生保健中心监测的成都双流国境口岸入境人群HBsAg感染资料进行统计学分析。结果2007—2011年监测成都双流口岸入境人员12004人,其中HBsAg阳性者379人,阳性检出率3．16％。中间年龄组（30-50岁）HBsAg阳性检出率最高,劳务人员感染者最多,男性HBsAg阳性检出率高于女性（P〈0．05）。结论劳务人员HBsAg阳性检出率稳定,检出人数多,是成都双流国境口岸的输人性乙型肝炎主要防控监测对象。     

多基因表达系统在口岸流感病毒检测中的应用

目的 多基因表达分析系统(Gene expression Profiler genetic analysis system, GeXP)是一种全新的基因表达分析平台,检测特异性强,检测速度和灵敏度明显提高。本研究利用GeXP系统和多重PCR技术,结合我国口岸检疫查验主要呼吸道传染病现状,建立甲型流感病毒、乙型流感病毒、甲型H1N1病毒的检测技术方法。方法 制备病毒标准品质粒,收集病原体样本,利用GenBank下载3种病毒的核苷酸序列,根据3种病毒的序列特征,利用GeXP eXpress Profiler设计特异性引物,优化条件使GeXP系统能够特异性的检测对应病毒。结果 优化后的引物能够检测3种病毒,产物经GeXP检测,3个峰值位于166.04 bp、193.33 bp、251.42 bp,符合甲型流感病毒、乙型流感病毒、甲型H1N1病毒病原体质粒PCR产物条带大小,特异性强,无交叉反应。对已知临床样本的检测中,检出率高且特异性强。结论 GeXP系统能够用于病原体高通量检测工作,有益于扩展检测途径,提高检测效率。     

四种结核抗原的诊断效能分析与建立结核抗原诊断效能的评价体系

目的通过对4种结核分枝杆菌抗原的诊断效能分析,初步建立其诊断效能评价体系,为结核病免疫学诊断筛选特异、有效抗原提供根据。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和受试者工作特征曲线法(Receiver Operating Characteristic,ROC)建立结核抗原诊断效能评价体系。然后,对4种重组结核抗原的诊断效能进行分析,得出各种抗原组合的检测阳性率,进而评价得出最佳的抗原组合方式。结果该结核抗原诊断效能的评价体系包括最佳ELISA反应体系、ROC曲线的建立、确定各种抗原最佳临界值(Cut-off value)、最佳抗原组合方式的确定。ELISA检测体系的中CFP10、38kDa、MPT64和Ag85B的最佳蛋白包被浓度分别为0.5μg/mL、2μg/mL、2μg/mL和1μg/mL,最佳血清稀释度分别为1∶250、1∶225、1∶225和1∶225;对这4种结核抗原及其不同组合的ELISA检测诊断效能进行了评价,以组合抗原的诊断效能较好,最佳组合为38kDa+CFP10+MPT64,阳性率为64.7%。结论成功建立了结核抗原诊断效能评价体系。结果显示ELISA检测中以多组分抗原组合为宜。     

多重PCR检测粪便中沙门菌、志贺菌和大肠杆菌O157:H7方法的研究

[目的]建立12h内快速检测粪便中沙门菌、志贺菌和大肠杆菌O157︰H7的多重PCR方法。[方法]探讨已报道的多重PCR体系检测粪便中3种目的菌的可行性,根据沙门菌invA基因、志贺菌ipaH基因及大肠杆菌O157︰H7rfbE基因筛选设计新引物,优化反应条件,测定方法灵敏度和特异性。8h短时增菌后,对24份模拟粪便样品进行检测。[结果]已报道的多重PCR体系不适用于粪便中3种目的菌的检测;新建立的体系适用于粪便样品的检测,能在12h内同时检测3种目的菌。通过短时增菌,该体系对粪便样品中沙门菌、志贺菌和大肠杆菌O157︰H7的灵敏度分别为:8.5cfu/10ml增菌液,27cfu/10ml增菌液,5cfu/10ml增菌液。对28株目的菌和13株非目的菌的检测结果表明该方法具有良好特异性。[结论]成功建立能在12h内同时检测粪便样品中沙门菌、志贺菌和大肠杆菌O157︰H7的多重PCR检测方法,该方法特别适用于健康带菌者3种目的菌的快速筛查,为卫生检验检疫、食品微生物安全的监测和监督提供一有用的工具。     

2012年四川省入境人群疟疾、登革热、乙脑、基孔肯雅热疫情监测分析

目的 了解四川省入境人群疟疾、登革热、乙脑、基孔肯雅热的疫情动态,为入境人群疟疾、登革热、乙脑、基孔肯雅热流行趋势的预测、预警和制定防治对策、措施提供科学依据.方法 采集入境人员血液,用镜检、胶体金、ELISA、RT-PCR等方法进行疟疾、登革热、乙脑、基孔肯雅热的检测.结果 2012年四川省入境人群疟疾监测阳性率达2.62％,均为赴非洲的劳务人群.登革热、乙脑、基孔肯雅热阳性率均为0.结论 2012年四川省入境人群蚊媒病感染以疟疾尤其是恶性疟为主,感染者主要是赴非洲务工的劳务人员,因此应进一步加大对赴非洲劳务人员关于防疟知识的宣教和防疟措施的推广;出入境检验检疫局应对来自蚊媒病高发地区的国际航班进行重点监控,加大入境人群的传染病监管力度,及早发现输入性蚊媒传染病;本次虽未检出登革热、乙脑和基孔肯雅热,但这些传染病仍有潜在存在的可能性,应高度重视.