从滇西北地区首次分离到版纳病毒

目的 对滇西北地区分离的版纳病毒进行系统鉴定,明确与云南其他地区分离株的差异.方法 对2005、2006年从滇西北地区分离的3株版纳病毒进行形态学、基因组带型和分子生物学鉴定,测定第12片段核苷酸序列,进行序列的同源性和系统进化分析.结果 从2005、2006年滇西北蚊虫标本中分离到的3株版纳病毒为直径约70 nm、无包膜、有双层衣壳的球形颗粒,基因组带型为6-6分布.3株版纳病毒问第12片段核苷酸序列同源性为99%,与云南其他地区和印度尼西亚版纳病毒毒株的最大同源性分别为98%和90%;系统进化分析显示滇西北分离株和云南其他地区分离株共同形成一个分枝;第12片段编码的氨基酸序列比较发现我国版纳分离株和印度尼西亚毒株间存在共同的氨基酸残基差异.结论 首次从滇西北地区蚊虫中分离到3株版纳病毒,基因序列分析显示滇两北分离株和云南其他地区分离株同源性较高.     

HPV16 主要衣壳蛋白L1在昆虫细胞中的表达及免疫学活性分析

目的 在昆虫细胞中表达HPV16L1（曲02）蛋白，并分析其免疫学活性。方法 构建表达载体pEASTBACTHb-L1(m202)，用重组病毒感染sf9细胞表达HPV16L1（m202)蛋白，SDS-PAGE，western-blot鉴定其表达，亲和层析和离子交换层析纯化后的产物经鼻腔免疫Balb/c小鼠，竞争抑制ELISA分析免疫血清的中和活性。结果 SDS-PAGE，western-blot结果证明HPV16L1（m202)蛋白的表达，纯化复性后产率约为17%，免疫血清具有竞争抑制HPV中和单抗与HPV16L1（m202)相结合的能力，结论 昆虫细胞表达的HPV16L1（m202)蛋白具有作为预防疫苗的潜力。     

秦皇岛口岸首例输入性登革热病例的分子溯源

目的对2012年秦皇岛口岸的首例登革热输入性病例进行分子溯源,确定病毒的基因型别及感染来源。方法应用ELISA方法和实时荧光RT-PCR方法对患者进行初筛,利用RT-PCR法扩增病毒的NS1基因并测序,根据获得的序列进行同源性分析、遗传距离计算及系统进化树的构建。结果从患者2份血清(QHD-01-BS1和QHD-01-BS2)中检测到Ig M抗体阳性,从QHD-01-BS1及尿液(QHD-01-US)中检测到登革热2型病毒的NS1基因。同源性分析发现QHD-01-BS1(US)与COM基因型中的印度株GWL39 INDI-01和GWL18 INDI-01同源性最高,为97.3%;QHD-01-BS1(US)的遗传距离与COM基因型遗传距离最小,为0.04;进化分析显示QHD-01-BS1(US)与GWL39 INDI-01和GWL18 INDI-01亲缘关系最近。结论分子溯源证实患者感染的登革热病毒与来源于印度的登革热2型病毒亲缘关系最近,指示其传染源极有可能在印度。     

人乳头瘤病毒16型主要衣壳蛋白L1的纯化

目的 :探讨人乳头瘤病毒 16型主要衣壳蛋白 L 1的纯化方法。方法 :分别利用亲和层析和离子交换层析对重组融合蛋白 p ET30 a- 6× His- L 1进行了纯化。结果 :以包涵体形式表达的重组蛋白在变性条件下经 Ni- NTA Agarose、Q- Sepharose FF纯化 ,透析复性后均获得较高纯度 ,回收率分别为 30 %和2 9%。结论 :亲和层析和离子交换层析都是纯化重组 L 1蛋白的适宜方法 ,二者纯化效率相当。     

2008-2009年中俄边境满洲里-后贝加尔口岸地区鼠类名录

本文根据中俄联合监测小组对中俄边境口岸地区鼠形动物监测调查资料,编撰2008年中俄边境满洲里-后贝加尔口岸地区鼠类名录,旨在为该地区的公共卫生工作及相关鼠传疾病的防治提供基础资料。结果满洲里口岸地区鼠形动物为2目6科8属8种,后贝加尔口岸地区鼠形动物为2目4科6属7种。     

五种生物恐怖细菌基因悬浮芯片多重检测方法的建立

目的 建立5种生物恐怖细菌的快速、高通量的基因悬浮芯片检测方法 ,即炭疽芽胞杆菌、鼠疫耶尔森菌、布鲁菌、土拉弗朗西斯菌和类鼻疽伯克霍尔德菌的多重检测.方法 针对炭疽芽孢杆菌、鼠疫耶尔森菌、布鲁菌、土拉弗朗西菌、类鼻疽伯克霍尔德菌的特异性基因序列设计6对引物和相应的特异性探针,经多重PCR扩增并用生物素标记相应的基因片段,标记的PCR产物与包被在不同编码微球上的相应探针杂交,用悬浮芯片扫描仪检测.结果 多重PCR悬浮芯片检测体系能够正确的检测和鉴定5种生物恐怖细菌,特异性好,灵敏度高,可用于恐怖样本的高通量筛查.结论 建立了多重PCR基因悬浮芯片快速检测几种生物恐怖细菌的方法 .     

黄病毒属TaqMan探针荧光定量RT-PCR检测方法建立

目的建立用于检测黄病毒属的TaqMan探针荧光定量RT-PCR方法。方法从GenBank中检索黄病毒属代表株的全基因序列,通过DNAstar进行序列比对和blast进行保守序列搜索和分析,用Beacon Designer 7.0软件进行引物和TaqMan探针设计,以乙脑毒株MB090509 RNA为模板,优化反应条件并应用于现场蚊虫标本检测。结果确定黄病毒属TaqMan探针荧光定量RT-PCR反应条件为:45℃15 min,95℃10 min,95℃10 s→54℃45 s,40次循环,引物和探针终浓度为200 nmol/L。灵敏度为常规RT-PCR方法 100倍,检出限2.9×10-3噬斑形成单位(PFU)/mL,与甲病毒属、东南亚十二节段RNA病毒属、布尼亚病毒属均无交叉反应。从161份现场蚊虫标本中检测出11份阳性标本,经病毒分离、测序均被证实为乙脑病毒。结论本研究建立的黄病毒属TaqMan探针荧光定量RT-PCR方法具有广泛应用价值。     

咪唑安定、异丙酚复合诱导用于老年肿瘤患者麻醉的临床研究

近年来随着人们对药物研究的深入和临床监测技术的发展，越来越多的联合用药方案被麻醉医生应用于麻醉诱导。其中咪唑安定和异丙酚就是一对优秀的组合。老年人由于在衰老过程中心血管结构和功能的改变，维持其在麻醉诱导期间血流动力学的稳定，对于其顺利度过围手术期具有十分重要的意义。本文拟就咪唑安定和异丙酚复合诱导在老年肿瘤患者中的临床应用进行研究和分析。     

黄病毒属病毒CODEHOP RT—PCR检测方法的建立

目的建立一种能快速检测黄病毒属病毒的CODEHOPRT—PCR方法。方法根据GenBank发丧的不同黄病毒多聚蛋白氯基酸序列,利用CODEHOP方法设计合成一对引物,建立能快速检测黄病毒属所有病毒的CODE～HOPRT—PCR方法,并用3种不同病毒株对该方法进行特异性和灵敏度评价。结果建立的CODEHOPRTPCR能埘黄病毒RNA进行特导性扩增,目的片段的大小（400-500bp）和序列与预期结果相符。该方法对黄病毒恢酸的最小检出量为8Pg。结论建立的CODEHOPRT—PCR方法特异强、灵敏高,可用于黄病毒的榆测。     

卫生成教学员艾滋病防治知识调查结果分析

自首例艾滋病(AIDS)患者发现至今,AIDS在全球肆虐流行,已成为现代历史上最严重的瘟疫.我国感染人数近100万,分布在全国各省、自治区、直辖市,遍布社会各阶层[1].我市自1995年发现第一例艾滋病感染者以来,感染人数逐年增加,目前艾滋病病人和感染者累积人数在河北省上升到第三位.由于我市地处山区,交通不便、信息闭塞,医疗卫生状况较差, AIDS防治工作任重而道远.为今后制定基层医务人员AIDS教育和培训规划提供依据,组织了本次调查.