秦皇岛口岸首例输入性登革热病例的分子溯源

目的对2012年秦皇岛口岸的首例登革热输入性病例进行分子溯源,确定病毒的基因型别及感染来源。方法应用ELISA方法和实时荧光RT-PCR方法对患者进行初筛,利用RT-PCR法扩增病毒的NS1基因并测序,根据获得的序列进行同源性分析、遗传距离计算及系统进化树的构建。结果从患者2份血清(QHD-01-BS1和QHD-01-BS2)中检测到Ig M抗体阳性,从QHD-01-BS1及尿液(QHD-01-US)中检测到登革热2型病毒的NS1基因。同源性分析发现QHD-01-BS1(US)与COM基因型中的印度株GWL39 INDI-01和GWL18 INDI-01同源性最高,为97.3%;QHD-01-BS1(US)的遗传距离与COM基因型遗传距离最小,为0.04;进化分析显示QHD-01-BS1(US)与GWL39 INDI-01和GWL18 INDI-01亲缘关系最近。结论分子溯源证实患者感染的登革热病毒与来源于印度的登革热2型病毒亲缘关系最近,指示其传染源极有可能在印度。     

云南登革4型病毒的鉴定及NS1和NS2a基因序列分析

目的 对1989年8月分离自云南省盈江县蚊虫的2株登革病毒进行生物学及分子特征的鉴定，明确这两株病毒的血清型及基因型。方法 蚊虫用BHK21细胞和乳鼠法分离病毒，用间接免疫荧光试验、RT-PCR等方法进行鉴定，并对这两株病毒的分子生物学特征进行分析。结果 从自纹伊蚊和达勒姆阿蚊中各分离到一株病毒；分别命名为M110和M113，这两株病毒对BHK21细胞能产生明显的细胞病变。脑内接种乳鼠4d左右导致乳鼠死亡。该病毒经血凝、血凝抑制和间接免疫荧光试验提示为黄病毒。分别用黄病毒属特异引物、登革4型病毒NS1和NS2a基因片段特异引物进行RT—PCR扩增、序列测定，证实为登革4型病毒。NS1和NS2a基因序列片段分析表明，M110和M113的NS1核苷酸序列与登革4型病毒基因I型的H241株（Y19176）同源性最高。分别为99％、98％；NS2a基因片段与H241的核苷酸序列的同源性分别为96．5％、97．1％。结论 从盈江县蚊虫分离到的M110和M113病毒为登革4型病毒基因I型，表明云南省西部边境地区在20世纪80年代发生过登革4型病毒的流行。     

中俄双边口岸地区鼠形动物监测名录

目的于2006至2009年间对中俄黑龙江、内蒙古双边11个口岸地区的鼠形动物进行本底调查。方法 5 m夹夜法、弓形夹法及电弧捕鼠器捕捉法。结果编著中俄双边11个口岸鼠形动物名录。结论该名录为中俄口岸公共卫生及鼠传疾病的防治提供本底资料。     

中俄边境中部地区不同生境鼠类初步调查研究

目的调查2008年中俄边境中部地区不同生境鼠的种类组成和携带体外寄生虫的情况。方法采用夹夜法捕鼠。结果本次调查共捕获啮齿类动物4科7属计266只,同时捕获啮齿类动物的体外寄生虫蚤371只、螨133只、蜱1只。4种生境分布的鼠种的多样性不同,田地的鼠种多样性最高,其次为草地及林区,口岸的鼠种最为单一。同时,所有生境下捕获黑线姬鼠占21%,黑线仓鼠占21%,长尾黄鼠占16%,东方田鼠占13%,大林姬鼠占11%,棕背鼠平占10%,花鼠占7%及褐家鼠占1%。结论为中俄边境地区深入开展鼠类防治研究提供了重要依据。     

首次从老挝蚊虫标本中检测到版纳病毒

目的对中国-老挝边境口岸地区云南省勐腊县和老挝勐新县采集的蚊虫标本进行版纳病毒检测。方法2009年8月在勐腊县、勐新县人房和畜圈采集蚊虫标本,从蚊虫研磨液中提取RNA,用RT-PCR方法扩增版纳病毒第3、5、7、9、l1、12节段序列,聚丙烯酰胺凝胶电泳检测核酸扩增阳性标本的基因组带型,利用MEGA 4软件进行系统进化分析。结果共检测蚊虫标本80批,其中3批老挝标本扩增到版纳病毒第3、7、11节段核酸序列,聚丙烯酰胺凝胶电泳显示3个阳性分离物的基因组均为12条带双链RNA,系统进化分析显示3个老挝版纳病毒分离物位于2个进化分支,其中1株与越南分离株关系最近。结论首次从老挝蚊虫标本中检测到版纳病毒,老挝分离株与中国、越南分离株之间发生了基因重配。     

人乳头瘤病毒16型主要衣壳蛋白L1的纯化

目的 :探讨人乳头瘤病毒 16型主要衣壳蛋白 L 1的纯化方法。方法 :分别利用亲和层析和离子交换层析对重组融合蛋白 p ET30 a- 6× His- L 1进行了纯化。结果 :以包涵体形式表达的重组蛋白在变性条件下经 Ni- NTA Agarose、Q- Sepharose FF纯化 ,透析复性后均获得较高纯度 ,回收率分别为 30 %和2 9%。结论 :亲和层析和离子交换层析都是纯化重组 L 1蛋白的适宜方法 ,二者纯化效率相当。     

中越河口-老街边境地区鼠传疾病病原的调查研究

〔目的〕掌握中越河口—老街边境地区鼠携带汉坦病毒、钩端螺旋体和鼠疫杆菌的情况。〔方法〕2008年11月和2009年4月在云南省河口县和越南老街市的居民区用鼠笼捕鼠,取鼠肺、肝和肾脏组织。从鼠肺中提取RNA,用RT-PCR方法扩增汉坦病毒核酸;从鼠肝和肾脏中提取DNA,用PCR方法分别扩增鼠疫杆菌和钩端螺旋体核酸。〔结果〕在河口—老街边境地区捕获黄胸鼠、褐家鼠、大足鼠、小家鼠、臭鼳鼱和斯氏家鼠共198只,黄胸鼠数量最多,占总数的79.8%;从老街黄胸鼠鼠肺中检测到3份汉坦病毒核酸,阳性率为4.41%;从河口黄胸鼠、褐家鼠和大足鼠鼠肾中共检测到7份钩端螺旋体核酸,河口黄胸鼠钩端螺旋体核酸阳性率为11.36%;未检测到鼠疫杆菌核酸。〔结论〕中越河口—老街边境地区鼠传疾病病原有汉坦病毒和钩端螺旋体,应加强当地鼠传疾病的监测。     

五种生物恐怖细菌基因悬浮芯片多重检测方法的建立

目的 建立5种生物恐怖细菌的快速、高通量的基因悬浮芯片检测方法 ,即炭疽芽胞杆菌、鼠疫耶尔森菌、布鲁菌、土拉弗朗西斯菌和类鼻疽伯克霍尔德菌的多重检测.方法 针对炭疽芽孢杆菌、鼠疫耶尔森菌、布鲁菌、土拉弗朗西菌、类鼻疽伯克霍尔德菌的特异性基因序列设计6对引物和相应的特异性探针,经多重PCR扩增并用生物素标记相应的基因片段,标记的PCR产物与包被在不同编码微球上的相应探针杂交,用悬浮芯片扫描仪检测.结果 多重PCR悬浮芯片检测体系能够正确的检测和鉴定5种生物恐怖细菌,特异性好,灵敏度高,可用于恐怖样本的高通量筛查.结论 建立了多重PCR基因悬浮芯片快速检测几种生物恐怖细菌的方法 .     

卫生成教学员艾滋病防治知识调查结果分析

自首例艾滋病(AIDS)患者发现至今,AIDS在全球肆虐流行,已成为现代历史上最严重的瘟疫.我国感染人数近100万,分布在全国各省、自治区、直辖市,遍布社会各阶层[1].我市自1995年发现第一例艾滋病感染者以来,感染人数逐年增加,目前艾滋病病人和感染者累积人数在河北省上升到第三位.由于我市地处山区,交通不便、信息闭塞,医疗卫生状况较差, AIDS防治工作任重而道远.为今后制定基层医务人员AIDS教育和培训规划提供依据,组织了本次调查.     

2008-2009年中俄边境满洲里-后贝加尔口岸地区鼠类名录

本文根据中俄联合监测小组对中俄边境口岸地区鼠形动物监测调查资料,编撰2008年中俄边境满洲里-后贝加尔口岸地区鼠类名录,旨在为该地区的公共卫生工作及相关鼠传疾病的防治提供基础资料。结果满洲里口岸地区鼠形动物为2目6科8属8种,后贝加尔口岸地区鼠形动物为2目4科6属7种。