透射电镜超薄切片污染产生的原因及对策

目的 分析电镜超薄切片污染产生的原因及消除污染的对策。方法 对样品制备及观察的每个环节逐一分析，对可能引起污染的各种因素采取有针对性的解决方法，严格按照透射电镜生物样品的制备要点进行操作。结果 消除了污染，保证了超薄切片的质量，电镜下拍出高质量的照片。结论 污染的原因是多方面、多因素的，只要工作中精益求精，基本上可以避免切片污染。     

电镜诊断的快速制样方法

讨论用于临床诊断的透射电镜生物样品快速制样方法。对正常及病变组织进行前固定、漂洗、后固定、漂洗、脱水、浸透及包埋聚合、超薄切片、铀铅双染过程实验研究。从固定到聚合过程只需5h,组织和细胞的各种超微结构保存良好。     

透射电镜样品制备用硝酸铀替代醋酸铀染色方法的探讨

目的探讨透射电镜生物样品制备时,用硝酸铀乙醇溶液替代常规醋酸双氧铀乙醇溶液染色方法。方法在相同条件下,分别用硝酸铀乙醇溶液、硝酸铀水溶液和醋酸双氧铀乙醇溶液对同一样品切片染色,在电镜下观察、比较切片反差情况。结果硝酸铀乙醇溶液染色切片与醋酸双氧铀乙醇溶液染色切片反差基本相同,而硝酸铀水溶液染色切片反差弱。结论硝酸铀乙醇溶液可替代常规的醋酸双氧铀乙醇溶液染色。     

染砷小鼠脑突触结构变化及相关基因差异表达

目的 观察染砷小鼠大脑神经突触结构变化及相关基因表达.方法 30只昆明种小鼠,按体重分为3组,即对照组、1和4 mg/L染砷组,染毒60 d.应用电镜和基因芯片技术观察砷对小鼠大脑神经突触结构及相关基因表达的影响.结果 对照组小鼠大脑突触结构清晰,突触前膜、间隙和后膜特化带清晰,前突触中可见较多的突触小泡.染砷组小鼠大脑突触前膜、间隙及后膜轮廓清晰,突触前膜的突触小泡数量明显减少.基因芯片结果 显示,染砷组小鼠大脑突触相关基因差异表达共有10条.上调基因为依赖于钙-钙调蛋白的蛋白激酶Ⅳ(Camk4)、速激肽1(Tac1)、多巴胺受体D1A(Drd1a)和多巴胺受体D2(Drd2);表达下调的基因共有6条,分别为complexin蛋白2(Cplχ2)、钙通道α1A亚单位(Cacna1a)、谷氨酸受体互变异构NMDA2B(Grin2b)、亲代谢性谷氨酸受体7(Grm7)、肌萎缩性(脊髓)侧素硬化2(Als2)和亲代谢性谷氨酸受体2(Grm2).结论 亚慢性砷暴露对小鼠大脑突触结构及相关基因表达造成损伤性影响,提示大脑神经元突触可能是砷神经毒性作用靶部位.     

小鼠早期胚胎细胞超薄切片制备法

目的 探讨小鼠早期胚胎细胞超薄切片的制备方法，观察不同时期小鼠早期胚胎细胞的超微结构变化。方法 在体视显微镜下固定，清洗小鼠早期胚胎细胞，3％－4％琼脂预包埋，常规脱水，渗透，包埋，超薄切片后，透射电镜下观察。结果 准确性高，只需几个胚胎细胞即能做出超薄切片。结论 电镜下胚胎细胞超微结构保存良好。     

介绍一种血小板整体黏附电镜样品制备方法

本文介绍制备黏附聚集的整体血小板电镜样品。将抗凝血直接铺在覆有Formvar（聚乙烯醇缩甲醛）的铜网上,然后依次对样品进行温育、冲洗、固定、再冲洗、空气自然干燥后电镜观察。这种方法制作简单而且省时,在电镜下可见各种形态完好的血小板,圆形、树突形、扩展形度聚集形。     

指导研究生电镜取材的体会

电子显微镜技术现已广泛用于科研、医学领域，用于临床诊断。对于疾病的治疗提供可靠的依据。我们电镜室工作人员主要负责电镜制样工作，但是取材是由研究生和科研人员亲自操作，标本取好后，放入2．5％戊二醛固定后送到我们电镜室。在取材过程中出现的问题最多，如果方法不正确将导致实验结果失败，所以电镜取材是整个样品制备过程中的关键步骤之一。研究生肩负着建设国家的重任，是国家的栋梁，培养研究生是我们当老师的责任。下面是如何指导研究生电镜取材和取材过程中出现的一些问题及怎样解决做一介绍，介绍如下：     

前列腺增生并发尿潴留膀胱壁病理电镜观察

目的：观察前列腺增生症（ＢＰＨ）并发尿潴留膀胱逼尿肌功能变化。方法：对１０例ＢＰＨ并慢性尿潴留患者实施前列腺摘除术时取膀胱平滑肌组织进行透射电镜观察，同时用１例外伤性膀胱破裂及１例膀胱异物患者的膀胱平滑肌组织作对照。结果：ＢＰＨ并慢性尿潴留患者的膀胱平滑肌显示出下列病变，即平滑肌细胞肥大，排列紊乱，细胞间连接结构减少，其中以胞突连接为主，细胞内线粒体肿胀，胞膜有高电子密度沉积物，脱落细胞胞浆成分散     

对两种不同切口的超声乳化术后角膜内皮超微结构的观察

目的 探讨两种不同切口(透明角膜切口、巩膜隧道切口)的超声乳化术后角膜内皮超微结构的变化。方法 10只纯种科研兔。对照组为正常的兔角膜内皮细胞，实验组分为三组，每组3只兔，每只兔左眼均行上方巩膜隧道切口超声乳化术，右眼行颞侧透明角膜切口超声乳化术，三组分别设定超声时间为2min、2．5min、3min，透射电镜下分别观察术后即时、术后6h及术后24h两组角膜内皮细胞超微结构的变化。结果经过不同时间的超声乳化，术后即时及术后6h角膜中央1mm区域内取材的透射电镜切片示巩膜隧道切口组的内皮损害均小于透明角膜切口组。术后24h,两者的内皮变化无明显差异。且超声时间超过2．5min，内皮出现裸区。结论在相同的手术条件下，巩膜隧道切口超声乳化术后角膜内皮的损伤小于透明角膜切口的超声乳化术。     

谷氨酸信号通路对黑素细胞黑素转运的作用

目的 探讨谷氨酸信号通路在黑素转运中的作用。 方法 原代培养并纯化黑素细胞及角质形成细胞,免疫荧光显微镜观察离子型谷氨酸受体N-甲基-D-天冬氨酸受体1（NMDAR1）和N-甲基-D-天冬氨酸受体2A（NMDAR2A）在黑素细胞内的分布,共聚焦显微镜观察100 μmol/L NMDAR激动剂NMDA和100 μmol/L拮抗剂地卓西平马来酸盐（dizocilpine maleate,MK801）作用5 min和1 h后黑素细胞内钙离子浓度的变化以及100 μmol/L MK801对黑素细胞内微管蛋白的影响。结果 100 μmol/L NMDA可使黑素细胞内瞬时钙离子浓度升高,但100 μmol/L MK801可使其降低;MK801先作用于黑素细胞5 min或1 h阻断NMDA受体后,NMDA均不能再次诱导瞬时钙离子浓度升高。共聚焦显微镜观察发现MK801作用24 h后,胞内微管蛋白重新分布聚集于核周。扫描电镜观察发现100 μmol/L MK801作用于黑素细胞-角质形成细胞共培养体系48 h后,黑素细胞和角质形成细胞之间以及两种细胞表面的丝状伪足数量明显减少。共培养体系下,100 μmol/L MK801作用后,角质形成细胞中的黑素含量明显降低,即从黑素细胞向角质形成细胞转移的黑素数量明显减少。 结论 谷氨酸信号通路对黑素细胞胞内钙离子浓度、微管蛋白分布、黑素细胞伪足形成以及黑素细胞及角质形成细胞间的黑素转运具有一定调节作用。