胃肠道恶性肿瘤中细胞胀亡的检测及意义

目的研究胃癌、大肠癌中肿瘤细胞胀亡的存在及其意义。方法采用透射电镜技术检测胃癌、大肠癌中肿瘤细胞的胀亡情况。结果(1)在胃癌、大肠癌中分别检测到了不同时期的胀亡细胞,其胀亡指数分别为(2.6±0.9)和(2.3±0.8);(2)胀亡指数在胃癌、大肠癌中与淋巴结转移相关(P<0.05),而与肿瘤的大小、部位、大体分型、组织学分型、分化程度、浸润深度及患者的年龄、性别无明显相关性(P>0.05)。结论胃肠道恶性肿瘤中存在胀亡细胞,且其有望成为判断患者预后的一项新指标。     

人食管不典型增生上皮与原位癌的计算机纹理分析研究

采用计算机图象纹理分析和相关点阵检测技术,对人食管正常粘膜、不典型增生上皮及原位癌的不同纹理特征进行了观察。观察样品为常规病理切片,用计算机图象分析系统检测了组织的纹理特征。对受检图象建立了三种灰色分层关系矩阵,同时计算了8种纹理测度。结果显示,在重度不典型增生上皮和原位癌之间,其纹理测度和相关点阵检测数据均有显著性差异(P<0.05)。全部测量数据经计算机多元逐步判别分析,其正判率达90%以上。本研究结果表明,计算机纹理分析方法可正确地判别食管癌前病变和原位癌的组织结构异型性。提示本技术在食管癌的早期诊断方面具有肯定的实用性价值。     

大肠癌组织中细胞胀亡及MMP-2检测

目的 :检测大肠癌组织中胀亡细胞及MMP - 2。方法 :应用透射电镜和免疫组化方法检测 5 1例大肠癌组织中胀亡细胞和MMP - 2的表达。结果 :①大肠癌组织中可检测到不同时期的胀亡细胞。②大肠癌组织中MMP- 2表达率 5 4 .9% (2 8/ 5 1 ) ,明显高于正常大肠粘膜 (P <0 .0 5 )。③MMP - 2在淋巴结转移组的阳性表达率为 6 9.5 7% (1 6 / 2 3) ,明显高于无淋巴结转移组的 4 2 .86 % (1 2 / 2 8) ;有淋巴结转移组胀亡指数明显低于无淋巴结转移组 (P<0 .0 5 )。④MMP - 2表达阳性组OI高于MMP - 2阴性组。结论 :大肠癌组织中存在胀亡细胞和MMP - 2的表达 ,2者关系密切 ,且均与大肠癌的转移有关。     

食管癌组织的微血管密度及其临床病理意义

目的探讨微血管密度在食管癌中的临床病理学意义。方法应用免疫组织化学SP法,对65例食管鳞状细胞癌患者的手术切除标本,进行血管内皮细胞CD     

荧光标记mRNA差异显示技术在分离食管癌相关基因片段中的应用

目的 :以荧光标记的mRNA差异显示技术分离食管癌及其正常食管粘膜组织相关的差异基因片段。方法 :结合GenomyxLRTM DNA测序 /差异显示系统及GenomyxSCTM 荧光图象扫描系统 ,以及配套的FluoroDD和HI EROGLYPHmRNAProfileKit,采用荧光标记的mRNA差异显示技术进行检测。结果 :从人食管癌及正常食管粘膜组织间 ,同时直接分离出了相关的癌基因或抑癌基因片段 74条。结论 :该技术方便、快捷 ,值得推广应用     

人食管癌相关基因cDNA片段的克隆、筛选与初步鉴定

目的 :筛选和鉴定人原发性食管癌组织的相关基因 ,揭示食管癌的癌变机理。方法 :用高效、灵敏的荧光mRNA差异显示技术 ,以食管癌及相应的正常食管粘膜组织为对照 ,通过对其基因表达的比较 ,找出差异条带 ,利用ReverseNorthernDotBlot、DNA序列分析和NorthernBlot,并结合mRNA原位杂交技术对被筛片段进行鉴定。结果 :①在实验中分离、鉴定了 74条差异片段 ,其中包括正常组织表达而癌组织中不表达的差异片段 5 4个 ,癌组织中表达而正常组织不表达的差异片段 2 0个。②其中 1个片段C5 7(337bp)在GenBank数据库中没有发现同源的已知基因或片段 ,推测其可能为食管癌相关基因。③经NorthernBlot检测C5 7在癌组织中有表达信号。④原位杂交技术检测C5 7在癌组织中具有较高的阳性表达率 (74% )。结论 :食管癌组织中C5 7可能是新的食管癌相关的候选癌基因 ,它与食管癌的发生发展可能有关     

8-Br-cAMP对肺癌NSCLC-3细胞凋亡相关基因表达的影响

目的:观察8-Br-cAMP对人肺癌NSCLC-3细胞凋亡相关基因表达的影响.方法:将体外培育的NSCLC-3细胞分为实验组和对照组,采用原位杂交方法观察8-Br-cAMP对NSCLC-3细胞c-myc、bcl-2基因表达的影响.结果:8-Br-cAMP处理后的实验组较未加8-Br-cAMP的对照组c-myc、bcl-2基因表达降低(P＜0.01).结论:8-Br-cAMP可下调与NSCLC-3细胞凋亡相关的c-myc、bcl-2基因表达.     

CyclinD_1、CDK_4蛋白在食管癌中的表达及意义

目的为探讨ＣｙｃｌｉｎＤ１、ＣＤＫ４基因及蛋白在食管癌发生中的意义及其相互间的作用。方法采用ＬＳＡＢ免疫组化染色法,对４３例食管癌手术标本的ＣｙｃｌｉｎＤ１、ＣＤＫ４蛋白进行标记。结果在鳞癌组织中,两种抗体的阳性物质存在于细胞核中和／或胞浆中,在正常鳞状上皮主要存在于核中,且从正常鳞状上皮→癌旁不典型增生→鳞癌组织,ＣｙｃｌｉｎＤ１、ＣＤＫ４的阳性率逐渐上升,统计学处理：正常上皮与癌组织之间的阳性率有差异显著性（ＰＣｙｃｌｉｎＤ１＜０．０５,ＰＣＤＫ４＜０．０５）;但未检出ＣｙｃｌｉｎＤ１、ＣＤＫ４与癌分化的关系。另外,在正常鳞状上皮中,ＣｙｃｌｉｎＤ１、ＣＤＫ４则多集中在基底层的增殖带。结论ＣｙｃｌｉｎＤ１、ＣＤＫ４蛋白表达的变化是食管癌发生中的早期事件,并且在正常细胞周期中起正调控作用。     

不同固定剂及固定时间对PCR扩增效果的影响

本研究选取五种不同固定液，分别按四种固定时间（12小时，24小时，48小时和72小时）对存在有HBVDNA的人肝癌组织进行固定，脱水包埋。然后提取组织DNA，观察不同固定液及固定时间对PCR扩增效果的影响。同时，还比较了从蜡块中制取PCR模板的四种方法。结果显示：新配中性缓冲甲醛液对组织DNA破坏较小，对PCR扩增效果影响亦较小且成本费用相对较低，固定时间最好不超过48小时。长期放置的用自来水配制的甲醛固定液对组织DNA破坏较大，DNA降解严重，直接影响PCR扩增效果。在用蜡块组织制备DNA模板上，传统酶消化，酚-氯仿抽提，酒精沉淀较为稳定，但所需组织相对较多。对小块组织，充分脱蜡，用双蒸水充分煮沸是制备PCR模板较简便的方法。根据本研究，笔者建议，在目前我国日常病理工作中，应重视对固定液的选择及固定时间的限制，以便能为进一步基因诊断提供先决条件。     

食管鳞癌组织中NDRGl mRNA和蛋白的表达

目的:探讨食管鳞癌组织中NDRG1 mRNA和蛋白的表达情况及其与临床病理因素的关系.方法:分别采用RT-PCR和免疫组织化学SP法检测49例食管鳞癌组织(分化程度Ⅰ级14例,Ⅱ级23例,Ⅲ级12例;有淋巴结转移21例,无淋巴结转移28例)、23例癌旁不典型增生黏膜组织及49例正常食管黏膜组织中NDRG1 mRNA和蛋白的表达.结果:食管鳞癌组织中NDRG1 mRNA相对含量低于癌旁不典型增生黏膜组织及正常食管黏膜组织(P＜0.05或0.01);不同分化程度的食管鳞癌组织之间NDRG1 mRNA相对含量差异无统计学意义(P＞0.05);伴淋巴结转移的食管鳞癌组织与无淋巴结转移的食管鳞癌组织NDRG1 mRNA相对含量差异无统计学意义(P＞0.05).癌旁不典型增生组织及食管鳞癌组织中NDRG1蛋白( )阳性率(3/23和4/49)均低于正常黏膜组织的43/49(P＜0.01);食管鳞癌组织中NDRG1蛋白表达与癌组织的分级及有、无淋巴结转移无关(P均＞0.05).结论:食管鳞癌组织中NDRG1 mRNA和蛋白表达降低,其低表达可能与食管鳞癌发生有关.