标本不同处理因素对神经元特异性烯醇化酶测定的影响

目的：探讨标本因素对神经元特异性烯醇化酶（NSE）测定结果的影响。方法选取健康体检者33例,分别分析标本离心后放置不同时间、不同离心时间、溶血及冰冻4种因素对 NSE 检测结果的影响。结果对照组与冰冻组比较差异无统计学意义（P ＞0．05）,与其余组结果差异均有统计学意义（P ＜0．01）。结论溶血、标本离心后放置过久,或标本放置过久后离心均可致 NSE 检测结果升高,因此若标本不能迅速检测,可先离心收集血清,冰冻后于需要时复融检测。     

血清降钙素原2种检测系统测定结果可比性及相对偏差评估

目的评估Roche公司cobas e601电化学发光免疫分析系统和BioMerieux公司mini-VIDAS免疫分析系统降钙素原(PCT)测定结果间的可比性、相对偏差及其临床可接受性。方法参考EP9-A2文件,共收集40份新鲜临床血清样本,其PCT浓度覆盖检测系统的测定范围。用2种检测系统同时测定标本,以cobas e601检测系统作为比较方法,对mini-VIDAS检测系统的测定结果进行线性回归及相对偏差评估。结果两检测系统PCT测定结果间相关系数r=0.996,直线回归方程为Y=1.137X+0.636,在2.00 ng/mL和10.00 ng/mL水平处的相对偏差分别为45.50%和20.06%。结论两系统检测结果的相对偏差不能被临床所接受,需采取适当的校正措施。     

人载脂蛋白AV原核表达载体的构建与纯化研究

目的:构建人载脂蛋白AV(apolipoprotein AV,apoAV)的原核载体并表达纯化该蛋白。方法:从人肝癌细胞系HepG2中提取总RNA,以反转录的cDNA第一链为模板,经聚合酶链式反应(PCR)扩增得到含有编码apoAV完整成熟肽段的PCR片段。PCR产物和原核表达载体pET30b经核酸内切酶双切后连接,连接产物经转化至大肠杆菌感受态细胞Top10,挑选克隆测序。重组质粒pET30b-apoAV转化大肠杆菌BL21(DE3),经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,并优化诱导表达条件,重组的apoAV经镍离子螯合树脂纯化获得。结果:经测序证实人apoAV目的基因成功克隆入pET30b原核表达载体中,经过IPTG诱导有约40KD的特异性蛋白表达,与预期大小一致。该蛋白在IPTG诱导下的最佳表达时间为5h,最佳浓度在31.3μmol/L。纯化的apoAV纯度在95%以上,产率约为15 mg/L。结论:成功构建人apoAV的原核表达载体,实现了高效表达和纯化,为进一步研究其结构与功能奠定了基础。     

肝细胞生长因子(HGF)诱导肝癌Huh7细胞发生上皮间质转化(EMT)后细胞膜表面糖蛋白糖谱的变化

 目的  应用凝集素芯片技术寻找肝癌细胞表面转移相关的特征性糖谱。方法  应用肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)诱导建立肝癌上皮间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)细胞模型。通过凝集素芯片比较诱导前后细胞膜的糖谱改变,采用凝集素印迹和荧光细胞凝集素免疫组化方法验证芯片结果。结果  诱导后细胞对凝集素ACL、BPL、JAC、MPL、PHA E、SBA和SNA的亲和作用减弱,而对凝集素AAL、ConA、DBA、GSL Ⅱ、ECL、HAL、LCA、LTL、NML、NPL、PHA L、PTL Ⅱ和WFL的亲和作用增强。提示诱导后肝癌细胞表面出现了黏蛋白T/Tn抗原、平分型N-乙酰葡萄糖胺、α 2,6唾液酸和末端α或β连接的N-乙酰半乳糖胺结构减少;而末端和核心岩藻糖、高甘露糖、N-乙酰葡萄糖胺β 1,6分支和复杂型寡糖分支结构增多。结论  肝癌细胞发生EMT过程中细胞膜表面糖链结构改变,提示糖链结构与肝癌的转移密切相关,为有效控制肝癌转移、改善预后提供了新思路。     

两种糖化血红蛋白分析仪结果比对和偏倚评估

目的：对BIO-RAD VARIANTⅡ与TOSOH HLC-723G8糖化血红蛋白分析仪进行结果比较和偏倚评估,为实验室提供准确可靠的数据。方法以BIO-RAD VARIANTⅡ糖化血红蛋白分析仪为参考系统,以 TOSOH HLC-723G8糖化血红蛋白分析仪为待比系统,依据美国临床实验室标准化协会EP9-A2文件要求,分别在上述两种检测系统中,检测40份常规样本,记录实验结果,检查离群点,计算直线回归方程和相关系数,进行相关性的比较,并对其进行偏倚评估。结果两个检测系统检测糖化血红蛋白结果回归方程为Y＝1．006X -0．298,呈正相关（r2＝0．998,P＜0．05）,TOSOH HLC-723G8的测定糖化血红蛋白结果比BIO-RAD VARIANT Ⅱ低,两个检测系统有恒定偏倚,但偏倚随糖化血红蛋白浓度增加而减小,偏倚小于允许误差。结论两个检测系统检测糖化血红蛋白结果具有良好的相关性,结果存在恒定的负偏倚,但偏倚均在允许误差范围内,检验性能满足临床对糖尿病患者的监测要求。     

仿真模拟联合翻转课堂教学在自身抗体检验教学中的效果分析

目的探讨仿真模拟联合翻转课堂教学在自身抗体检验教学中的效果。方法选择广西医科大学第一附属医院医学检验技术专业四年制本科70名学生作为研究对象,采用随机数字表法分为传统教学组和仿真模拟联合翻转课堂教学组,每组各35名。自身抗体检验实习结束后,采用出科考核和问卷调查表进行教学效果评估。结果两组学生出科考核成绩差异均有统计学意义(P<0.05)。带教教师对仿真模拟联合翻转课堂教学组带教教师对教学效果各项指标的评价均优于传统教学组,仿真模拟联合翻转课程教学组学生对教学效果各项指标的评价均优于传统教学组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论仿真模拟联合翻转课堂教学能提高自身抗体检验项目实习的教学效果,调动学生学习的积极性,提高学生主动参与、发现问题及解决问题的能力,为该方法在医学检验临床实习教学中的推广及应用提供了理论依据。     

抗核膜抗体阳性患者在送检抗核抗体中的临床意义

目的 探讨抗核膜抗体(ANEA)在临床连续送检抗核抗体(ANA)标本中的阳性率及其临床意义.方法 回顾性分析该院门诊和住院患者连续送检的107937例ANA检测标本,对荧光模型判读为ANEA阳性的患者进行临床资料收集与分析.另选取50例ANEA阴性但ANA阳性的患者和65例健康体检者作为疾病对照组和健康对照组,分析ANEA阳性患者实验室检查结果的特点.结果 107937例ANA常规检测标本中ANA阳性27467例,ANA总体阳性率为25.45％;荧光模型判读为ANEA 220例,占ANA阳性标本的0.80％.ANEA阳性患者诊断为自身免疫性疾病(AID)141例,其中以原发性胆汁性胆管炎(PBC)最为常见,为30例(21.28％);诊断为非AID患者79例,占ANEA阳性患者的35.91％.AID患者荧光滴度以中、高滴度(1:320、1:1000)为主(66.67％),非A ID患者荧光滴度以低滴度(1:100)为主(81.01％).与疾病对照组和健康对照组比较,ANEA阳性患者血清γ-谷氨酰转移酶和碱性磷酸酶水平均明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 ANEA可见于多种临床疾病,主要以AID为主,特别是PBC最为常见.中、高滴度的ANEA阳性患者同时出现GGT、ALP水平异常升高,要注意临床随诊,警惕AID发生.     

狼疮性肾炎患者免疫功能指标的检测

摘要：目的：分析狼疮肾炎（LN）患者的免疫功能指标。 方法：选取65例SLE患者,其中35例并发肾炎为LN组,30例未并发肾炎为SLE无肾炎组,以30例体检健康者作为对照组,同时检测各组外周血T淋巴细胞亚群水平及相关血清学免疫指标。 结果：LN患者组外周血CD4+细胞水平、CD4+/CD8+比值及C3水平明显低于SLE无肾炎组及健康人对照组（P<0.05）,IgG、IgM、24 h尿蛋白定量、半胱氨酸蛋白酶抑制剂C（CysC）水平明显高于SLE无肾炎组及健康人对照组。 结论：LN患者T淋巴细胞亚群数量及补体水平均显著降低,与肾功能损害相关。     

慢病毒介导的TSPY1对肝癌SMMC7721和Huh7细胞系增殖的影响

目的：观察转染睾丸特异性蛋白1（ TSPY1）慢病毒表达载体对肝癌细胞SMMC7721和Huh7细胞系增殖能力的影响。方法构建特异性的TSPY1慢病毒过表达载体稳定转染至SMMC7721和Huh7肝癌细胞系,采用荧光定量PCR和蛋白印迹技术检测TSPY1 mRNA和蛋白的表达情况,Cell Counting Kit-8（CCK-8）实验检测转染后细胞的增殖情况。结果在转染过表达TSPY1慢病毒的SMMC7721和 Huh7细胞中, TSPY1 mRNA和蛋白的表达均明显上调（ P＜0.01）。 CCK-8细胞增殖实验发现,过表达TSPY1组SMMC7721和Huh7细胞的增殖能力比对照组增强。结论 TSPY1慢病毒表达载体可明显上调TSPY1 mRNA和蛋白表达,并能够促进肝癌SMMC7721和Huh7细胞的增殖。     

腺病毒过表达及 siRNA 干扰人肝癌 HepG2细胞对11β-羟基类固醇脱氢酶 I表达的影响

目的：观察腺病毒（Ad-11β-HSD1）过表达系统及特异性siRNA（siRNA-11β-HSD1）干扰人肝癌HepG2细胞对11β-羟基类固醇脱氢酶I（11β-HSD1）表达的影响。方法应用Ad-11β-HSD1以及siRNA-11β-HSD1转染人肝癌HepG2细胞,用实时荧光定量PCR及Western Blot 检测11β-HSD1表达。结果转染72 h后,对照组及腺病毒过表达组细胞中均可见明显 GFP荧光,且转染48 h后蛋白水平明显升高;siRNA干扰48 h后,mRNA及蛋白水平均明显降低。结论腺病毒转染可有效过表达11β-HSD1,而siRNA干扰可有效抑制11β-HSD1表达。