CpG-ODN诱导白血病HL60细胞分化和凋亡的研究

目的:研究含CpG基序的寡核苷酸对白血病HL60细胞的作用。方法:设计合成含CpG基序的寡核苷酸(CpG-ODN)、不含CpG基序的寡核苷酸(nonCpG-ODN)和含甲基化CpG基序的寡核苷酸(ZpG-ODN)分别作用于白血病HL60细胞,MTT法测定HL60细胞抑制效应,硝基四氮唑蓝还原实验和细胞表面CD14分子表达状况分析HL60细胞诱导分化结果,流式细胞仪和透射电镜观察HL60细胞的凋亡现象,免疫组化检测HL60细胞后caspase3、Bcl-2和Bax的表达状况。结果:CpG-ODN对白血病HL60细胞有诱导分化和诱导凋亡作用,nonCpG-ODN和ZpG-ODN无此作用。结论:CpG-ODN可直接诱导白血病HL60细胞分化和凋亡,此为白血病免疫治疗提供了新的途径。     

HPV16 L1-E7蛋白疫苗诱导小鼠产生抗体及细胞免疫应答的研究

目的：探讨嵌合性病毒样颗粒HPV16 L1－E7蛋白疫苗接种于动物体内诱发体液和细胞免疫反应的能力。方法：以本室构建的HPV16 L1－E7嵌合蛋白疫苗腹腔注射免疫BALB／c小鼠，在初次免疫后，分别于第3，4，5周采血ELISA检测特异性抗体的产生。并耳皮下注射HPV16L1蛋白，检测特异性DHT反应，在末次免疫2周后，取小鼠脾细胞，用HPV 16 L1－E7蛋白刺激，检测T细胞增殖反应及血清IFN－γ水平。结果：HPV16 L1－E7蛋白疫苗免疫小鼠可有效产生HPV16 L1抗体及特异性DTH反应，加强免疫后，抗体水平升高，两者水平均高于对照组（P＜0．01），HPV16 L1－E7嵌合蛋白疫苗免疫后取小鼠脾细胞，在特异性HPV16 L1－E7蛋白抗原刺激下，特异性T淋巴细胞明显增殖，被免疫小鼠血清中出现高水平IFN－γ。结论：嵌合母亲产颗粒HPV16 L1－E7蛋白可诱导小鼠产生高滴度抗体，HPV16L1特异性TDH参与的超敏反应及细胞免疫应答的细胞因子，这为研究预防HPV感染和治疗HPV相关性肿瘤的疫苗提供了实验资料。     

HBx-DNA探针的研制及在肝癌发生机制研究中的应用

将非放射性标记物地高辛甙元用随机引物法由ｐＢＲ３２２－２ＨＢＶ／ＥｃｏＲⅠ酶切片段（３．２ｋｂ）制备ＨＢＶ－ＤＮＡ探针及由ＨＢＶ／ＢａｍＨⅠ、ＢｇｌⅡ酶切片段（０．５９ｋｂ）制备ＨＢｘ－ＤＮＡ探针。将Ｄｉｇ－ＨＢＶＤＮＡ探针用斑点杂交、Ｓｏｕｔｈｅｒｎ转膜杂交检测筛选肝细胞性肝癌ＨＢＶ－ＤＮＡ整合型标本，进而用Ｄｉｇ－ＨＢｘＤＮＡ探针检测ＨＢＶ－ＤＮＡ纯整合型肝细胞性肝癌中ＨＢｘ的存在情况。结果显示，７５％（３３／４４）的肝癌ＤＮＡ中有ＨＢＶ－ＤＮＡ存在，其中，以纯整合型方式存在的为６３．６％（２１／３３），混合型为３６．４％（１２／３３），无游离型。纯整合型ＨＢＶ－ＤＮＡ片段中，ＨＢｘ－ＤＮＡ阳性率为９０．５％（１９／２１）。提示ＨＢＶ在肝细胞性肝癌的发生中起着重要的作用，ＨＢＶ－ＤＮＡ可能以片段性整合的方式存在于肝癌细胞染色体上，其中以ＨＢｘ基因的整合为主。     

研究生分子医学教学实验室建立的探讨

为适应医学现代化发展的需要，成立了分子医学教学实验室，充分实现了资源共享，教学科研工作均取得了一些成绩。为进行实验室改革提供了宝贵经验。     

针对汉坦病毒S基因反义寡核苷酸抗病毒效应的研究

目的：研究反义寡核苷酸（asON）体外抗汉坦病毒（HV）的效应。方法：设计合成了分别针对HV S基因片段5′端手柄状结构区的asON1和针对mRNA翻译起始区的asON2，采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）检测asON作用后HV感染细胞培养上清中HV核蛋白（NP）的表达水平，免疫荧光试验（IFA）检测asON作用后感染细胞膜上NP的表达水平，空斑减少中和试验（PRNT）测定asON作用和HIV感染细胞培养上清液中病毒滴度。结果：asON可抑制NP的合成以及病毒活恬。结论：asON具有一定的抗HV作用，有可能作为一种治疗人HV感染的新途径。     

儿童急性下呼吸道感染病毒感染的检测与分析

目的研究分析儿童急性下呼吸道感染病毒病原的构成特点。方法收集临床162例确诊急性下呼吸道感染病例的肺泡灌洗液,用试剂盒法进行病毒核酸提取和检测。结果162例急性下呼吸道感染病例中病毒感染阳性病例119例,阳性率73．5％。119例阳性病例中检出：流行性感冒病毒（IFV）3例、呼吸道合胞病毒（RSV）22例、腺病毒（ADV）4例、副流感病毒（PIV）46例、偏肺病毒（hMPV）17例、冠状病毒（COV）6例、博卡病毒（HBoV）20例。其中混合性感染47例,占29％,两种病毒混合感染38例,三种病毒混合感染8例,四种病毒混合感染1例。结论病毒是儿童急性下呼吸道感染的重要感染原因,患儿感染呈混合性感染趋势,两种病毒感染情况最多见。     

喉鳞癌组织Caveolin-1表达及其与HPV病毒感染相关性的研究

目的:研究喉鳞状细胞癌组织Caveo-lin-1的表达情况及其与HPV感染之间关系,探讨两者对喉鳞癌生物学行为的影响。方法:分别应用免疫组织化学和原位杂交方法检测喉鳞癌组织中Caveolin-1蛋白及HPV感染的情况,统计学分析两者之间的相关性。结果:Caveolin-1蛋白在喉鳞癌和癌旁组织中的表达率分别为71.2%和9.5%,两者表达差异有统计学意义,P<0.05;Caveolin-1蛋白的表达程度与病理类型、TNM分期、转移相关。喉鳞癌组织HPV感染阳性率为55.1%,癌旁组织为21.4%,两者表达差异有统计学意义,P<0.05;HPV感染与患者年龄、病理类型、TNM分期和转移均无关。喉鳞癌Caveolin-1表达与HPV感染之间呈正相关表达(r=0.62,χ2=10.40,P<0.05)。结论:喉鳞癌组织Caveolin-1表达明显增高并与肿瘤的浸润和转移行为有关,Caveolin-1为判断喉鳞癌生物学的指标之一;HPV感染是喉鳞癌发生的高危因素,并且Caveolin-1与HPV两者之间存在协同作用。     

国产硫苯咪唑青霉素的体外抗菌作用

对新型国产抗生素硫笨味唑青霉素(美洛西林,Mezlocillin)的最小抑菌浓度(MIC)、最小杀菌浓度(MBC)和杀菌曲线进行了研究,并与氨苄青霉素和氧哌嗪青霉素比较。结果:1.本药品对7种常见的G~+菌及G~-菌均有较强的杀菌作用,对溶血性链球菌,大肠杆菌和志贺氏菌属的抗菌作用明显优于氨苄青霉素和氧哌嗪青霉素。2.本药品的MBC与MIC比值多为1～2.7,是一种有效的杀菌剂。3.大于10~6CFU/ml或小于10~4CFU/ml的细菌接种量对本药品的MIC值有明显影响。4.杀菌曲线表明本药品对大肠杆菌和鼠伤寒杆菌4h开始起作用,8h可杀死100%细菌,对金黄色葡萄球菌6h作用达高峰,增加药物浓度可使杀菌效果增强。     

本溪市的经常性卡介苗接种站

卡介苗接种工作,在我国虽已大量推行,但各地接种情况颇不一致。本溪市根据卫生部指示的精神,参考各兄弟单位的经验,经卫生局研究决定于1956年成立经常性卡介苗接种站,以新生儿为主进行接种工作,茲将二年来的工作情况介绍如下,与同道们商榷。突击接种的方式已不能适应需要我市由1950年开始推行卡介苗接种工作,每年的接种任务是由省卫生厅统一分配,在卫生局领导下,组织各医疗单位的力量采取突击方式进行的。自1950年—1954年共接种30,000人次。1955年市结核防治所成立后,卫生局即将该项工作责成市结核防治     

CpG基序诱导HL60细胞分化和凋亡作用的初步研究

研究发现细菌表面的肽聚糖、脂磷壁酸等菌体成份有直接的抗肿瘤作用 ,然而源于细菌DNA的CpG基序以及含CpG基序的寡核苷酸 (CpG oligodeoxynu cletides,CpG ODN)对肿瘤细胞的直接作用如何尚不明了 ,因此 ,初步研究了CpG ODN对白血病HL6 0细胞的直接作用及其可能机制。设计合成CpG ODN序列为 5′ TCGTCGTTTTGTCGTTTTGTCGTT 3′;不含CpG基序的寡核苷酸 ,即nonCpG ODN序列为 5′ TGCTGCTTCCCCCCCCCCCC 3′;含甲基化CpG基序的寡核苷酸 ,即ZpG ODN序列为 5′ TQGTQGTTTTGTQGTTTTGTQGTT 3′,该序列中Q…