巢蛋白及性别决定基因高迁移率组蛋白在SAMP8小鼠穹窿下器的表达及其意义

目的 观察巢蛋白（Nestin）与性别决定基因高迁移率组蛋白(SOX2)在快速老化小鼠SAMP8穹隆下器（SFO）中的表达。 方法 成年8月龄SAMP8小鼠设为实验组,采用免疫组织化学和免疫组织化学荧光染色的方法观察Nestin及SOX2在穹隆下器中的表达,同时设正常老化小鼠SAMR1对照。结果 Nestin免疫组织化学染色发现,对照组免疫阳性细胞呈突起分布,放射丝状表达;实验组免疫阳性细胞染色深,丝状结构粗大,在血管周围密集分布,阳性细胞百分比（49.17±7.60）%较对照组阳性细胞百分比（16.33±4.41）%明显增多,差异有统计学意义（P＜0.01）。SOX2免疫组织化学染色,对照组免疫阳性细胞散在分布,染色深浅不一;实验组大部分阳性细胞染色较深,在血管周围密集分布;阳性表达细胞百分比（62.17±20.27）%较对照组阳性表达细胞百分比（36.00±16.20）%明显增多,差异有统计学意义（P＜0.05）。荧光双标染色,对照组SOX2散在分布,其间可见Nestin阳性表达,室管膜下区可见少量SOX2/Nestin双表达细胞。实验组阳性表达强烈,SOX2/Nestin双表达细胞增多。结论 Nestin及SOX2在快速老化小鼠SAMP8穹隆下器的表达明显增强,表明阿尔茨海默病（AD）在一定时期可能引起穹隆下器神经干细胞/祖细胞的增殖或分化增强,进而可能影响穹隆下器的神经生发功能。     

抗孕马血清的性质与应用的研究

孕马激素(PMSG)白发现以来,其提纯品在高新生物技术领域中至今仍具有重要作用。抗孕马血清(APS)配合应用后可消除PMSG在动物体内半衰期过长引起的副作用,已在胚胎移植中取得良好的效果。 本文对所研制的APS之纯化、特异性、组成分析、建立中和试验及应用效果等作了探讨。     

实验肿瘤局部照射动物模型的改进

目的对局部照射肿瘤实验动物模型进行改进以提高肿瘤放疗增敏药物增敏实验结果的可靠性。方法分别在小鼠腿上皮下（传统方法）和小鼠脚背皮下（改进方法）接种肝癌H22细胞,使其生长成实体瘤;用5Gyγ射线照射肿瘤后,每隔1d测量肿瘤的长、宽、高并计算肿瘤体积,连续观察24d。结果将肿瘤接种于小鼠腿上皮下时,照射组的肿瘤体积和质量与对照组之间的差异无统计学意义（t=0．55、0．70,P均〉0．05）;而将肿瘤接种于脚背皮下时,照射组的肿瘤体积和质量均明显低于对照组（t=2．25,P〈0．05;t=3．14,P〈0．01）。结论肿瘤接种于小鼠脚背皮下的方法,操作简单、方便、易行且实验结果准确、可靠。     

无毛小鼠骨髓细胞染色体核型分析

目的了解无毛小鼠染色体遗传表型。方法以健康昆明小鼠做对照，制备染色体标本，分析常规染色体G-显带核型。结果常规染色体分析对照组可见染色体数目异常占9.5%，结构畸变占3%；实验组可见染色体数目异常占9.3%，结构畸变占6%。G-显带核型分析除对照组发现一个细胞有结构异常外其余细胞全部为正常核型。结论无毛小鼠的染色体数目和结构未见明显异常与正常对照小鼠无明显差别。     

银耳孢糖组分对~(137)Cs γ射线照射小鼠骨髓细胞染色体畸变及微核率的影响

目的研究银耳孢子发酵物提取的均一体多糖组分A-BTF对γ射线照射诱发的小鼠骨髓细胞染色体畸变和骨髓嗜多染红细胞微核率的影响。方法实验组照射前24 h腹腔注射银耳孢糖组分,对照组腹腔注射生理盐水,小鼠接受137Csγ射线照射后进行小鼠骨髓细胞染色体畸变及骨髓多染红细胞微核率观察。结果银耳孢糖组分ABTF实验组小鼠的染色体畸变率和微核率明显低于对照组,差异具有统计学意义(P0.01)。结论实验结果表明该均一体银耳孢糖组分A-BTF对γ射线辐射所致小鼠骨髓细胞损伤有明显的防护作用。     

SAMP8小鼠穹窿下器内神经干细胞的定位分布

目的:观察溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)、性别决定基因高迁移率组蛋白(SOX2)及巢蛋白(Nestin)阳性细胞在SAMP8小鼠穹窿下器的分布。方法:成年SAMP8小鼠20只,随机分为四组,一组按每只50㎎/㎏(0.3ml)的剂量腹腔注射BrdU,另外三组不作处理。经灌注后,分别采用免疫组织化学方法进行检测。结果:免疫组织化学染色,可见少量BrdU阳性细胞,胞核呈棕褐色或棕黑色;Nestin免疫阳性细胞在室管膜下区密集分布;SOX2免疫阳性细胞散在分布,在室管膜区和大血管周围分布密集。SOX2/Nestin免疫荧光双标染色:可见少量SOX2/Nestin双阳性细胞。结论:穹窿下器内SOX2及Nestin阳性细胞密集,并可见少量BrdU阳性细胞及SOX2/Nestin双阳性细胞,提示SAMP8小鼠穹窿下器存在神经干细胞/祖细胞,可能具有神经元发生功能。     

血清瘦素和白介素-6水平与绝经期妇女骨代谢的关系

目的 分析绝经期妇女骨代谢的相关指标,探讨骨质疏松的发病因素.方法 选取55～66岁绝经期妇女与25～35岁的育龄期妇女,比较两组的骨代谢相关指标:血钙(Ca)、血磷(P)、碱性磷酸酶(ALP)、血清骨钙素(BGP)、血抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)、骨密度(BMD)、瘦素、白介素-6(IL-6)等.结果 绝经期妇女与育龄期妇女比较,血Ca、血P无统计学差异;ALP,BGP、TRAP有统计学差异.绝经期妇女与育龄期妇女比较L2-4及左股骨颈、股骨粗隆和Ward三角区的BMD减少,有统计学差异(P<0.05).血清瘦素无统计学差异,血清IL-6有统计学差异(P<0.05).结论 绝经期妇女骨质疏松与绝经后骨代谢加快相关,与体脂含量及瘦素水平无明显相关.     

糖尿病大鼠穹窿下器室管膜细胞的形态学变化

目的:观察糖尿病大鼠不同时期穹窿下器的室管膜细胞的形态学变化.方法:雄性Wistar大鼠,每只大鼠给予链脲佐菌素60 mg/kg,腹腔一次性注射,建立Ⅰ型糖尿病大鼠模型.造模成功后分别于2、4及8周,扫描电镜和透射电镜观察穹窿下器不同时期室管膜细胞的形态学变化.结果:扫描电镜观察,对照组细胞膨隆,表面光滑,有清晰的微绒毛.2周组细胞扁平、塌陷,细胞表面可见到圆形小破孔.4周组室管膜细胞表面凹凸不平,出现皱褶,细胞膜可见大小不一的多个小破孔,并可见细胞膜缺失、细胞器裸露的细胞.8周组室管膜细胞表面皱褶明显,可见大量的球形分泌颗粒.透射电镜观察显示,对照组穹窿下器室管膜细胞脑室面完整,有少量的微绒毛和乳头状微突起,模型组室管膜面可见大量分泌颗粒.结论:糖尿病可导致大鼠穹窿下器室管膜细胞破损及分泌大量的分泌颗粒.     

抗人纤维蛋白噬菌体单链抗体库的构建和鉴定

目的应用噬菌体展示技术构建抗人纤维蛋白单链抗体(scFv)文库,筛选高亲和力抗人纤维蛋白scFv并进行鉴定。方法利用人纤维蛋白免疫小鼠,分别扩增小鼠VH和VL基因,经重叠延伸聚合酶链反应(PCR)将VH和VL基因拼接成scFv基因,SfiⅠ/NotⅠ双酶切克隆入pCANTAB 5E噬菌粒载体,转化E.coli TG1构建成库,采用人纤维蛋白原对抗体库进行负筛选,人纤维蛋白进行正筛选,酶联免疫吸附分析(ELISA)检测阳性克隆的抗原特异性并进行测序分析。结果构建了库容为8.7×106的抗人纤维蛋白scFv库,ELISA测定显示scFv具有较高的抗原特异性;抗人纤维蛋白scFv基因序列长732 bp,编码244个氨基酸,VH和VL基因均有明确的3个互补决定区和4个骨架区。结论成功构建了抗人纤维蛋白scFv文库,并筛选到高亲和力的抗人纤维蛋白scFv,为新型血栓显像剂的开发奠定了实验基础。