荔枝核总黄酮治疗胆汁淤积性肝纤维化大鼠的实验研究

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门静脉高压大鼠腹膜血管内皮生长因子的表达及意义

目的探讨门静脉高压大鼠腹膜血管内皮生长因子(VEGF)的表达及意义。方法雄性SD大鼠随机分为3组:门静脉结扎(PVL)组32只,假手术(SO)组16只,门静脉结扎联合沙利度安治疗(PVL-T)组8只。为诱导腹水形成,于手术后第1,3,5,7天分批给予每只大鼠腹腔注射33.33%葡萄糖溶液1mL,30min后收集腹水标本并测总量,同时采用ELISA测定腹水中VEGF含量;留取腹膜组织做VEGF免疫组化染色和实时RT-PCR。结果术后第1、3天PVL组大鼠腹水总量和VEGF含量显著大于SO组(P<0.05),术后第5、7天大鼠腹水总量和VEGF含量在PVL组和SO组之间无显著性差异(P>0.05),术后第3天PVL-T组腹水总量显著低于PVL组(3.4±0.27mLvs4.92±1.53mL,P<0.05)。免疫组化结果显示PVL组VEGF呈强阳性表达,而SO组VEGF则呈弱阳性表达,且表达部位多在腹膜间皮细胞、巨噬细胞胞浆;实时RT-PCR结果表明PVL组腹膜VEGFmRNA表达显著高于SO组(P<0.05)。结论门静脉高压可增加由于渗透性改变所致大鼠腹水形成,腹膜VEGF高表达可能与大鼠腹水形成有关,抑制VEGF活性可能是治疗门静脉高压所致腹水的一种新的治疗策略。     

荔枝核总黄酮对肝纤维化大鼠肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体表达的影响

[目的]研究荔枝核总黄酮(TFL)与胆管阻塞性肝纤维化大鼠肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)表达的关系以及TFL抗肝纤维的作用。[方法]雄性SD大鼠60只,随机分为3组:假手术组、模型组及TFL给药组,除假手术组外其他大鼠采用胆总管结扎制备肝纤维化大鼠模型。TFL给药组给予TFL200 mg/(kg.d)灌胃,4周后处死所有大鼠,取血清和肝组织进行检测,酶联免疫吸附法检测大鼠血清中TRAIL水平;放射免疫法检测大鼠血清中透明质酸(HA)、层粘蛋白(LN)及Ⅲ型前胶原(PCⅢ)的水平;采用苏木精-伊红染色和Masson胶原染色观察大鼠肝纤维化程度;采用免疫组织化学法检测肝组织TRAIL表达情况。[结果]同模型组相比,TFL给药组肝组织纤维化程度明显改善;TFL给药组和假手术对照组血清TRAIL HA、LN、PCⅢ均显著低于模型组(P0.05),且TFL给药组和假手术对照组之间血清TRAIL水平差异无统计学意义(P0.05);血清TRAIL水平与肝组织中TRAIL表达一致;血清TRAIL水平与血清HA、LN、PCⅢ呈正相关(r=0.97,0.95,0.94,P0.01)。[结论]TRAIL可促进胆管阻塞性大鼠肝纤维化发生发展,TFL可以改善肝纤维化程度,其机制可能与抑制肝内TRAIL的表达有关。     

荔枝核总黄酮对胆汁淤积性肝纤维化大鼠抗肝纤维化的机制探讨

目的观察荔枝核总黄酮对胆汁淤积性肝纤维化大鼠肝功能指标的影响及对胶原蛋白的影响,探讨其可能的干预机制。方法将胆总管结扎后的SD大鼠分为胆总管结扎组（BDL组）,荔枝核总黄酮组（TlFL组）,水飞蓟宾组（SIL组）,以假手术组为阴性对照。四周后处死大鼠,取血清检测各组大鼠血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、直接胆红素（BILD2）、总胆红素（BILT2）、肌酐（CREJ2）、血尿素氮（UREAL）,同时,取肝组织行HE、Masson染色,westernblot测定各组肝组织的PC3、PCI、p16的表达。结果与BDL组比较,TFL组血清SOD含量明显升高（P〈0．05）,ALT,AST,BILD2,BILT2水平明显降低（P〈0．05）,明显改善大鼠肝纤维化程度（P〈O．05）,且对肾功能无明显影响（P〉0．05）,TFL可明显抑制p16、PC3、PCI蛋白的表达（P〈0．05）。结论TFL组（300mg,／kg·d）有明显改善胆汁淤积及减轻肝组织纤维化的作用且对肾功能无明显影响,明显抑制胆汁淤积性肝纤维化大鼠肝脏p16、PC3、PCI蛋白的表达,可能是通过诱导细胞凋亡途径抑制肝纤维化。     

荔枝核总黄酮对肝纤维化大鼠肝组织TLR4/NF-κB信号通路的影响

目的探讨荔枝核总黄酮（TFL）对胆管阻塞型肝纤维化大鼠肝组织Toll样受体4（TLR4）、核因子κB（NF κB）表达的影响。方法雄性SPF级SD大鼠80只,随机分为正常对照组、模型组、TFL小剂量组、TFL大剂量组。除正常对照组外,其余各组均采用胆总管结扎法（CBDL）制备肝纤维化大鼠模型。造模后第2天开始,正常对照组、模型组给予0.9%氯化钠溶液灌胃（5 mL&#8226;kg－1）,TFL小剂量组给予TFL 100 mg&#8226;kg－1、TFL大剂量组给予TFL 200 mg&#8226;kg－1灌胃,均每天1次,共4周,第4周末处死大鼠,留取肝脏组织。苏木精 伊红（HE）染色、Masson染色观察大鼠肝组织病理学改变,免疫组化法（IHC）检测TLR4、NF κB在4组大鼠肝组织内的表达。结果与模型组比较,TFL大剂量组肝组织纤维化程度明显减轻,胶原表达明显减少（P＜0.01）;正常对照组、模型组、TFL小剂量组、TFL大剂量组的大鼠肝组织TLR4免疫组化评分分别为（0.4±0.5）,（3.3±0.6）,（3.1±0.5）,（1.4±0.5）分;NF κB免疫组化评分分别为（0.80±0.77）,（5.12±0.89）,（4.68±0.70）,（3.47±0.61）分,模型组TLR4、NF κB表达明显高于正常对照组和TFL大剂量组（P＜0.01）,与TFL小剂量组比较,差异无统计学意义。 结论TLR4和NF κB高表达可能与胆管阻塞型大鼠肝纤维化的发生发展有关,大剂量荔枝核总黄酮可能通过抑制大鼠肝组织TLR4、NK κB的表达来改善胆管阻塞型大鼠肝纤维化程度。     

结缔组织生长因子与肝纤维化的研究进展

结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)是近年来新发现的一种间质细胞的生长因子,具有明显的丝裂原性和趋化性,可以启动一系列介导组织创伤修复和再生的生物学过程.