临床营养工作发展模式探讨

1　发展契机( 1 )随着科学技术的发展 ,临床营养的基础研究越来越广泛和深入 ,其理论知识在不断更新和发展 ,其应用技术也在不断完善和提高 ,使临床营养学的内涵发生了新的变化 .临床营养治疗已经成为临床综合治疗措施中不可缺少的组成部分[1 ] .( 2 )面对医学的发展和医药卫生体制改革 ,过去临床营养传统意义上的膳食管理调配、营养状况评价和营养咨询指导已不能满足现代临床医疗的需要 .以往传统静脉输液的营养补充方式已经被现代肠内肠外营养支持所代替 ,并且人们对临床营养的认识还在进一步的研究摸索和完善之中 .人们也认识到单靠临床…     

复方樟柳碱治疗眼部缺血性病变的临床疗效观察

采用复方樟柳碱对６８例眼部缺血性病变进行治疗观察,并与６８例妥拉苏林用药的同种病例作疗效对比分析。结果显示治疗组的有效率以及在视力、视野方面的改善程度均优于对照组,说明复方樟柳碱对眼部缺血性病变的治疗是有效的,有较高的临床应用价值     

视网膜下液促使视网膜色素上皮细胞膜上蛋白激酶C变化的机制分析

目的：研究视网膜下液（SRF）能否引起体外培养的视网膜色素上皮（RPE）细胞浆内蛋白激酶C（PKC）的激活和转位，探讨SRF与RPE细胞中PKC信号系统变化的关系。方法：实验对象为体外培养的RPE细胞；不同的刺激因素分别在不同的时间刺激RPE细胞，通过细胞裂解和离心获取细胞浆和细胞膜蛋白粗提液，用同位素^32P标记和液体闪烁计数法检测细胞浆和细胞膜PKC活性水平。结果：SRF和佛波酯（PMA）都可以激活RPE细胞浆中的PKC（c-PKC），并使其由胞浆向胞膜转位，但胞膜上PKC（m-PKC）活性峰值水平和出现的时间不同。结论：SRF可引起RPE细胞膜上PKC的活性发生变化，变化的幅度与增殖性玻璃体视网膜病变（PVR）的分级呈正相关。     

体外培养不同代角膜缘干细胞特性分析

目的比较不同代角膜缘干细胞的生物学特性,为角膜缘细胞移植在临床中的氉应用提供依据。方法组织块培养法体外培养角膜缘干细胞,光镜观察、HE染色和免疫荧光染色分析原代、第1代和第2代角膜缘细胞形态学特性;流式细胞技术定量检测原代、第1代和第2代角膜缘细胞ABCG2表达;MTT比色法测定体外培养原代、第1代和第2代角膜缘干细胞的增殖活性变化。结果倒置相差显微镜下可见原代细胞培养24h有单个细胞从组织块边缘迁出,48h细胞局部可见拉网样生长趋势,72h出现大片细胞,细胞呈现多边形或多角形,96h细胞几乎铺满整个培养板。随着传代次数的增加,细胞形态变得不规则,CK3单克隆抗体表达阳性率逐渐增强;p63单克隆抗体原代和第1代细胞间表达阳性率无明显差别,第2代细胞表达量明显减弱。流式细胞检测显示原代、第1代和第2代细胞ABCG2表达阳性率分别为13.41%、22.96%和4.43%。MTT结果显示随传代次数增加细胞增殖活性逐渐下降。结论原代和第1代角膜缘干细胞可以作为制备组织工程角膜上皮细胞膜片的较理想种子细胞。     

圆锥角膜基质环植入术的研究进展

角膜基质环植入术(ICRS)是一种用于治疗轻中度圆锥角膜的手术方法。ICRS是通过植入基质环,使中央角膜扁平化,弧长缩短,角膜曲率半径增大,屈光力降低,从而改善角膜前突导致的轴性近视眼与不规则散光。ICRS具有微创性、安全性、有效性、可逆性且并发症少等优点,其中长期疗效较佳。本文中笔者就ICRS的发展史、适应症、手术方法、手术疗效的影响因素、术后处理及疗效的评估等方面进行阐述。     

人骨髓间充质干细胞的培养及鉴定

目的:探讨人骨髓间充质干细胞(hMSCs)体外分离培养及鉴定。方法:成人骨髓取自手术中非血液系统疾病、非肿瘤及乙肝表面抗原阴性患者摘取的肋骨,采用贴壁筛选法进行体外扩增;用免疫组织化学法对培养的细胞进行鉴定。结果:体外培养的原代hMSCs9d融合,免疫组织化学染色CD44表达阳性。结论:贴壁筛选法在体外很容易分离培养和扩增hMSCs,可作为获得hMSCs的一种有效手段。     

维拉帕米诱导人视网膜色素上皮细胞凋亡及细胞内钙变化

目的:探讨钙通道拮抗剂—维拉帕米(verapamil,Ver)对体外培养的人视网膜色素上皮(humanretinalpigmentepithelium,hRPE)细胞凋亡诱导作用及凋亡过程中细胞内钙浓度[Ca2 ]i的变化。方法:应用80mg/L的Ver作用体外培养hRPE细胞12,24及48h,采用吖叮橙(AO)荧光染色法、透射电镜、流式细胞术观察hRPE细胞凋亡;Fluo-3/AM负载技术,观察凋亡过程中细胞[Ca2 ]i的变化。结果:一定浓度Ver可诱导hRPE细胞凋亡,荧光显微镜及电镜观察hRPE细胞具有早期凋亡特征:核荧光呈黄绿色,电镜下核染色质浓染、边集。流式细胞术显示,Ver作用后的hRPE细胞凋亡百分率增加(F=12.3415,P<0.05)。Ver作用的hRPE细胞内钙浓度([Ca2 ]i)呈下降趋势(F=23.607,P<0.01)。结论Ver能诱导体外培养的hRPE细胞凋亡,细胞内[Ca2 ]i浓度的变化可能是诱导hRPE凋亡的机制之一。     

维拉帕米体外诱导人视网膜色素上皮细胞的凋亡

目的:探讨维拉帕米诱导体外培养的人视网膜色素上皮细胞凋亡的有效作用浓度和时间。方法:采用HE染色﹑AO荧光染色和透射电镜以及流式细胞仪检测80和160mg/L维拉帕米作用12￣72h致凋亡作用。结果:80和160mg/L维拉帕米均可诱导体外培养的人视网膜色素上皮细胞凋亡。经统计学分析其差异具有显著性,且具有明显的时间—剂量关系,160mg/L维拉帕米作用72h时,凋亡率最高达49.3%。结论:维拉帕米能诱导体外培养的人RPE细胞凋亡。     

Unoprostone对猴睫状肌组织胶原Ⅲ、Ⅳ及MP—1影响的免疫组化研究

目的：探讨PGF2α类抗青光眼药Unoprostone对猴的降眼压作用是否与眼状肌组织中细胞外基质（Extracellular matrix,ECM)及基质金属蛋白酶（Matrix metalloproteinase,MMP)的表达有关。方法：1．采用免疫组织化学方法观察正常猴睫状肌，小梁网，睫状突及虹膜组织中胶原I，Ⅲ，Ⅳ及MMP－1的分布。2．比较Unoprostone对7只猴点眼两周前后睫状肌前部纵行肌部分胶原，Ⅲ，Ⅳ及MMP－1免疫染色变化。结果：1．正常猴睫状肌，小梁网，睫状突及虹膜组织中胶源，I，Ⅲ，Ⅳ及MMP－1的分布各自具有不同特点。2．Unoprostone点眼两周后实验眼眼压均下降4mmHg以上，同时睫状肌前部纵行肌部分胶原Ⅲ染色减弱（7只动物中5只减弱），胶原Ⅳ染色减弱（7只动物中6只减弱），MMP－1染色增强（7只动物中7只增强），胶原I未见明显染色。结论：Unoprostone对猴的降眼压作用与睫状肌组织MMP表达增强，引起ECM降解加强，从而葡萄膜巩膜房水流出增加有关。