细胞组织化学染色及其酶型对急性早幼粒细胞性白血病的诊断意义

近年来 ,随着免疫分型、染色体、分子生物学等新技术的应用与发展 ,大大提高了对各种白血病的鉴别诊断。但作为基础的血细胞组织化学染色却不容忽视 ,通过观察其表现出的阳性率和积分 ,尤其是酶型(骨髓片行组化染色后 ,其酶反应处呈现的不同形状称酶型 )将有助于鉴别各种白血病 ,现将其在急性早幼粒细胞性白血病 (Ｍ3 )中的表现介绍如下。1　对象和方法1.1　对象　 1999年 3月～ 2 0 0 0年 4月 ,天津血液病研究所门诊和住院的初诊Ｍ3 病人 6 5例 ,均经形态学 (异常早幼粒≥ 30 % ) ,免疫学和染色体等检查而确诊。1.2　方法　ＰＯＸ(过氧化物…     

酵米面黄杆菌中毒的流行病学调查及其毒性研究

本文报道了对四川省1981年至1987年37起醇米面黄杆菌中毒进行调查的结果。该病好发于夏秋季节,均系进食霉变糯玉米汤元粉所致。该菌产毒与糯玉米浸泡时间长短、换水次数无关,但与该粉贮存时间长短、霉变程度有关。在pH6,室温20°～26℃,相对湿度75～89％,水份12～15％的条件下,该菌在糯玉米、玉米、糯米汤元粉中可存活4周以上,但难以产毒使小鼠中毒死亡。最后提出预防酵米面黄杆菌中毒的建议。     

小鼠FoxP3基因腺相关病毒的制备与鉴定

目的:构建携带小鼠FoxP3基因的重组腺相关病毒,并检测其在NIH3T3细胞的表达情况。方法:将FoxP3通过内部核糖体进入位点(IRES)与报告基因增强型绿色荧光蛋白连接,构建同时含有目的基因和报告基因的重组腺相关病毒(rAAV)表达质粒,通过磷酸钙沉淀法共转染HEK293细胞,收获并通过肝素亲和层析法纯化病毒,并对病毒纯度和滴度进行鉴定。利用携带FoxP3基因的重组病毒体外感染小鼠NIH3T3细胞,体外观察感染效率和目的基因转录情况。结果:包装成功的rAAV/FoxP3经纯化后获得了高纯度的rAAV/FoxP3,实时定量PCR检测rAAV/FoxP3的病毒滴度达到5.0×1012vg/mL,体外感染NIH3T3细胞,流式细胞术测定感染效率可达92.88%,实时PCR测定细胞内存在高水平FoxP3mRNA。结论:获得携带FoxP3-IRES-EGFP的rAAV,并可有效感染NIH3T3细胞,为进一步研究FoxP3的生物学功能提供了有效工具。     

RIA一抗包被管法在实际应用中所存在问题的探讨

放射免疫分析(RIA)一抗包被管法特点是将RIA反应体系中的第一抗体包被试管 . 在实际使用中 , 第一抗体在RIA反应体系中的首先存在使常规加样方式打破了RIA原有的竞争格局 , 标本的加入就会立即发生抗原、抗体特异性结合反应 , 有违RIA(平衡法)的基本原理 , 最终影响结果的准确性 . 本文以FT4 RIA一抗包被管法为例 , 做了下列验证试验 .     

人T-bet基因的克隆及序列分析

目的：克隆人T-bet基因全长编码区的cDNA，并进行豁定和测序分析，为从转录水平研究Th1／Th2平衡及其与免疫相关性疾病发生发展的关系奠定基础。方法：采用RT-PCR方法，从人外周血淋巴细胞获得T-bet基因的cDNA；连接至pGEM-Teasy载体，导入大肠杆菌DH5α并选择阳性克隆；应用M13F／R通用引物进行双向反应测序，以作序列鉴定。结果：扩增得到的T-bet基因cDNA全长1670 bp，包括编码区1607 bp，编码530个氨摹酸残基，与Genbank中发表的序列完全一致。结论：获得了人T-bet基网的克隆，为进一步研究其生物学功能构建了基础平台，为寻找多种免疫性疾病的有效治疗提供新思路。     

急性髓细胞白血病患者外周血淋巴细胞亚群的特征及临床意义

目的通过检测急性髓细胞白血病患者外周血各淋巴细胞亚群的分布,探讨该类患者免疫功能状况。方法通过流式细胞术检测健康对照组(n=20)、急性髓细胞白血病初发患者(n=31)及完全缓解期患者(n=31)外周血中CD4+T细胞、CD8+T细胞、TCRγδ+T细胞、CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)、CD16+CD56+NK细胞比例;通过细胞杀伤实验分析NK细胞和γδT细胞的杀伤活性以及与Treg的关系。结果与对照组相比,初发白血病患者和完全缓解患者外周血中CD4+T细胞、CD8+T细胞比例无明显差异,但CD4+CD25+Treg比例明显增高,TCRγδ+T细胞和CD16+CD56+NK细胞比例明显下降。初发病患者NK细胞和γδT细胞具有杀伤活性,但Treg能明显抑制其杀伤活性。结论急性髓细胞白血病患者外周血γδT和NK细胞虽具有杀伤功能,但比例明显下降,Treg对其杀伤功能具有抑制作用。     

ACSS2通过PI3K/AKT信号通路调控食管鳞癌细胞的顺铂敏感性

目的: 探讨乙酰辅酶A合成酶2（acetyl-CoA synthetase 2,ACSS2）表达对食管鳞癌细胞顺铂（cisplatin,DDP）敏感性的影响和可能机制。方法: 通过免疫组化和蛋白质印迹法检测40对食管鳞癌瘤体和癌旁组织中ACSS2蛋白的表达。蛋白质印迹法验证食管鳞癌细胞株TE-1、ECA-109和KY-SE150与正常食管鳞状细胞Het-1A中ACSS2的表达差异;利用脂质体转染siRNA-ACSS2或者慢病毒转染LV-ACSS2至TE-1细胞构建ACSS2下调或过表达细胞株;CCK8实验检测下调ACSS2对顺铂IC50值的改变;顺铂处理（5 μg/mL）前后,流式细胞术检测ACSS2干扰处理对TE-1细胞凋亡水平的影响;蛋白质印迹检测PI3K/AKT信号通路及凋亡相关蛋白cleaved-Caspase-3的表达。结果： 免疫组化及蛋白质印迹结果显示,食管鳞癌组织中ACSS2蛋白表达显著高于癌旁组织（P<0.001）,食管鳞癌细胞株中ACSS2表达水平明显高于正常鳞状上皮细胞Het-1A。CCK8结果显示siRNA-ACSS2处理显著下调TE-1细胞对顺铂的IC₅₀值（P值均<0.05）;流式细胞术结果证实,抑制ACSS2表达可显著上调食管鳞癌细胞凋亡率（P <0.01）;结合5 μg/mL顺铂处理,ACSS2干扰后TE-1细胞凋亡率明显上升（P值均<0.001）;蛋白质印迹结果表明,顺铂处理上调TE-1细胞中ACSS2及p-PI3K、p-AKT的表达;顺铂作用下,靶向抑制ACSS2后可见p-PI3K、p-AKT的显著降低而凋亡相关蛋白cleaved-Caspase-3表达量明显升高,过表达ACSS2在维持PI3K/AKT信号活化的同时可有效逆转cleaved-Caspase-3的形成。结论： ACSS2通过调控PI3K/AKT信号通路活化以及cleaved-Caspase-3表达参与食管鳞癌细胞顺铂敏感性调节。     

CCR6-CCL20对食管鳞癌患者体内Th17细胞分布的影响

目的研究CCR6-CCL20对食管鳞癌患者体内Th17细胞分布的影响。方法采用流式细胞术检测食管鳞癌患者手术切除的癌组织、癌旁组织及外周血中Th17细胞的比例及CCR6+Th17细胞的比例。RT-PCR方法检测组织中CCL20 mRNA水平。结果与癌旁组织及外周血相比,癌组织中Th17细胞明显升高(P<0.01);癌组织中CCR6+Th17细胞的比例高于癌旁组织及外周血(P<0.01);癌组织中CCL20 mRNA水平高于癌旁组织(P<0.01),并与Th17呈正相关。结论 CCR6-CCL20趋化轴可能在食管鳞癌患者Th17细胞浸润到肿瘤组织中发挥重要作用。     

慢性肾衰竭患者血清Chemerin水平及其与肾功能的关系研究

目的探讨慢性肾衰竭(CRF)患者血清Chemerin水平及其与肾功能之间的关系。方法收集2010年6月—2012年3月在我院门诊就诊或住院的慢性肾脏病3、4期患者158例作为CRF组,选择同期行体格检查的健康体检者140例作为对照组,采用酶联免疫吸附法(ELISA法)检测两组受试者的血清Chemerin和超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平;核素动态显像法测定肾小球滤过率(GFR);生化方法测定血尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr),并观察上述指标与血清Chemerin水平之间的关系。结果 CRF组患者血清Chemerin水平为(101.3±31.7)μg/L,高于对照组的(68.4±25.4)μg/L,差异有统计学意义(t=2.656,P<0.01);hs-CRP水平为(3.80±0.88)g/L,高于对照组的(1.60±0.76)g/L,差异亦有统计学意义(t=2.241,P<0.05)。CRF患者血清Chemerin水平与GFR呈负相关(r=-0.58,P<0.01),与BUN、Scr、hs-CRP水平均呈正相关(r=0.43,P<0.05;r=0.51,P<0.05;r=0.41,P<0.01)。多元逐步回归分析发现GFR是影响血清Chemerin水平的独立相关因素。结论 CRF患者的血清Chemerin水平与肾功能有关,随肾功能的降低,其血清Chemerin水平升高。     

四川省二十五年食物中毒资料分析报告

为探索我省食物中毒的发生规律和流行特点,以便针对问题,提出建议,供决策部门在制订预防和控制食物中毒工作中参考。一、结果与分析(一)历年来食物中毒情况据各地、市、州历年报送食物中毒资料统计,1966～1990年的25年间,全省共发生食物中毒4443起,中毒9866人,死亡883人,