菠菜乙醇酸氧化酶编码区cDNA在酵母表达载体中的克隆

目的：克隆菠菜乙醇酸氧化酶cDNA并构建其酵母表达载体。方法：从新鲜菠菜叶子中提取总RNA，用RT－PCR法扩增菠菜乙醇酸氧化酶编码区cDNA并插入pMD-T载体中进行序列测定；将此cDNA构建入P.Pastoris酵母表达体系中的pPIC3.5k上的SnaBI/NotI位点，进行PCR筛选和限制性酶切鉴定。结果：测序表明获得的基因为乙醇酸氧化酶cDNA序列，与国外文献报道的序列相比有约98％的同源性；重组质粒的SnaBI/NotI双酶切证明构建正确。结论：菠菜乙醇酸氧化酶cDNA克隆及重组质粒pPIC3.5K-GO的获得，为酵母表达菠菜乙醇酸氧化酶提供了前题条件。     

口服免疫耐受研究的新进展

口服免疫耐受是诱导外周免疫耐受的重要方法。口服抗原诱导免疫耐受的主要机制是主动抑制和克隆失活，低剂量口服抗原通过主动抑制起作用，而高剂量抗原主要是诱导克隆失活。口服自力抗原以疾病和抗原特异性方式抑制了几种实验性自身免疫动物模型，如实验性自身免疫性脑脊髓膜炎（ＥＡＥ）、眼葡萄膜炎、肌无力、胶原和佐剂诱导的关节炎、ＮＯＤ小鼠的糖尿病等；此外，口服自身抗原还可抑制同种异体排斥反应，延长移植物的存活期。在多发性硬化、类风湿性关节支、眼葡萄膜炎等疾病中口服耐受已进入初期临床试验，取得了一定的临床效果，并且未出现明显的毒性作用。     

慢性心力衰竭患者利尿剂抵抗的研究现状

在慢性心力衰竭(心衰)患者,利尿剂是标准治疗中的基础成分.然而近25%～30%的心衰患者会发生利尿剂抵抗.尤其在中度或重度心衰患者,利尿剂抵抗的发生率更高.利尿剂抵抗与慢性心衰患者的总病死率以及因猝死或泵衰竭导致的死亡有独立相关性,所以其本身也是判断心衰预后的重要因子.现就利尿剂抵抗的定义、发生机制、处理策略几方面进行综述.     

兰州市城关区5岁以下儿童死亡率和死因分析

目的分析兰州市城关区5岁以下儿童死亡率变化趋势、死亡年龄和死因,为今后更好开展儿童保健工作提供理论依据和数据支持。方法基于兰州市城关区《7岁以下儿童保健和健康年度报表》和《儿童死亡登记册》的儿童死亡数据,对5岁以下儿童死亡情况进行分析。结果 2001—2016年兰州市城关区新生儿、婴儿和5岁以下儿童死亡率分别为5.26‰、6.49‰和7.22‰,三者均呈现下降趋势(P0.05)。5岁以下儿童死亡中以新生儿和婴儿死亡为主,分别占72.91%、89.96%。5岁以下儿童死因顺位的前五位为出生窒息、早产或低出生体重、先天性心脏病、肺炎以及其他先天异常,所引起的死亡占总死亡的72.70%。结论 5岁以下儿童死亡率呈逐年下降趋势;婴儿和新生儿死亡仍是5岁以下儿童死亡的主要部分;出生窒息和低出生体重仍是5岁以下儿童的主要死因。     

高效液相色谱-电喷雾电离-质谱分析银杏叶中银杏内酯和白果内酯

银杏萜内酯包括银杏内酯和白果内酯是银杏提取物或银杏叶中主要的药效成分。本文用高效液相色谱 -电喷雾电离 -质谱 (HPLC ESI MS)法对银杏叶中银杏内酯和白果内酯进行分析。液相色谱条件为色谱柱为InertsilODS3,流动相为甲醇 -水 (36 :6 4) ,流速 1mL·min- 1 ;质谱为ZMDMicromass电喷雾质谱仪。得到了样品HPLC总离子流和选择离子 (m z 32 5 ,40 7,42 3,439)流图 ,及相应色谱峰的ESI MS质谱图 ,鉴别出银杏叶中白果内酯及银杏内酯A、B、C、J。本方法快捷 ,简便     

脐静脉置管两种缝扎固定方法的效果比较

目的探讨一种安全有效的脐静脉置管缝扎固定法,以降低脐静脉置管并发症。方法将66例实施脐静脉置管的高危儿随机分为观察组和对照组,观察组实施改良式脐静脉缝扎法,对照组实施传统脐静脉缝扎法,比较两组患儿在脱管、脐出血及置管时间等方面的差异。结果观察组在脱管、脐出血、置管时间方面与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论改良式脐带缝扎固定法固定牢固,可有效防止脱管、脐出血,延长置管时间,值得在临床上推广。     

灰色体系中H-point法的应用研究

目的:研究广义H-point法在灰色体系中的应用,考察其分析结果的可靠性。方法:扫描槐米和芦丁的紫外吸收光谱,优化纯组分区间,利用标准加入系列光谱数据,测定主要成分芦丁的含量,并与药典方法比较。结果:该法回收率为100.6％,RSD=3.11％(n=7),芦丁的含量为16.17％,RSD:3.37％(n=5);药典方法测得量为17.24％,RSD=4.95％(n=5),两者无显著性差异。结论:此法适合于灰色体系的分析,为快速分析中药提供了一条重要思路,具有一定的实际应用价值。     

1,6-二磷酸果糖钙盐狗急性毒性和长期毒性研究

目的 :探讨 1,6 二磷酸果糖钙盐 (FDP Ca2 )单次或多次给药后动物出现的毒性反应及其性质和程度 ,寻找主要的靶器官、无毒反应剂量及药物的安全范围 ,以推断人的临床用量。方法 :按照新药临床前安全性评价的要求进行狗急性毒性和长期毒性研究。结果 :狗经口急性毒性试验各剂量组未见明显中毒症状 ,各剂量组化验检查指标也未见明显异常 ;长期毒性试验以 15 0 0mg·kg-1给药 12周 ,狗的血肌酐值与对照组比较差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ,其它未见明显异常 ,恢复期后实验组与对照组各项指标比较差异均无显著性 (P >0 .0 5 )。结论 :FDP Ca2 临床治疗量为 2 5～ 5 0mg·kg-1·d 1,仅为狗急性毒性试验安全量的1/2 0 0 ,5 0 0mg·kg-1为FDP Ca2 狗长期毒性试验的无毒反应剂量 ,此剂量为临床实际用量的10～ 2 0倍 ,因而推断FDP Ca2 在临床长期口服 (治疗量为 2 5～ 5 0mg·kg-1·d 1)是安全的。     

二氢嘧啶酶转化中苯甘氨酸的测定

建立了利用二氢嘧啶酶由苯海因转化生成苯甘氨酸过程中产物苯甘氨酸的定量分析方法，该检测体系能准确地分析产物的含量，且对底物苯海因能同时进行测定，有效地避免培养液的干扰，苯甘氨酸及苯海因的回收率分别为９７５％～１０１９％、９８７％～１００８％。实验结果表明该法准确、可靠。