2.2.15细胞生长规律的探讨及在药物筛选中应用

目的　探讨 2 .2 .15细胞生长及其分泌HBsAg和HBeAg的规律以及在药物筛选中的应用。方法　利用HBV的体外细胞培养系统 (2 .2 .15细胞系 )建立抗HBV药物筛选的实验技术常规 ,对 2 .2 .15细胞及其分泌HBsAg和HBeAg的特性进行初步观察 ,并在此基础上对几种药物体外抗HBV活性进行研究。结果　选择每孔接种 0 .1mL浓度为 3× 10 8L-1的 2 .2 .15细胞培养至 8～ 12d为细胞指数生长期 ,滴板后第 1天上清中HBsAg和HBeAg均阳性 ,第 12天达高峰且含量最高。药物阿特福韦二吡呋酯、鞣花鞣质、无环鸟苷、α -干扰素对细胞的半数毒性浓度分别为 0 .6 7M ,0 .4 9g/L ,0 .75g/L ,>10× 10 8IU/L ,对病毒HBsAg和HBeAg的治疗指数 (TI)分别为 2 79,4 .4 7;2 7.2 2 ,5 .4 4 ;1,1;1,1。结论　 2 .2 .15细胞抗HBV药物筛选以 3× 10 8L-1/孔培养至 12d作为常规方法较为合适。阿特福韦二吡呋酯、鞣花鞣质均有显著体外抗病毒作用 ,可以作为阳性药物对照。     

白藜芦醇对小鼠免疫系统调节作用的研究

目的研究白藜芦醇对小鼠免疫功能的影响。方法通过碳粒廓清试验,测定白藜芦醇对小鼠腹腔巨噬细胞功能的影响;通过比色法测定鸡红细胞免疫后小鼠血清溶血素抗体水平,研究白藜芦醇对小鼠体液免疫的影响。结果白藜芦醇30 mg/kg和15 mg/kg剂量对环磷酰胺致小鼠细胞免疫抑制有对抗作用,能使免疫功能低下小鼠吞噬指数和吞噬系数得到恢复;白藜芦醇30 mg/kg剂量可对抗环磷酰胺致小鼠体液免疫抑制,提高血清溶血素抗体水平。结论白藜芦醇对小鼠免疫功能有较好的调节作用。     

白藜芦醇对多种呼吸道病毒作用体外实验研究

目的:观察白藜芦醇对多种呼吸道病毒导致细胞病变的抑制作用,为进一步探讨白藜芦醇的抗病毒机理积累基础.方法:分别接种甲1型流感病毒FM1株、呼吸道合胞病毒long株、腺病毒7型、鼻病毒R14型于MDCK、A549、HEp-2、MRC-5细胞,采用细胞病变抑制法(CPE),观察白藜芦醇体外对多种呼吸道病毒作用.结果:白藜芦醇在无毒浓度120μg/ml下,对腺病毒7型所致的细胞病变有抑制作用,而对甲1型流感病毒FM1株、呼吸道合胞病毒long株、鼻病毒R14型均未见抑制作用.结论:白藜芦醇具有体外抑制腺病毒7型作用,其对DNA病毒作用机理值得进一步探讨.     

徐长卿水提物抗肝癌作用初探

目的 探讨徐长卿水提物抗肝癌的作用。方法 以徐长卿水提物作用于体外培养的HepG-2细胞株，观察其对HepG-2细胞生长曲线的影响及评价其抗肝癌作用。结果 徐长卿水提物浓度为60g／L和30g,／L时，能使HepG-2细胞的生长受到抑制，15g／L和7．5g／h时对细胞增殖没有明显的抑制作用。结论 徐长卿水提物浓度为60g／L和30g／L时，在体外细胞培养中对HepG-2细胞增殖有较好的抑制作用。     

克感利咽口服液抗冠状病毒的实验研究

目的研究克感利咽口服液体内、外抗冠状病毒的作用。方法接种非SARS冠状病毒中华株ZHZ(HK3D3)于人肺K1二倍体细胞(HEL),观察克感利咽口服液体外抗非SARS冠状病毒中华株ZHZ(HK3D3)的作用;以鸡传染性支气管炎病毒(IBV)建立动物体内冠状病毒模型,筛选易感鸡种,诱其发病。以雏鸡的死亡率、死亡保护率及病理变化为指标,观察克感口服液体内抗鸡传染性支气管炎病毒(鸡冠状病毒)的作用。结果体外实验:克感利咽口服液的半数毒性浓度为32g/L,在其最高稀释浓度0.156g/L下,仍可以抑制病毒。体内实验:克感利咽口服液预防及治疗实验的死亡保护率分别为35.1%和26.50%,未见显著性差异。结论克感利咽口服液体内未见抗冠状病毒作用,但能一定程度上改善病毒感染引起的呼吸道症状;体外则有明显的抗非SARS冠状病毒作用,显示了一定的开发前景。     

流感病毒A/FM/47(H1N1)血凝素基因克隆、序列分析

目的对流感病毒A/Font Monmouth/47(H1N1)血凝素基因进行变异分析。方法用SPF鸡胚增殖毒株,提取病毒基因组总RNA,应用RT-PCR技术扩增该病毒株的HA基因,并克隆到pMD18-T载体上,测定HA基因核苷酸序列。结果该毒株的HA基因全长为1677bp,含有完整的阅读框架,编码545个氨基酸;BLAST序列比对结果显示,该毒株HA基因与其他H1基因核苷酸的同源性为98%。结论该毒株HA核苷酸序列发生了变异,出现多处碱基替换,可能是病毒毒力增强的原因。     

中药抗流行性感冒作用机制研究进展

流行性感冒(简称"流感")是由流感病毒引起的感染性呼吸系统疾病。每次流感爆发都会在全球造成高发病率以及致死率,严重危害人类健康。中医药用于流感防治已有千年历史,其活性成分不仅可以直接靶向病毒,还具有调节炎症信号通路、抑制炎症因子风暴和提高免疫力的作用。本文对常见抗流感单味中药及中药复方在流感治疗中的作用及其机制进行综述,旨在为中西医结合防治流感提供思路与理论依据。     

甲型H1N1流感与严重急性呼吸综合征和人禽流感的异同

目的：评价^18F-脱氧葡萄糖（FDG）双探头符合线路断层显像（DHTC）结合血清肿瘤标志物分析对肺部肿块良恶性鉴别的应用价值，并对两种方法进行比较。方法：160例胸部X线或CT怀疑肺癌的患行FDG DHTC检查及三项肿瘤标志物－－癌胚抗原（CEA）、CYFRA21－1及神经特异性烯醇化酶（NSE）测定，两种检查间隔时间不超过2周。对肺部病变的FDG浓聚程度及特征进行分析，以局部斑块状明显浓聚灶且靶／非靶比值（T／N比）≥1．3为阳性（肺癌）；反之，肺部病变无明显放射性浓聚，或浓聚呈云片状、散在性模糊的影像且T／N比＜1．3为阴性（良性病变）。三项肿瘤标志物中有1项或1项以上超过正常值上限即为阳性（肺癌）。上述检查完成后1个月内得到病理等最终诊断结果。结果：127例患最终确诊为肺癌，另外33例为肺部良性病变。FDG DHTC对肺癌诊断的灵敏度、特异性和准确性分别为94．5％、84．8％和92．5％。血清肿瘤标志物测定对肺癌诊断的灵敏度、特异性和准确性分别为67．7％、84．8％和71．3％。卡方检验显示FDG DHTC对肺癌诊断的灵敏度和准确性均明显优于血清肿瘤标志物测定，但两的特异性一致。在7例FDG DHTC检查假阴性的肺癌患中，有4例血清肿瘤标志物测定为阳性，提示后对肺癌的诊断仍有一定的参考价值。结论：FDG DHTC检查对肺癌的诊断是一种灵敏可靠的方法。虽然血清肿瘤标志物测定对肺癌诊断的灵敏度和准确性均远低于FDG DHTC检查，但二综合分析仍有助于提高肺癌诊断的阳性率。     

一种病毒运送培养基的改良及其评价

目前我国临床实验室常用的病毒运送培养基多以商业化产品为主,但其效果未见相应的实验数据.本研究利用流感病毒PR8株、呼吸道合胞病毒Long株作为试验用病毒的代表,根据临床实际应用情况对病毒运送培养基的最适条件进行筛选和评价.     

银翘散体内抑制甲1型流感病毒FM1株复制作用的实验研究

目的：观察中药银翘散体内抑制甲1型流感病毒FM1株复制的作用。方法：以甲1型流感病毒FM1鼠肺适应株滴鼻感染BALB／c小鼠,并用病毒唑及高、中、低剂量银翘散干预相应组别小鼠,观察生存状态及检测肺指数,以苏木素-伊红染色（HE染色）法观察病理改变;将鼠肺悬液以空斑减少试验定量检测感染性病毒滴度,蛋白免疫印迹技术检测核蛋白（nucleoprotein,NP）表达。结果：银翘散可以减轻全身症状,降低肺指数;减少鼠肺病变范围及肺泡腔渗出物;降低鼠肺病毒滴度及鼠肺流感病毒NP表达量。结论：银翘散有体内抑制甲1型流感病毒FM1株复制的作用。