中药抗流行性感冒作用机制研究进展

流行性感冒(简称"流感")是由流感病毒引起的感染性呼吸系统疾病。每次流感爆发都会在全球造成高发病率以及致死率,严重危害人类健康。中医药用于流感防治已有千年历史,其活性成分不仅可以直接靶向病毒,还具有调节炎症信号通路、抑制炎症因子风暴和提高免疫力的作用。本文对常见抗流感单味中药及中药复方在流感治疗中的作用及其机制进行综述,旨在为中西医结合防治流感提供思路与理论依据。     

基于NF-κB通路探讨六神胶囊对脂多糖诱导巨噬细胞RAW264.7炎症反应的影响

目的探讨六神胶囊的抗炎作用及机制。方法RAW264.7细胞分为六神胶囊组和地塞米松组,六神胶囊按9.76、4.88、2.44、1.22、0.61、0.31、0.15μg/ml梯度稀释;地塞米松按250、125、62.5、31.25、15.63、7.81、3.91μg/ml梯度稀释,选择细胞存活率大于90%的最大3个六神胶囊浓度和最大无毒剂量的地塞米松进行后续实验。RAW264.7细胞分为空白组,地塞米松组,模型组及六神胶囊高、中、低剂量组。除空白组外,其余各组采用脂多糖诱导建立炎症模型。造模后六神胶囊高、中、低剂量组分别加入筛选浓度的高、中、低浓度六神胶囊溶液各1 ml;地塞米松组加入筛选浓度的地塞米松溶液1 ml;模型组和空白组加入1 ml培养液。24 h后收集细胞上清液检测一氧化氮(NO)的浓度,ELISA法检测细胞中白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)的含量,实时荧光定量PCR法检测细胞中IL-1β、TNF-α、IL-6和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA表达,蛋白印迹实验检测核因子κB p65(NF-κB p65)、磷酸化核因子κB p65(p-NF-κB p65)、核因子抑制蛋白κB(IκBα)和磷酸化核因子抑制蛋白κB(p-IκBα)表达。结果选择六神胶囊1.22、0.61、0.31μg/ml浓度,地塞米松31.25μg/ml浓度进行后续实验。与空白组比较,模型组细胞中TNF-α、IL-1β、IL-6及NO水平,TNF-α、IL-1β、IL-6和iNOS mRNA表达,p-IκBα、p-NF-κB p65蛋白表达显著升高,IκBα蛋白表达显著降低(P<0.01);与模型组比较,地塞米松组及六神胶囊中、高剂量组细胞TNF-α、IL-1β、IL-6及NO水平,TNF-α、IL-1β、IL-6和iNOS mRNA表达,p-IκBα和p-NF-κB p65蛋白表达均显著降低,IκBα蛋白表达升高(P<0.05或P<0.01);与地塞米松组比较,六神胶囊高剂量组IL-1β水平降低、IL-6水平升高,TNF-αmRNA及p-NF-κB p65蛋白表达显著降低(P<0.01);六神胶囊高剂量组TNF-α、IL-1β含量,IL-6、TNF-αmRNA表达,p-NF-κB p65蛋白表达低于六神胶囊中、低剂量组(P<0.01)。结论六神胶囊在体外具有良好的抗炎活性,可能通过抑制NF-κB信号通路的激活,降低iNOS的表达,进一步抑制NO的合成和炎性细胞因子的产生,从而改善炎症反应,以高剂量效果较佳。     

邓氏清毒饮抗甲型流感病毒及抗炎机制研究

目的探讨邓氏清毒饮对甲型流感病毒（H3N2）的抗病毒活性及其在调节宿主炎症免疫应答中潜在的作 用。方法观察邓氏清毒饮对H3N2 体外活性的影响;用实时荧光定量PCR 检测邓氏清毒饮对A549 细胞感 染H3N2 病毒后白细胞介素6（IL-6）、白细胞介素8（IL-8）、干扰素诱导蛋白10（IP-10）、肿瘤坏死因子α （TNF-α）、单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）及趋化因子配体5（CCL-5）表达的影响。用蛋白印迹实验检测核因子 抑制蛋白-κB（IκBα）、磷酸化核因子抑制蛋白-κB（p-IκBα）、核因子-κB p65（NF-κB p65）、磷酸化核因子-κB p65（p-NF-κB p65）的表达。结果邓氏清毒饮23.4、11.7、5.85 mg·mL-1 可显著抑制H3N2 的体外复制,减少 病毒空斑形成;在mRNA 水平上可显著降低细胞因子IL-6、IL-8、IP-10、TNF-α、MCP-1 及CCL-5 的表 达;蛋白印迹检测发现邓氏清毒饮可下调p-IκBα 和p- NF-κB p65 蛋白表达,增加IκBα 的表达,从而抑制 H3N2 诱导的NF-κB 信号通路激活。结论邓氏清毒饮可抑制H3N2 的体外复制,抑制流感病毒诱导的NF- κB 信号通路激活,降低炎性细胞因子的表达,表明邓氏清毒饮具有防治流感病毒的潜力。     

银翘解毒软胶囊体外抑制人冠状病毒229E 及其介导的炎症的研究

目的探究银翘解毒软胶囊（YQ）对人冠状病毒229E（HCoV-229E）的体外抑制作用。方法通过经典的 体外细胞模型分析银翘解毒软胶囊的体外毒性及对HCoV-229E 的抑制作用;通过空斑实验验证银翘解毒软胶 囊对HCoV-229E 的抑制作用;应用实时定量PCR 法分析银翘解毒软胶囊对HCoV-229E 介异的炎症因子表达 水平的影响。结果银翘解毒软胶囊对人肝癌细胞的50%毒性浓度为（3 315±131）μg·mL-1,对HCoV-229E 的 50%抑制浓度为（361.9±36）μg·mL-1,选择指数为9.16。空斑实验表明银翘解毒软胶囊2 mg·mL-1 几乎 可完全抑制病毒复制（P＜0.001）。银翘解毒软胶囊在2 mg·mL-1浓度作用下,可明显抑制由冠状病毒HCoV-229E 感染介导的炎症因子如趋化因子（C-C 基元）配体5（CCL-5,P＜0.001）、单核细胞趋化蛋白1（MCP-1,P＜ 0.001）、白细胞介素6（IL-6,P＜0.001）、白细胞介素8（IL-8,P＜0.001）和肿瘤坏死因子α（TNF-α,P＜ 0.001）核酸的升高。结论体外实验显示银翘解毒软胶囊可抑制人冠状病毒HCoV-229E 的复制及其介导的炎 症反应,具有作为抗冠状病毒药物的开发价值。