淫羊藿苷及其代谢产物脱水淫羊藿素体外抑制猴免疫缺陷病毒复制作用

目的观察淫羊藿苷及其代谢产物脱水淫羊藿素体外对猴免疫缺陷病毒的抑制作用。方法用CCK-8检测不同浓度的淫羊藿苷与代谢产物脱水淫羊藿素对CEMx174细胞的毒性;以SIVmac251感染CEMx174细胞为模型,观察细胞病变效应(CPE);实时套式反转录荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞内猴免疫缺陷病毒(SIV)核糖核酸(RNA)相对量和上清中病毒载量三个指标,来评估淫羊藿苷与代谢产物脱水淫羊藿素对SIV复制的抑制作用。结果淫羊藿苷和脱水淫羊藿素的最大无毒浓度分别是50μg·mL~(-1),16μg·mL~(-1)。在细胞内,淫羊藿苷(50,25,12.5μg·mL~(-1))和脱水淫羊藿素(16,8,4μg·mL~(-1))组SIV RNA相对量都明显比病毒对照组低(P0.01,P0.05),且具有一定的量效关系。同时在上清中,淫羊藿苷(50,25μg·mL~(-1))和脱水淫羊藿素(16,8,4μg·mL~(-1))组病毒载量明显比病毒对照组低(P0.01,P0.05),也存在一定的量效关系。以上药物浓度与病毒对照组比较均具有统计学差异。结论淫羊藿苷及其代谢产物脱水淫羊藿素均对SIV的复制起到抑制作用,具有深入研究和开发的前景。     

参附注射液对晚期猴艾滋病模型的影响

目的 观察参附注射液对晚期猴艾滋病(AIDS)模型的疗效及对临床预后的影响.方法 将10只恒河猴随机分为对照组和治疗组各5只,经静脉注射SIVmac239病毒株感染建立猴艾滋病模型,当猴AIDS模型进入艾滋病晚期时,对照组予常规西医对症治疗,治疗组在西医对症治疗基础上静脉推注参附注射液,20ml/次,每日1次,20天为1个疗程,每疗程间停药3天,连续治疗至猴死亡.观察两组存活时间、体重变化、精神状况、临床症状评分、组织病理学改变并检测T淋巴细胞亚群(CD4+％、CD4+/CD8+)、病毒载量.结果 两组治疗后死亡率、CD4+％、CD4+/CD8+比较差异无统计学意义(P＞0.05),治疗组生存时间较对照组显著延长(P＜0.05)f治疗组病毒载量较对照组下降明显(P＜0.05)；两组治疗中摄食情况、精神活动情况、总评分比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论 参附注射液对晚期猴AIDS模型在延长生存时间、减轻临床症状、延缓病情恶化速度、改善部分血液学指标方面疗效确切.     

缩泉丸对肾阳虚多尿大鼠肾脏AQP-2 mRNA与AVPR-V2 mRNA表达的影响

目的:观察缩泉丸对肾阳虚多尿模型大鼠肾脏AQP-2 mRNA和AVPR-V2 mRNA表达的影响.方法:用腺嘌呤250 mg/kg灌服大鼠4w,造成肾阳虚多尿模型,分别给予缩泉丸或去氨加压素治疗4 w,用实时荧光定量PCR法观察缩泉丸对肾阳虚多尿模型大鼠肾脏水通道蛋白AQP-2 mRNA及加压素二型受体(AVPR-V2)mRNA表达的影响.结果:肾阳虚多尿模型组大鼠肾脏AQP-2 mRNA与AVPR-V2 mRNA表达比正常对照组明显降低(P＜0.01),dDAVP组和缩泉丸高剂量组AQP-2 mRNA表达与AVPR-V2 mRNA表达比模型组明显升高(P＜0.05);其余给药各组与模型组相比无显著差异(P＞0.05).结论:缩泉丸能提高肾阳虚多尿模型大鼠肾脏AQP-2 mRNA与AVPR-V2 mRNA表达.     

铁沉积于巨噬细胞对转化生长因子及炎症介质基因表达的影响

目的 探讨铁沉积于巨噬细胞对肝纤维化发生发展的作用机制.方法 以柠檬酸铁胺(FAC)与巨噬细胞株(RAW264.7细胞)共同温育,体外建立铁沉积于巨噬细胞模型.①将RAW264.7细胞分为FAC 1 mmol/L、100 μmol/L组及对照组,每组8孔.观察铁沉积于RAW264.7细胞对转化生长因子-β1(TGF-β1)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA表达的影响.②另将RAW264.7细胞分为对照组、铁沉积组、去铁铵组;对照组为正常培养的RAW264.7细胞,铁沉积组加入100 μmol/L FAC,去铁铵组分别加入100 μmol/L FAC和1 000、200、40、8、1.6、0.32 μmol/L的去铁铵,每组3孔.观察不同浓度去铁铵对铁沉积于RAW264.7细胞表达TGF-β1、iNOS、TNF-α mRNA的影响.结果 ①铁沉积于RAW264.7细胞主要使TGF-β1 mRNA表达明显降低,iNOS、TNF-α mRNA表达显著升高,以100 μmol/L FAC作用显著,与对照组比较差异有统计学意义(TGF-β1 mRNA:0.60±0.18比1.42±0.21,iNOS mRNA:3.79±1.48比1.10±0.33,TNF-α mRNA:1.72±0.37比1.07±0.10,P<0.05或P<0.01).②去铁铵能使RAW264.7细胞出现与铁沉积后相反的基因表达变化,以较高浓度1 000 μmol/L、200 μmol/L(TGF-β1 mRNA:3.13±1.03、2.39±0.29,iNOS mRNA:3.28±0.62、5.36±1.04,TNF-α mRNA:3.04±1.35、3.35±0.52)作用显著,与铁沉积组(TGF-β1 mRNA:0.22±0.09,iNOS mRNA:18.57±8.44,TNF-α mRNA:6.30±1.00)比较差异有统计学意义(均P<0.01).结论 铁沉积于巨噬细胞可能是通过诱导一氧化氮(NO)过度合成,促进炎症的形成并进一步促进肝纤维化的发生发展,而不是通过上调TGF-β1 mRNA表达来实现的.     

冰香散挥发油对流感病毒感染鼠的预防作用及T淋巴细胞亚群的影响

[目的]观察冰香散挥发油预防性给药和不同途径给药(滴鼻、雾化)对流感病毒A/FM/1/47 (H1N1)鼠肺适应株感染小鼠的肺指数和T淋巴细胞亚群的影响.[方法]选用NIH小鼠,随机分为正常组、模型组、病毒唑组(剂量为100mg/kg)、冰香散滴鼻组(剂量为0.03g/kg)、冰香散雾化组(剂量为0.6g/kg),采用不同途径预防性给药7d,第8天小鼠攻毒,再持续给药4d后称取肺质量计算肺指数,取脾制成单细胞悬液经流式细胞仪测定各组T细胞亚群水平.[结果]冰香散滴鼻组、冰香散雾化组均能显著降低小鼠感染甲型流感病毒后的肺指数,与模型组比较差异有统计学意义(P＜0.05);冰香散滴鼻组能显著提高小鼠脾组织T细胞亚群CD4+、CD3+水平和CD4+/CD8+比值(P＜0.05或P＜0.01).[结论]冰香散滴鼻防治流感的作用与其能调节T淋巴细胞水平有关.     

DMN致小鼠肝损害凝血系统改变及复方肝毒清的干预作用

目的观察二甲基亚硝胺(DMN)诱导的小鼠肝损伤模型凝血系统改变及中药的影响。方法以DMN腹腔注射造模,观察凝血酶原时间(PT)、凝血酶原活动度(PTA)、肝组织凝血因子mRNA、凝血调控因子u-PA、t-PA、PAI-1、TAFImRNA量动态变化;并另取小鼠造模分组灌胃给药,观察复方肝毒清对u-PA、t-PA、PAI-1、TAFI mRNA的影响。结果 DMN造模后PT逐渐延长,48～96h时最长;PTA减小,36～96h之间均小于40%;F2、F11 mRNA造模后有显著升高,均在72h时达到最高;u-PA和t-PA mRNA均明显升高;PAI-1和TAFImRNA均显著降低。复方肝毒清能使PT缩短、PTA升高至40%以上、u-PA和t-PAmRNA水平显著下降、PAI-1和TAFI mRNA明显升高。结论 DMN诱导的肝损伤小鼠凝血系统有明显变化,中药复方可能主要是通过影响凝血纤溶调控因子表达而改善DMN诱导的小鼠肝损伤凝血系统的作用。     

LAMP法检测超级细菌NDM-1基因

目的建立超级细菌NDM-1基因的LAMP检测方法。方法根据目前Genbank上公布的超级细菌NDM-1基因序列,交由商业性的公司化学合成NDM-1全基因,然后以PCR、酶切及测序鉴定基因合成是否成功;再以LAMP法扩增NDM-1基因重组质粒,电泳观察扩增是否成功。结果经证实化学合成NDM-1基因是成功的;之后进行的LAMP法扩增NDM-1基因也是成功的。结论成功建立了LAMP法检测超级细菌NDM-1基因的方法,为超级细菌的检测提供了一种可用的方法。     

叶下珠复方和拉米夫定治疗慢性乙型肝炎的临床疗效比较

[目的]观察比较叶下珠复方、拉米夫定、叶下珠复方合用拉米夫定治疗慢性乙型肝炎的疗效.[方法]90例慢性乙型肝炎患者随机分3组,分别为叶下珠复方组(剂量2.6g/次,3次/d)、拉米夫定组(剂量100mg/次,1次/d)和叶下珠复方合用拉米夫定组,均连续口服52周.治疗前、后定期检测血清肝功能指标及乙型肝炎标志物表面抗原(HBsAg)、e抗原(HBeAg)、乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(HBV-DNA)及酪氨酸-蛋氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸(YMDD)含量.[结果]叶下珠复方组肝功能复常率、HBeAg转阴率均高于拉米夫定组,而HBV-DNA转阴率低于拉米夫定组(P<0.05),YMDD变异少于拉米夫定组(P<0.05);两药合用组的HBeAg转阴率与叶下珠复方组相仿(P>0.05)而高于拉米夫定组(P<0.01),HBV-DNA转阴率均高于叶下珠复方组和拉米夫定组(均P<0.01),肝功能复常率高于拉米夫定组(P<0.05或P <0.01),YMDD变异也少于拉米夫定组(P<0.05).[结论]叶下珠复方与拉米夫定联合用药可提高治疗慢性乙型肝炎疗效,减少YMDD变异,推迟和避免拉米夫定耐药株产生,以及由此而引起的病毒在体内的持续复制.     

抗登革病毒的药物研究进展

结合登革病毒(DV)的现代分子病毒学研究进展，通过对已有的抗病毒药物的抗DV作用、抗DV的可能途径和天然产物的抗DV作用等方面的综述，展现了抗DV药物的研究现状，认为现有的抗病毒药虽然体外试验抗DV有效，但并没有显示出经得起体内试验的检验。对DV致病机理的进一步认识和分子病毒学的发展为抗DV药物的设计提供了一些新靶点，虽离发展出有效力的抗DV药物还有很大距离，但在天然产物的研究中却发现了可喜的苗头。指出今后抗DV药物的发展方向为：(1)建立较好的动物模型，进行机理研究和药物筛选；(2)在机理研究基础上，合成抗DV有效药物；(3)在天然产物中寻找抗DV药物，特别是应加强从中草药中筛选出抗DV药物的研究。     

中医学扶正祛邪治则:预防和治疗病毒感染性疾病和抗病毒药物设计的一个新策略

扶正祛邪是中医临床一个常用的治疗法则,无论在外感还是内伤性疾病中都有重要的应用。中医学长期的临床实践表明,在感染或内伤性疾病的特定阶段(中医临床辨证属正虚邪实者),按照扶正祛邪治则配伍组方治疗,往往能收到良好的治疗效果。分析了中医学扶正祛邪治则的理论渊源、应用和现代研究现状,接着研究了病毒感染性疾病、病毒免疫学、抗病毒药物的研究现状、抗病毒药物研究遇到的困难,在此基础上提出基于中医学扶正祛邪治则,从病毒和病毒免疫学相互关系出发的抗病毒新药设计的新思路。