FOXE1基因对人结直肠癌细胞迁移能力的影响

目的 探讨叉头框E1蛋白（FOXE1）基因对结直肠癌细胞迁移能力的影响。方法 将人结直肠癌细胞株RKO分为实验组（RKO细胞转染FOXE1表达质粒）和对照组（RKO细胞转染空载质粒），采用半定量RT-PCR法分析FOXE1 mRNA在结直肠癌细胞株中的表达量，蛋白免疫印迹检测实验组和对照组细胞中FOXE1蛋白及细胞骨架相关蛋白的表达量。通过划痕实验、Transwell实验和细胞免疫荧光实验观察FOXE1对肿瘤细胞迁移能力和细胞形态的影响。结果 FOXE1基因在结直肠癌细胞株中表达沉默，结直肠癌细胞株转染FOXE1后，RKO细胞的划痕愈合能力和细胞迁移能力明显降低，细胞伪足形成明显减少，高表达FOXE1的RKO细胞切丝蛋白表达降低，而磷酸化失活的切丝蛋白表达升高。结论 FOXE1基因通过磷酸化失活切丝蛋白影响细胞肌动蛋白骨架重组以及丝状伪足形成，从而抑制结直肠癌细胞的迁移。     

两种不同类型的胃癌组织中DNA氧化损伤的水平及临床意义

目的检测胃腺癌、印戒细胞癌组织及正常胃黏膜组织中8-羟基脱氧鸟苷（8- oxodGsn）水平,探讨DNA氧化损伤与不同类型胃癌临床指标间的关系。方法提取42例胃癌（腺癌28例,印戒细胞癌14例）及癌旁5cm以外的正常组织的DNA,并采用核酸酶P1和碱性磷酸酶消化成单个核苷,再采用高效液相色谱-串联质谱法（LC- MS/MS）检测其8- oxodGsn的水平;同时联合免疫组化法对组织中的8- oxodGsn进行定位分析。结果不同类型胃癌组织与正常组织中8- oxodGsn水平的差异均有统计学意义（均P＜0.05）。8- oxodGsn主要分布于肿瘤细胞的细胞质和细胞核内,腺癌细胞中以细胞核分布居多,印戒细胞癌中以细胞质分布居多。不同类型胃癌组织中8- oxodGsn水平在癌组织浸润深度、淋巴结转移程度、远处器官转移程度、临床病理分期等差异均有统计学意义（均P＜0.05）。结论8- oxodGsn水平在两种类型的胃癌组织中均有不同程度的增加,提示DNA氧化损伤可能是胃癌发生、发展的重要因素。     

榄香烯和PD98059诱导人胃癌SCG-7901细胞株凋亡及其机制的探讨

目的：探讨榄香烯及PD98059对人胃癌SCG-7901细胞株凋亡的影响,及其与ERK1／2、P38MAPK信号通路的关系。方法：用不同浓度的榄香烯和PD98059处理人胃癌SCG-7901细胞,体外细胞增殖抑制实验（MTT）法检测细胞增殖情况;Western—blot法检测ERKl／2、磷酸化ERKl／2（p-ERK1／2）和磷酸化P38（p-P38）的表达;RT-PCR检测bcl-2mRNA及baxmRNA的表达;TUNEL法检测胃癌细胞凋亡并计算凋亡指数。结果：榄香烯和PD98059单独作用都有抑制胃癌细胞增殖的作用,前者呈浓度和时间依赖性,后者则呈时间依赖性但无浓度依赖性,两药联合作用时对胃癌细胞增殖的抑制作用显著大于单一用药时（P〈0．05）;随榄香烯的浓度增加p-ERK1／2蛋白的表达量增加（P〈0．05）,总FRK1／2无明显变化;榄香烯（0．08mg／mL）、PD98059（50μmol／L）及榄香烯＋PD98059组作用胃癌细胞24h,p-P38的表达均高于对照组（P〈0．05）,且榄香烯＋PD98059组较榄香烯组或PD98059组更高（P〈0．05）;随榄香烯浓度的增加,baxmRNA的表达增加,bcl-2mRNA的表达降低,且榄香烯＋PD98059组表现最显著;实验组细胞凋亡率均高于对照组（P〈0．05）,具有浓度依赖性（P〈0．05）,且榄香烯＋PD98059组的凋亡率明显高于单一作用组（P〈0．05）。结论：榄香烯及PD98059可以抑制胃癌细胞增殖,前者具有时间和浓度依赖性;榄香烯及PD98059还可以促进胃癌细胞凋亡。榄香烯抑制细胞增殖、促进细胞凋亡的机制包括促进ERKl／2磷酸化和上调P-P38MAPK信号通路的表达;PD98059抑制ERKl／2的磷酸化,但通过上调p-P38MAPK信号通路的表达而发挥其细胞调节作用。     

人胃癌及癌旁组织RNA氧化损伤水平的比较及临床意义

目的:通过检测人胃癌组织及其癌旁组织中的RNA氧化损伤程度,探讨RNA氧化与胃癌发生的相关性。方法:分别利用免疫组化方法和液相-串联质谱(LC-MS/MS)方法对61例胃癌组织及其癌旁组织中8-氧鸟苷(8-oxo Gsn)进行定性和定量分析,并统计分析结果。结果:免疫组化结果检测显示8-oxo Gsn在癌旁组织中含量低,而在胃癌组织中含量明显增高,且棕色染色区域主要集中在肿瘤细胞胞浆位置。质谱检测结果显示胃癌组织中8-oxo Gsn含量较对应癌旁组织高,差异有统计学意义(P0.05)。结论:8-oxo Gsn在胃癌组织中含量增加。RNA氧化损伤可能在胃癌的发生发展过程中起重要作用。     

DOF和DOX方案治疗不可切除晚期胃癌的不良反应的对比分析

目的： 对比研究DOF和DOX方案治疗晚期胃癌的不良反应差异。 方法： 回顾性分析69例不可切除晚期胃癌患者,其中31例采用DOF方案化疗（奥沙利铂+多西他赛+5-氟尿嘧啶化疗,DOF组）,38 例采用DOX方案化疗（奥沙利铂+多西他赛+希罗达化疗,DOX组）,比较2 组间不良反应发生率和严重程度的差别。 结 果： 每组每位患者均完成3～8个周期,DOF组共完成189个周期,DOX组共完成233个周期。以周期统计的不良反应总发生率2组相当,分别为80.0%和81.5%（ P＞0.05）;但血液系统不良反应总发生率DOF组高于DOX组,尤以中性粒细胞减少及血小板下降表现明显,发生率分别为48.7%＞33.5%和33.3%＞18.0%（ P＜0.05）。非血液系统不良反应总发生率2组相仿（ P＞0.05）,但口腔黏膜损害和周围静脉炎的发生率DOF组较高,手足综合征及指甲损坏发生率DOX组较高,发生率分别为：41.8%＞15.0%、16.4%＞3.4%、6.9%＜50.6%及4.8%＜36.5%（均P＜0.05）。以患者例数统计的不良反应总发生率和非血液系统不良反应总发生率2组相仿（ P＞0.05）,而血液系统不良反应总发生率和III/IV度的比例DOF组较高（ P＜0.05）。 结论：DOF和DOX方案不良反应发生率总体相当;但DOF方案易出现血细胞下降、口腔黏膜损害和周围静脉炎,且III/IV度比例高,而DOX方案易出现手足综合征和指甲损害等不良反应。     

榄香烯诱导裸鼠移植瘤凋亡的作用机制研究

目的 观察榄香烯对裸鼠胃癌移植瘤的作用并探讨其相关机制.方法 雄性裸鼠建立人胃癌SCG-7901细胞裸鼠移植瘤模型,随机分为对照组、榄香烯组、PD98059组、榄香烯和PD98059联合组（榄香烯＋PD98059组）.对比榄香烯和PD98059对裸鼠胃癌移植瘤的作用,测量对比裸鼠胃癌移植瘤的大小及药物对裸鼠生长的抑制作用.Western-blot方法检测各组ERK1/2蛋白、p-ERK1/2、p-P38蛋白的表达情况.结果 3个实验组在治疗后移植瘤大小与对照组比较明显减小,榄香烯组较对照组p-ERK1/2蛋白表达显著增多,3个治疗组相比对照组p-p38蛋白表达显著增加,两药联合比单一药物作用显著（均P＜ 0.05或P＜ 0.01）.结论 榄香烯和PD98059都能促进肿瘤组织凋亡,其中榄香烯促进裸鼠胃癌移植瘤凋亡可能与p-ERKl/2蛋白和p-p38蛋白上调有关,而PD98059促进裸鼠胃癌移植瘤凋亡可能与p-P38蛋白上调有关.     

榄香烯体外和体内抑制人胃癌SGC―7901细胞株的增殖作用及机制

目的观察榄香烯对人胃癌SGC-7901细胞株体外和体内增殖、抑制及凋亡的作用,并探讨其可能的作用机制。方法采用不同药物对培养后的人胃癌SGC-7901细胞株进行处理并分为4组：对照组、榄香烯组、细胞外信号调控的蛋白激酶1/2（ERK1/2）信号通路抑制剂PD98059组和榄香烯+PD98059联合组;再将20只雄性裸鼠随机分为4组：甲组（腹腔注射0.9%氯化钠注射液）、乙组（腹腔注射榄香烯最大耐受剂量200mg/kg）、丙组（腹腔注射PD98059最大耐受剂量1mg/kg）、丁组（腹腔注射最大耐受剂量榄香烯+PD98059）,均制作胃癌移植瘤模型,并腹腔注射不同药物进行治疗。观察榄香烯和PD98059对细胞株相关蛋白的表达情况及裸鼠胃癌移植瘤的大小及对裸鼠生长的影响。采用MTT法检测细胞增殖情况,Western-blot法检测ERK1/2、磷酸化细胞外信号调控的蛋白激酶1/2（p-ERK1/2）、p38丝裂原活化蛋白激酶（p38）、磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶（p-p38）的表达,real-timeRT-PCR检测Bcl-2mRNA及BaxmRNA的表达,TUNEL法检测胃癌细胞凋亡并计算凋亡指数。结果与对照组相比,榄香烯组随药物浓度的增加,p-ERK1/2表达增加（P＜0.05或0.01）,BaxmRNA的表达增加（均P＜0.01）,Bcl-2mRNA的表达降低[除榄香烯0.02mg/ml外,其他浓度均具有统计学差异（均P＜0.01）],而总ERK1/2的表达无明显变化（均P＞0.05）;榄香烯、PD98059及榄香烯+PD98059对胃癌细胞增殖均具有抑制作用（均P＜0.05）,且两药联合的抑制作用最好;榄香烯、PD98059及榄香烯+PD98059组细胞凋亡率均高于对照组（P＜0.05或0.01）,并具有浓度依赖性,且两药联合组的凋亡率明显高于单一用药组（均P＜0.05）;乙、丁两组移植瘤的瘤重均较甲组明显减小（P＜0.05或0.01）,且两药联合时抑瘤率达75.59%。结论榄香烯对肿瘤细胞具有抑制作用,且可能是通过上调p-ERK1/2和p-p38蛋白的表达促进胃癌细胞和移植瘤的凋亡,另榄香烯与PD98059联合使用时对肿瘤细胞及组织具有协同抑制效应。