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刚地弓形虫SAG4基因的体外扩增及序列分析 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:扩增刚地弓形虫R.H株SAG4基因, 对SAG4基因编码序列进行结构和初步的功能预测.方法:提取弓形虫R.H株基因组DNA,然后进行目的基因的PCR体外扩增、序列测定和分析.结果:从弓形虫R.H株基因组DNA中扩增出575 bp的基因片断,利用生物信息学技术鉴定其为R.H株SAG4基因分子片段,转译后的蛋白质结构稳定,能形成多个结构域.结论:成功地获得了刚地弓形虫R.H株SAG4基因片段,为弓形虫病的抗原诊断及分子疫苗研究奠定基础. 相似文献
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目的:构建弓形虫SAG1基因原核表达质粒,诱导表达重组蛋白SAG1,分离纯化并检测其免疫反应性。方法:设计一对特异引物,体外扩增SAG1目的基因(双酶切纯化后)定向克隆至质粒pET29a(+)中,转化到大肠埃希菌(Escherichia coli)BL21,采用PCR、双酶切和测序等方法鉴定,并以异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)进行诱导表达,通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析重组蛋白的表达情况,经镍离子柱纯化重组蛋白后,用蛋白质印迹(Western blotting)分析与小鼠弓形虫阳性血清的免疫反应性。结果:重组质粒经PCR、双酶切反应和测序鉴定,产物的大小与结构均与预期值相符,经IPTG诱导后,稳定表达相对分子量(Mr)为28950的蛋白,纯化后的重组蛋白经Western blotting分析显示,与小鼠弓形虫感染血清有特异性反应条带。结论:成功构建重组表达质粒pET29a(+)-SAG1,使弓形虫表面抗原SAG1在体外获得表达,分离纯化的SAG1重组蛋白有免疫反应性。 相似文献
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目的了解广西南宁市在校学生和医院就诊者人芽囊原虫感染状况。方法随机抽取广西医科大学在校大学生若干名,以及医院就诊者,采用生理盐水涂片法和碘染色法对以上人群进行粪便检查人芽囊原虫包囊。结果本次共调查5 346人,人芽囊原虫感染者895人,总感染率为16.74%,男、女性总感染率分别为13.56%和22.90%。从性别分布看,两组人群女性感染率均高于男性,尤以医院就诊人群中的女性更为明显。在校大学生3个年级共调查1 433人,其中男性为563人,女性为870人;人芽囊原虫感染者共214人,感染率为14.93%;男、女性感染率分别为14.74%和15.06%。医院就诊者3 913人,其中男性2 962人,女性951人;人芽囊原虫感染者共681人,感染率为17.40%;男、女性感染率分别为13.34%和30.07%。该人群感染者的年龄分布为,0~年龄组人芽囊原虫感染率最高,达87.18%;50~及60~年龄组感染率次之,分别为58.87%和56.20%。结论广西南宁市在校大学生和医院就诊者人芽囊原虫的感染率较高,女性感染率高于男性,儿童及老年人感染率高于其他年龄组。 相似文献
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人体寄生虫学是预防医学和临床医学的一门基础学科。学习本课程的目的是为了控制或消灭病原寄生虫所致人体寄生虫病,以及防制与疾病有关的医学节肢动物,保障人类健康。本学科属形态学科,在教学过程中,我们贯彻理论联系实际的原则,非常注重培养学生亲自动手、独立操作能力,尽可能地让学生多看活体寄生虫标本,使学生通过实验能较好地理解大课的授课内容。目前,大多数寄生虫病得到了较好的控制,使得寄生虫标本的采集变得困难,制作出使学生和教师都满意的实验标本的任务变得艰巨。如何解决这一教学过程中突出的矛盾,是我们实验技术人员需要思考和探索的问题。在教学实践中,我们充分利用科室现有的教学资源,积极进行实验教学的改革,取得了一定的效果。溶组织内阿米巴又称痢疾阿米巴,常寄生于人体结肠的回盲部,在肠内引起阿米巴痢疾或肠炎,同时可侵入肝、肺、脑、泌尿生殖道和皮肤等器官组织,引起肠外阿米巴病。阿米巴痢疾可分为急性阿米巴痢疾和慢性阿米巴痢疾,急性阿米巴痢疾表现为腹痛、腹泻、高热、寒战和恶心呕吐,大便呈果酱样,有腐败腥臭味,此时大便排出的是阿米巴滋养体时期,而慢性阿米巴痢疾一般无临床症状,此期又称健康带虫者,80%~90%阿米巴患者属于此期,从患者大便... 相似文献
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广西南部沿海地区居民人芽囊原虫感染情况调查 总被引:1,自引:0,他引:1
目的了解广西南部沿海地区居民人芽囊原虫的感染情况。方法随机抽样调查11个自然村,以户为单位分别收集家庭各成员粪便标本,采用改良酸醚沉淀法镜检。结果在该地区的11个村抽检1 366人,粪检样品1 366份,阳性360份,人群感染率26.35%。11个村的感染率在5.13%~44.72%之间;感染率年龄分布以0~9岁最高,为34.79%,40~49岁最低,为12.93%;职业分布以学龄前儿童感染率最高,为40.80%,农民感染率最低,为21.19%。结论广西南部沿海地区居民人芽囊原虫感染率较高,地区、年龄和职业差异明显,且有家庭聚集现象。 相似文献
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病例1女,40岁,护士,广西宾阳县人。患者腹泻,起初为每天1次,就诊前1周增加到每天2次到数次,多为水样便。于2010年7月8日在广西壮族自治区人民医院就诊,初诊为肠炎。2010年7月9日结肠镜检查,发现升结肠有一直 相似文献
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小儿肺炎是由不同病原体或其它因素所引起的肺部炎症,是发展中国家最常见的儿科疾病之一。本院自1994年始采用中西医结合对此进行治疗,取得了较为满意的疗效,现报告如下。 相似文献
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人芽囊原虫粪便检查与形态观察 总被引:5,自引:1,他引:4
目的了解人芽囊原虫的粪便检查方法和光镜下的形态特点.方法对就诊病人新鲜粪便,用生理盐水涂片、碘染色和吉氏染色三种方法制作玻片标本,光镜下观察人芽囊原虫的形态特征. 结果1495例就诊病人,查出162例人芽囊原虫感染,感染率为10.84%;三种方法可查见人芽囊原虫滋养体期的空泡型和颗粒型,检出率相近,生理盐水涂片偶见阿米巴样型,碘液染色可见包囊期.结论广西人芽囊原虫感染较高,生理盐水涂片和碘染色方法适用于人芽囊原虫的粪便检查,本观察图片可为临床检验提供参考. 相似文献
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目的 对弓形虫表面抗原SAG4基因进行克隆、表达和免疫反应性分析。 方法 根据弓形虫RH株SAG4基因序列(GenBank登录号为AF340224.1)设计引物,体外扩增目的基因,并将其克隆至pMD19-T载体,经PCR和双酶切鉴定并测序,亚克隆至pET28a(+)质粒,转化大肠埃希菌BL21,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析SAG4重组蛋白的表达情况,蛋白质印迹(Western blotting)分析该蛋白与弓形虫慢性感染小鼠血清的免疫反应性。 结果 扩增获得的目的基因片段为537 bp。生物信息学分析表明重组基因编码产物为弓形虫SAG4抗原,是一种外膜蛋白。重组菌经IPTG诱导后,以包涵体的形式稳定表达SAG4。Western blotting分析结果表明,诱导表达的蛋白能被弓形虫慢性感染小鼠血清识别,其相对分子质量(Mr)约为18 740。 结论 重组蛋白SAG4有一定的免疫反应性。 相似文献