苦参碱对Raji细胞凋亡及凋亡相关蛋白Fas/FasL表达的影响

目的：探讨中药苦参碱对人Burkitts淋巴瘤Raji细胞凋亡的作用及其可能机制.方法：应用MTT法测定苦参碱对Raji细胞生长的抑制作用;AnnexinⅤ-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率;WesternBlot检测Fas,FasL,Caspase-3蛋白的表达量.结果：苦参碱0.2～1.6g/L作用Raji细胞24,48,72h后,对Raji细胞生长具有增殖抑制作用,且呈明显的量效和时效关系,48h半数抑制浓度（IC50）为1.34g/L.苦参碱0.4,0.8,1.6g/L组作用48h后,Raji细胞总凋亡率分别为15.10%,27.88%,48.08%,与对照组8.78%相比较差异具有统计学意义（P〈0.05,P〈0.01）.Western Blot检测结果显示Fas,FasL,Caspase-3蛋白表达水平随苦参碱浓度的提高而增加.结论：一定浓度苦参碱可诱导Raji细胞发生凋亡,其凋亡机制可能与上调Fas,FasL蛋白的表达以及激活Caspase-3有关.     

p38MAPK活化在苦参碱诱导Raji细胞凋亡中作用的研究

目的:探讨p38MAPK活化在中药苦参碱(Matrine,Mat)诱导人Burkitt,s淋巴瘤Raji细胞凋亡中的作用。方法:体外培养Raji细胞,分别用苦参碱(终浓度为0.4、0.8、1.6mg/mL)和在此基础上加入SB203580(p38 MAPK抑制剂)作用48h后,采用AnnexinⅤ–FITC/PI双染法检测细胞凋亡率,应用Western blot检测P-p38MAPK及Caspase-3蛋白表达量。结果:终浓度为0.4、0.8、1.6 mg/mL苦参碱对Raji细胞总凋亡率分别为(15.77±0.53)%、(27.88±1.52)%、(48.08±2.87)%、与加入SB203580比较(11.48±0.64)%、(19.34±0.91)%、(33.98±1.26)%具有统计学意义(P<0.05或P<0.01),与对照组(8.78±0.66)%比较也具有显著性差异(P<0.05或P<0.01);Western blot显示了P-p38MAPK和Caspase-3蛋白表达水平均随苦参碱浓度的提高而增加,加入SB203580后二者表达降低。结论:苦参碱可诱导Raji细胞凋亡,其凋亡可能与p38 MAPK的活化,进而直接或间接激活Caspase-3有关。     

解聚复肾宁对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞表达血小板衍生生长因子-B的影响

目的观察解聚复肾宁(JJFSN)对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞(GMCs)表达血小板衍生生长因子-B(PDGF-B)的影响。方法制备厄贝沙坦(Irb)和不同剂量JJFSN含药血清,加入到高糖诱导的体外培养的GMCs中。采用ELISA检测不同时间(24、48、72 h)细胞培养上清液中PDGF-B含量,分别采用RT-PCR法、W estern印迹检测48 h细胞PDGF-B mRNA及其蛋白表达。结果与正常对照组比较,高糖组PDGF-B分泌增加、PDGF-B mRNA及其蛋白表达上调(P<0.001)。与高糖组比较,Irb和JJFSN两种含药血清均能逆转上述变化,后者的抑制作用强于前者(P<0.05),且抑制作用呈一定的时间、剂量依赖关系。结论高糖可致GMCs分泌PDGF-B增加、PDGF-B mRNA及其蛋白表达上调,JJFSN可减少PDGF-B分泌,下调PDGF-B mRNA及其蛋白表达,从而有利于延缓糖尿病肾病肾小球硬化(GS)的进展。     

血栓性血小板减少性紫癜11例及文献复习

目的观察分析血栓性血小板减少性紫癜（TTP）临床特征及诊疗,以期减少误诊率,做到早期诊治。方法对11例血栓性血小板减少性紫癜患者的临床表现、治疗及预后进行回顾性分析。结果11例均有皮肤黏膜不同程度的出血、微血管性溶血（贫血、黄疸、外周血破碎红细胞或变形红细胞、网织红细胞升高）、中枢神经系统损害。11例中10例给予糖皮质激素治疗,4例行血浆置换、2例输注新鲜冰冻血浆后缓解,5例因延误诊断而死亡。结论 TTP 多具有“三联征”,但误诊率、病死率高,血浆置换联合免疫抑制剂治疗自身免疫性疾病 TTP 效果更好,复发率低。     

生理性流动条件下血小板在玻璃表面的聚集行为

目的 研究生理性流动条件下血小板在玻璃表面的聚集行为。方法 采用软光刻工艺加工聚二甲基硅氧烷（polydimethylsiloxane, PDMS)-玻璃微通道芯片。将抗凝人外周全血以300、1 500 s-1壁剪切率流过微通道芯片,倒置荧光显微镜拍摄荧光标记血小板在微通道玻璃表面形成的血小板聚集体荧光图像,通过图像分析得到血小板聚集体数量、平均尺寸、表面覆盖率和平均荧光强度。分别对玻璃表面进行亲水性处理、牛血清白蛋白（bovine serum albumin,BSA）封闭和胶原纤维蛋白修饰处理,调整血液样品红细胞比容（hematocrit,Hct）,用抗血小板制剂处理血液样品,观察上述条件下血小板在玻璃表面的聚集行为;比较分析健康人群和糖尿病患者的血小板聚集情况。结果 流动条件下,血小板在玻璃表面发生聚集形成三维血小板聚集体;血小板聚集依赖于壁剪切率大小、玻璃表面亲疏水性和Hct;血小板聚集主要由血小板膜糖蛋白GPIIb/IIIa-纤维蛋白原和ADP-P2Y12受体通路调控;血小板在玻璃表面的聚集能够反映糖尿病患者血小板的高活化状态。结论 在300、1 500 s-1流动条件下,血小板在玻璃表面的聚集与剪切率、蛋白吸附、血小板相关受体和血小板自身活化状态相关。本文建立了一种无需额外黏附蛋白修饰的微流控血小板功能分析的新模型,可用于临床血小板功能评估。     

PBL联合易位式教学法在血液病教学查房中的应用分析

目的PBL结合师生易位式教学法在血液病教学查房中的应用评价。方法重庆医科大学第五临床学院血液科2014—2017级全科医学本科实习生402人,随机原则分为36组,其中18组采用PBL教学查房,另18组采用PBL结合易位式教学查房。全部教学查房结束后,采用问卷调查的方式来评估学生和带科教师的满意度情况。结果PBL结合易位式教学组,学生在教学满意度、自学能力、学习积极性、准备资料、上课效果、团队合作、语言表达、分析解决问题能力方面均明显优于PBL教学组(P<0.05);理论及实践技能成绩均优于对照组(P<0.05);教师对新教学法满意。结论在血液病教学查房中运用PBL结合易位式教学法,教学效果满意。     

苦参碱诱导Raji细胞凋亡及其对Bcl-2表达的影响

目的:观察苦参碱(Matrine,Mat)对体外人淋巴瘤Raij细胞增殖及细胞凋亡的影响,探讨 Mat 诱导 Raji 细胞凋亡的作用机制.方法:四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法观察Mat对Raji细胞增殖的影响;流式细胞术检测凋亡率;免疫细胞化学技术检测 Mat对Raji 细胞株 Bcl-2 蛋白表达的影响;RT-PCR法检测Bcl-2 mRNA表达.结果:不同浓度的 Mat 对 Raji 细胞均有一定的增殖抑制作用,且呈量效和时效关系;Mat能明显诱导Raji细胞凋亡;免疫细胞化学结果显示 Bcl-2 在实验组中的表达显著低于对照组.RT-PCR 显示 Bcl-2 mRNA 表达明显减弱,且随剂量增加越明显.结论:Mat 能抑制人淋巴瘤 Raji 细胞的增殖,促进细胞凋亡,其作用机制可能与下调 Bcl-2 表达有关.     

地塞米松对特发性血小板减少性紫癜骨髓涂片中巨核细胞形态学的影响

目的 了解地塞米松(DXM)对特发性血小板减少性紫癜(ITP)骨髓涂片中巨核细胞的形态学改变.方法 收集42例ITP初诊患者作为ITP组和22名健康人作为对照组,其中ITP组标本分别在大剂量DXM治疗前和治疗两周后采样,即DXM治疗前和DXM治疗后.然后分别采集上述分组对象的骨髓并涂片,与对照组骨髓片一并在显微镜下对巨核细胞进行分类,并记录DXM治疗前、DXM治疗后以及对照组的血小板数目.结果 DXM治疗前比值与DXM治疗后比值、对照组比值相比较,差异均具有统计学意义(P＜0.01),但治疗后比值与对照组比值相比较,差异无统计学意义(P＞0.05);同时,DXM治疗后外周血小板数较治疗前明显升高(P＜0.01),但与对照组相比仍较低(P＜0.01).结论 DXM在治疗ITP过程中,可直接或间接促使巨核细胞凋亡,从而使血小板生成增加.