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目的 :检测蛋白酪氨酸磷酸酶SHP - 2在IL - 1所促发的细胞移动中的作用。方法 :首先构建重组质粒SHP - 2 -GFP以及SHP - 2C >S -GFP ,并分别转入MCF - 7乳腺癌细胞中 ,建立两种细胞株 ,即 :SHP - 2 -GFP -MCF - 7和SHP - 2C >S -MCF -7。利用细胞移动实验、细胞粘附实验、免疫沉淀、蛋白印迹等生物学实验方法 ,从形态学、蛋白表达量、磷酸化水平等方面分析细胞形态变化、E -钙粘蛋白和基质金属蛋白酶MMP - 1、9在 3种细胞株中的表达情况和细胞因子IL - 1刺激后 3种细胞株中的表达情况 ,进而分析SHP - 2蛋白酪氨酸磷酸酶… 相似文献
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不同发育阶段人胚胎原始生殖细胞的定位及体外培养 总被引：5，自引：1，他引：4
目的:对不同发育阶段的人胚胎原始生殖细胞(PGC)进行定位并比较其体外培养的差异.方法:取4～7周发育阶段的人胚胎,应用组织化学法检测PGC内碱性磷酸酶(AP)以对其定位.体外分离人胚胎生殖嵴和肠系膜组织进行培养,第1次传代后,用AP标记,计数不同发育阶段AP阳性的PGC和体外培养的阳性克隆并进行比较.结果:在卵黄囊、原肠、背侧肠系膜和生殖嵴处有AP强阳性细胞,阳性信号位于胞质内.阳性细胞散在分布,在生殖嵴处聚集成团.不同发育阶段的胚胎组织培养均有阳性克隆出现.统计学分析结果表明,4～7周人胚胎内AP阳性的PGC数目及细胞内信号强度无明显差异(P>0.05);由胚胎组织培养获得的AP阳性克隆数也无显著差异.结论:人PGC位于卵黄囊、原肠、背侧肠系膜和生殖嵴处.4～7周发育阶段,胚胎内PGC数目和体外培养的克隆数无明显变化. 相似文献
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抗衰老新药青春宝的研究概况 总被引：2，自引：0，他引：2
杭州第二中药厂生产的青春宝在国内外享有很好声誉。本文根据中医理论对组方分析以及药理及临床研究证明,青春宝确有抗衰老作用,能提高人体免疫功能,增强防病抗病能力。 相似文献
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冯根生 《第二军医大学学报》1987,(1)
本文采用自制的抗小牛血清抗体-Sepharose4B亲和层析柱把经玻璃珠初步纯化的HuIFN-r进一步纯化至此活性107RU/mg蛋白,回收率达78%。用ConA-Sepharose4B亲和层析法纯化无血清培养基生产的HuIFN-r一步就可达到10~6RU/mg蛋白,同时证明HuIFN-r是一种糖蛋白。用Bio-Gel P-200凝胶过滤法测 相似文献
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用美洲商陆(PWM)或中国商陆在人脾脏淋巴细胞中诱生γ干扰素(IFN-γ)。PWM诱生的IFN-γ经用可控孔径玻璃(CPG)珠吸附后,以含乙二醇的PBS洗脱进行部分纯化,比活性可达10~6RU/mg蛋白。采用国产微孔玻璃(MPG)代替CPG纯化IFN-γ得到相似的纯化效果。回收的CPG和MPG均可再生重复使用。玻璃珠纯化的样品经过抗小牛血清抗体一Sepharose4B(ACS)柱层析进一步纯化至比活性10~7RU/mg蛋白,回收率为78％。PWM或中国商陆诱生的IFN抗病毒活性经pH 2.0或56℃加热处理后几乎全被破坏并可被抗HuIFN-γ的单克隆抗体中和,确证是HuIFN-γ。用Bio-Gel P-200层析法测得PWM诱生的HuIFN-γ分子量主峰在40000～45700范围,小峰在25700左右。中国商陆诱生的HuIFN-γ分子量在45700～49000范围。 相似文献
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将人γ干扰素/β肿瘤坏死因子融合蛋白(hIFN-γ/TNF-β,rhTNF-β)是一种颇具理论研究价值和临床应用前景的新型细胞因子.鉴于现有的rhTNF-β表达质粒的表达水平较低(1%左右),不能满足研究工作的需要.本工作在过去构建rhTNF-β表达质粒的基础上,采用分步构建的方式,首先构建了该融合蛋白基因5’端部分的人γ干扰素突变体(hIFN-γ134-X13)编码序列的表达质粒,在获得高效表达以后,再在其3’端连接上5’端缺失23个氨基酸残基(aa)的人β肿瘤坏死因子(hTNF-β148)的核酸序列,进行整个融合蛋白基因的表达研究.实验结果表明,新构建的rhTNF-β表达质粒经转化大肠杆菌BL21(DE3),在λP_RP_L启动子的控制下,温敏诱导表 相似文献
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人干细胞是具有自我复制和分化潜能的细胞,有很多种类,在人体发育中起着决定性的作用.干细胞的分化是干细胞研究的核心内容,除了受干细胞自身分化潜能制约外,同时受干细胞周围环境的控制.人干细胞的分化研究分为体外研究和体内研究,除观察人干细胞诱导分化后的形态变化外,同时也探索细胞分化的分子机制.人们关注人干细胞的研究,目的就是体外扩增干细胞并获得具有定向分化能力的干细胞,采用适当的手段治疗人类疾病,维护人体健康. 相似文献
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