K~+ Channels and Their Effects on Membrane Potential in Rat Bronchial Smooth Muscle Cells

In order to investigate the K~+ channels and their effects on resting membrane potential(Em) and excitability in rat bronchial smooth muscle cells (BSMCs), the components of outward K~+channel currents and the effects of K~+ channels on Em and tension in rat bronchial smooth musclewere observed by using standard whole-cell recording of patch clamp and isometric tension recordingtechniques. The results showed that under resting conditions, total outward K~+ channel currents infreshly isolated BSMCs were unaffected by ATP-sensitive K~+ channel blocker. There were two typesof K~+ currents: voltage-dependent delayed rectifier K~+ channel (Kv) and large conductance calcium-activated K~+ channel (BK_(Ca)) currents. 1 mmol/L 4-aminopyridine (4-AP, an inhibitor of Kv)caused a significant depolarization (from — 8.7±5.9mV to —25.4±3.1mV, n=18, P<0.001).In contrast, 1 mmol/L tetraethylammonium (TEA, an inhibitor of BK_(Ca)) had no significant effect onEm (from —37.6±4.8 mV to —36.8±4.1 mV, n=12, P>0.05). 4     

rIL-18对肺炎链球菌肺炎小鼠Th1/Th2免疫应答的影响

目的 研究重组白细胞介素18(rIL-18)对肺炎链球菌肺炎小鼠Th1/ Th2免疫应答的影响.方法 鼻腔接种肺炎链球菌建立小鼠肺炎链球菌肺炎模型,将Balb/c小鼠24只随机分为3组,分别为对照组,肺炎组和肺炎rIL-18干预组(n=8 ),RT-PCR法检测各组小鼠肺组织中IFN-γ、IL-4 mRNA 的表达,同时支气管肺泡灌洗液(BALB)进行活菌计数,有核细胞分类计数.结果 ①肺炎rIL-18干预组BA LF中性粒细胞和巨噬细胞计数显著高于肺炎组和对照组(P＜0.001);②肺炎rIL-18 干预组BALF活菌计数显著低于肺炎组(P＜0.001);③肺炎rIL-18干预组肺组织IFN- γ mRNA表达上调而IL-4 mRNA表达下调(P＜0.001).结论 在小鼠肺炎链球菌肺炎早期给予rIL-18可诱导IFN-γ的合成,促进Th1免疫应答,使Th1/ Th2免疫平衡向Th1免疫偏移、促进宿主对肺炎链球菌的防御.     

香烟烟雾提取物对哮喘大鼠气道平滑肌细胞蛋白激酶C活性的影响

目的：研究香烟烟雾提取物（CSE）对哮喘大鼠气道平滑肌细胞（ASMC）蛋白激酶C（PKC）活性的影响。 方法： 24只Wistar大鼠随机分为哮喘干预组（A组）、单纯哮喘组（B组）、对照干预组（C组）及对照组（D组），用5％ 浓度的CSE干预A、C两组ASMC，分别于干预0、1、2、3和6 h后，分离ASMC，提取胞浆及胞膜PKC，然后用［γ-32P］-ATP催化活性测定法检测PKC的活性。结果:（1）ASMC胞膜、胞浆PKC活性及两者比值：在1 h及2 h时，A组显著强于B、C、D组（均P<0.01）；B、C组显著强于D组（P<0.01，P<0.05）；B组与C组在1 h、2 h时均无显著差异。而B组与C组在1 h、2 h时差异均无显著(P＞0.05)。（2）组内ASMC胞膜、胞浆PKC活性比值：A、B、C 3组：1 h显著高于0 h、2 h（均P<0.01）；B组：2 h显著高于0 h（P<0.05）。 结论:CSE可能通过改变PKC的活性而进一步影响哮喘及其它呼吸系统疾病的发生、发展。     

川芎嗪对人外周血淋巴细胞蛋白激酶C通道的影响

目的:探讨川芎嗪(LTZ)对正常人外周血淋巴细胞(PBL)蛋白激酶C(PKC)通道在受到与哮喘有关的炎症介质刺激时所发生的功能变化是否有影响。方法:取63例健康人外周静脉血各10mL,分离PBL,分4批分别给予以下处理后,采用-ATP催化活性测定法检测细胞胞膜、胞浆及总PKC活性。(1)分3组即5g/LLTZ处理组(6例)、5μmol/LPKC阻断剂Ro31-8220处理组(6例)和对照组(6例,以下各批均以此组为阴性对照组);(2)共3组分别用100nmol/L乙酰甲胆碱(Mch,5例)、5g/LLTZ+100nmol/LMch(5例)或5μmol/LRo31-8220+100nmol/LMch(5例)处理。(3)共3组分别采用100nmol/L组胺、5g/LLTZ+100nmol/L组胺(5例)或5μmol/LRo31-8220+100nmol/L组胺(5例)处理。(4)共3组分别用100nmol/LPMA(5例)、5g/LLTZ+100nmol/LPMA(5例)或5μmol/LRo31-8220+100nmol/LPMA(5例)。结果(1)LTZ对正常人PBL胞膜、胞浆及总PKC活性均无明显影响;(2)乙酰甲胆碱及组胺均可促进正常人PBL胞膜PKC活性增加,LTZ对该作用有抑制效应(P<0.05)。(3)LTZ对PMA诱发正常人PBL胞膜PKC活性增加的效应有抑制作用(P<0.05)。结论:川芎嗪对正常人PBLPKC通道在受到与哮喘有关的炎症介质刺激时所发生的活化有一定的抑制作用,该作用可能是川芎嗪对哮喘疾病具有防治意义的机制之一。     

以PD20-PEF和PD20-FEV1作为气道反应性判定指标的比较分析

为探讨以PD20-PEF替代PD20-FEV1作为气道反应性判定指标的可行性,对64例有呼吸系统症状者和62例无症状者进行乙酰甲胆碱支气管激发试验,同步记录PEF和FEV1,计算PD20-PEF和PD20-FEV1。虽然PD20-PEF和PD20-FEV1之间有较强的直线相关关系(P<0.001),但两者之间有显著差异(P<0.005);若以PD20-FEV1作为金标准,在有症状组中以PD20-PEF作为气道反应性判定指标的敏感性(72.7%)、特异性(73.8%)、阳性符合率(59.3%)、阴性符合率(83.8%)均不甚高;在无症状组中敏感性(66.7%)和阳性符合率(40.0%)仍低,而特异性(89.2%)和阳性符合率(96.2%)较高。认为PD20-PEF作为无症状群体的流行病学筛选指标以除外气道反应性正常者可能具有一定价值,但替代PD20-FEV1作为气道反应性指标用于临床工作则欠妥当。     

Effects of theophylline on plasma levels of interleukin-4, cyclic nucleotides and pulmonary functions in patients with chronic obstructive pulmonary disease

Ｔｈｅｏｐｈｙｌｉｎｅｉｓｏｎｅｏｆｔｈｅｍｏｓｔｗｉｄｅｌｙｕｓｅｄｄｒｕｇｓｉｎｔｒｅａｔｉｎｇｃｈｒｏｎｉｃｏｂｓｔｒｕｃｔｉｖｅｐｕｌｍｏｎａｒｙｄｉｓｅａｓｅ（ＣＯＰＤ）．Ｈｏｗｅｖｅｒ,ｔｈｅｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌｔｈｅｏｒｙｔｈａｔｔｈ...     

钾通道阻滞剂对大鼠支气管平滑肌细胞增殖的影响

目的探讨电压依赖性延迟整流钾通道(K_V)、Ca²⁺激活钾通道(K_Ca)和ATP敏感性钾通道(K_ATP)对大鼠支气管平滑肌细胞(BSMC)增殖的影响。 方法应用免疫细胞化学、MTT微量比色分析法及流式细胞术,观察K_V,K_Ca和K_ATP对培养中大鼠BSMC增殖的影响。结果K_V阻断剂4-氨基吡啶(4-AP)显著促进大鼠BSMC增殖细胞核抗原的表达,提高BSMC吸光度值,使S+G₂M期细胞数显著增多,并显著提高基础状态下BSMC内Ca²⁺浓度,而K_Ca阻断剂四乙铵(TEA)和K_ATP阻断剂格列本脲(Glib)均无此效应。 结论大鼠BSMC K_V活性的抑制,可提高细胞内Ca²⁺浓度,促进细胞的增殖,而K_Ca和K_ATP对BSMC的增殖均无明显影响。     

硝普钠诱导体外哮喘大鼠支气管平滑肌细胞凋亡

目的观察一氧化氮(NO)供体硝普钠(SNP)是否诱导哮喘大鼠气道平滑肌细胞(ASMCs)凋亡。方法W istar大鼠10只,用卵白蛋白作为致敏原建立大鼠哮喘模型,分离出大鼠的气道平滑肌细胞,用SNP(NO的供体)干预,通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞生长率的变化,用原位末端标记法和流式细胞术检测SNP对哮喘大鼠气道平滑肌细胞细胞凋亡的影响。结果⑴MTT法测定:SNP 哮喘组的细胞抑制率明显高于哮喘组细胞存活率,(n=8,P<0.05),且呈浓度依赖关系。⑵TUNEL(原位末端标记)法检测:SNP 哮喘组的凋亡指数明显高于哮喘组,(n=4,P<0.05)。⑶流式细胞术测定SNP 哮喘组的平滑肌细胞凋亡率明显高于哮喘组,(n=4,P<0.05)。结论硝普钠能抑制哮喘大鼠气道平滑肌细胞的增殖,并且能诱导哮喘大鼠气道平滑肌细胞的凋亡,这种作用可能与治疗哮喘的气道重建有关。     

支气管哮喘模型大鼠气道重建的特征及机制

目的探讨哮喘大鼠气道重建的特征及蛋白激酶C（PKC—α）、核因子κB（NF-κB）在哮喘重建气道中的表达。方法延长卵清蛋白（OVA）激发时间制备慢性哮喘模型。36只Wistar大鼠分为6组：哮喘2、4、8周组和对照2、4、8周组，每组6只。用组织学结合图像分析系统观察各组大鼠气道炎性细胞浸润、胶原面积、平滑肌面积及杯状细胞数目等，免疫组化法观察PKC-α、NF-κB在气道的表达。结果①哮喘2、4、8周组气道壁均可见炎性细胞浸润、黏膜杯状细胞增多，与对照各组同时间点比较差异有显著性意义（P＜0．05）。哮喘4、8周组大气道胶原、平滑肌面积增多，与对照4、8周组比较差异有显著性意义（P＜0．05）。哮喘各组小气道胶原面积虽有增加，但无统计学意义，但哮喘8周组小气道平滑肌面积增加，与对照8周组比较差异有显著性意义（P＜0．05）。②哮喘各组气道上皮细胞PKC—α、NF-κB蛋白表达增加，与对照各组同时间点比较差异有显著性意义（P＜0．05）。结论通过延长OVA激发时间制备大鼠慢性哮喘模型，气道不仅存在慢性炎症，而且气道壁结构有改变，PKC—α、NF-κB可能参与哮喘的气道重建。     

热休克蛋白70抗体与慢性阻塞性肺疾病的关系

目的探讨热休克蛋白(HSP)70抗体与慢性阻塞性肺疾病(COPD)的关系。方法采用Western-ELISA方法检测了88例COPD与87例正常对照者血浆HSP70抗体,同时用免疫发光法检测血浆IgE的含量。结果在COPD与正常对照组中,HSP70抗体的阳性率分别为13.6%(12/88)和6.9%(6/87),两者之间差异无显著性意义(P>0.05);排除近1年使用过激素的COPD患者,未使用过激素的COPD患者HSP70抗体的阳性率为19.3%(11/57),与正常对照组之间差异有显著性意义(P<0.05)。另外,吸烟指数在HSP70抗体阳性和阴性两组之间分别为(768±485)和(798±493),差异无显著性意义(P>0.05);而IgE在两组分别为(252.8±458.7)和(73.9±131.5)U/ml,HSP70抗体阳性组明显高于HSP70抗体阴性组(P<0.05)。结论HSP70抗体可能在COPD的发病过程中起一定的作用,但尚需进一步研究并排除激素等干扰因素。