达芬奇机器人手术系统施行残胃癌切除术

达芬奇机器人手术系统行胃癌根治术的路径、方法逐渐成熟,但是残胃癌手术难度大,切除率低,目前未见使用达芬奇机器人手术系统行残胃癌切除术的报道。2012年11月第三军医大学西南医院采用达芬奇机器人手术系统成功实施1例残胃癌切除术,随访12个月,近期疗效较好。达芬奇机器人手术系统行残胃癌手术在视野显露、腹壁粘连松解、狭窄空间操作等方面具有优势,其机动灵活的操作、稳固持久的牵引是开腹手术和腹腔镜手术不可比拟的。     

腹腔镜胃癌根治术中助手协助术野暴露的原则与技巧

近年来,以腹腔镜为代表的微创外科在外科的各个领域呈现出蓬勃发展的良好势头。然而目前国内开展腹腔镜胃癌根治术的单位仍然较少,主要原因是腹腔镜胃癌根治术解剖层次较多,清扫淋巴结范围较广,需要默契的团队配合,尤其是良好的术野暴露在手术中起到十分关键的作用。既往文献关于助手如何协助术者暴露术野等报道较少。本研究回顾性分析2012年1月至2013年1月我中心收治的143例胃癌患者的临床资料,探讨腹腔镜胃癌根治术中助手协助术野暴露的原则与技巧。     

VEGF基因沉默抑制HCT116裸鼠移植瘤生长及血管生成的实验研究

目的 应用RNAi技术沉默血管内皮生长因子(vascular endothelial growthfactor,VEGF)基因,探讨其对人结肠癌细胞系HCT116裸鼠移植瘤生长及其血管生成的影响.方法 将自行构建的以VEGF基因为靶向表达短发夹状RNA的重组质粒(pAVU6 27-VEGF-siRNA)转染到结肠癌HCT116细胞株中(C组),以空质粒(pAVU6 27)转染为阴性对照(B组),经G418筛选出阳性克隆细胞,未转染质粒的HCT116细胞株为空白对照(A组),建立裸小鼠皮下移植瘤模型.通过测量移植瘤的质量、体积观察移植瘤生长;免疫组化检测瘤组织中VEGF蛋白表达及组织内的微血管密度(microvessel density,MVD)改变.结果 C组肿瘤瘤块的体积(0.169±0.009)cm3和质量(0.192±0.022)g明显小于A、B组(P＜0.05).A、B组荷瘤组织中VEGF均表达强阳性,表达位于肿瘤细胞的细胞质及细胞膜上,呈棕黄色.C组荷瘤组织中VEGF呈弱阳性表达,组间差异显著(P＜0.05).C组荷瘤组织中MVD明显小于两对照组,组间差异显著(P＜0.05).VEGF表达与MVD呈显著正相关(r=0.810,P＜0.01).结论 应用RNAi技术沉默VEGF基因能明显抑制人结肠癌细胞系HCT116裸小鼠移植瘤的生长,其机制与其抑制移植瘤中VEGF的表达和瘤组织内血管生成有关.     

模拟CO2气腹对人胃癌MKN-45细胞增殖和细胞周期的影响

目的 通过建立体外模拟CO2气腹环境，研究CO2气腹对人胃癌MKN-45细胞增殖和细胞周期的影响。方法 建立体外模拟CO2的气腹环境，在全自动气腹机作用下维持密闭培养箱内压力为12mmHg，作用时间4h。处理后用MTT法检测细胞增殖情况；通过流式细胞仪观察细胞周期变化。结果 MTT法检测细胞增殖结果显示，气腹组人胃癌MKN-45细胞的增殖速度与对照组比较无显著性差异（P〉0．05）；流式细胞仪检测人胃癌MKN-45细胞周期，CO2气腹组增殖指数与对照组比较无显著性差异（P〉0．05）。结论 体外模拟持续12mmHg CO2气腹环境，连续对人胃癌MNK-45细胞作用4h，不会促进胃癌细胞的增殖和生长。     

急性肠系膜血管阻断11例

急性肠系膜血管阻断是误诊率和病死率极高的急腹症，近年发病呈逐渐上升趋势。现将我院收治的11例结合献报告如下。     

Comparison of peritoneal free gastric cancer cells＇ detecting rates between laparoscopically assisted and open radical gastrectomy

Objective： To compare laparoscopic gastrectomy and conventional surgery on the dissemination and seeding of tumor cells. Methods：Intraoperative peritoneal lavage cytologic examination was performed in 65 patients with gastric cancer, during laparoscopic gastrectomy （n = 34） and conventional surgery （n = 31）. Cytology was examined twice, immediately after opening the peritoneal cavity and just before closing the abdomen. Saline was poured into the peritoneal cavity, and 100 ml fluid was retrieved after irrigation. Laparoscopic instruments were lavaged after surgery with 100 ml saline. Carbon dioxide （COz） was derived through the trocar side orifice after pneumoperitoneum during laparoscopic gastrectomy and filtered through 100 ml saline. Cytologic examination of the filtrate was performed after the filtration process. Results： The incidence of positive cytology during laparoscopic surgery was 32.26% in the preoperative lavage and 22.58% in the postoperative lavage. The incidence of positive cytology during conventional surgery was 41.18% before lavage and 26.47% after lavage. Only one positive cytology was detected in the CO2 filtrate gas. The incidence of positive cytology in the lavage of the instruments during laparoscopic surgery was 6.45 %. Conclusion： During gastric laparoscopic surgery, CO2 pneumoperitoneum does not affect tumor cell dissemination and seeding. In this study, laparoscopic techniques used in gastric cancer surgery were not associated with a higher risk for intraperitoneal dissemination of cancer cells than the conventional surgery.     

CO2气腹对胃癌细胞腹腔种植转移影响的动物实验研究

目的比较不同压力CO2气腹处理的人胃癌MKN-45细胞在裸鼠腹腔内的成瘤数量、重量及裸鼠生存时间，探讨CO2气腹对胃癌细胞侵袭转移能力的影响。方法实验分为4组（对照组和5、10、15mmHg CO2气腹组），即将胃癌细胞在5％CO2 37℃条件下或5、10、15mmHg100％CO2 37℃条件下培养4h，然后收集细胞并将2×10^5个细胞注射入裸鼠腹腔，建立胃癌腹腔转移动物模型。4周后处死裸鼠，观察其腹腔成瘤率、成瘤数量和重量以及裸鼠生存时间。结果各组裸鼠腹腔成瘤数量、肿瘤总重量和生存时间均无显著差异（P〉0．05）。结论在气腹压力≤15mmHg时CO2对胃癌MKN-45细胞在裸鼠腹腔内的种植转移无显著影响。     

超声空化效应对肿瘤细胞迁移运动影响的实验研究

目的 探讨高机械指数的超声造影空化效应对肿瘤细胞迁移运动的影响.方法 体外培养结肠癌细胞株(Lovo细胞).分为对照组、微泡 超声组、单纯超声辐照组和单纯微泡组.使用超声造影剂SonoVue,超声探头频率1.5MHz,机械指数1.7进行超声间歇辐照,采用Millicell-PCF培养小室法,观察超声造影空化效应对肿瘤细胞迁移运动的影响.结果 对照组、单纯辐照组及单纯微泡组之间的迁移能力无明显差异(P>0.05),而微泡 超声组与对照组之间比较,肿瘤细胞的迁移能力明显低于对照组(P<0.01).结论 高机械指数超声造影增强超声的空化效应,对肿瘤细胞的迁移能力有明显抑制作用.     

Stat3靶向RNA干扰重组体的构建及鉴定

目的设计针对Stat3的发夹样RNA干扰重组体，通过脂质体转染结肠癌细胞HCT116观察其干扰效果，为探索肿瘤基因治疗的新途径奠定基础。方法设计针对Stat3编码区的有短发夹结构的两条DNA序列，经退火成互补双链，克隆到载体Pavu6＋27中构建重组体Pavu6＋27-Stat3，再对重组质粒进行酶切鉴定、DNA测序分析。脂质体法转染重组体至大肠癌HCT116细胞株中，以空质粒（Pavu6＋27）转染为对照；RT-PCR法观察Stat3基因表达改变。结果酶切鉴定和测序分析均提示Stat3靶向RNA干扰重组体的构建成功，Pavu6＋27-Stat3转染后HCT116细胞Stat3基因表达较空载体Pavu6＋27转染的对照组显著下降。结论Stat3靶向RNA干扰重组体成功构建，并能有效抑制HCT116细胞中Stat3基因表达。本实验为下一步利用RNAi技术沉默肿瘤细胞中Stat3基因的表达，诱导肿瘤细胞凋亡或抑制其增生，为探索肿瘤基因治疗的新途径打下基础。