成人脂肪间充质干细胞体外定向诱导分化为心肌样细胞的实验观察

目的:探索成人脂肪组织来源的间充质干细胞(ADMSCs)体外分离、培养方法,并化学诱导使其向心肌细胞分化,为心肌再生医学提供理想的种子细胞来源. 方法:体外分离成人ADMSCs并进行传代培养,5-氮胞苷(5-aza)诱导其向心肌细胞分化. 分别于诱导后14,21,28 d时用免疫细胞化学染色、RT-PCR法进行心肌细胞鉴定. 结果:ADMSCs经5-aza诱导后14 d时细胞形态趋向于心肌细胞,诱导28 d免疫细胞化学显示心肌特异性肌钙蛋白I(cTN-I)、结蛋白(Desmin)表达阳性,RT-PCR检测心肌β-肌球蛋白重链(Cardiac β-MHC)基因表达阳性. 结论:成人脂肪组织存在丰富的间充质干细胞且易于分离扩增,体外5-aza诱导可使其向心肌细胞分化,可做为心肌再生医学的理想种子细胞.     

血清S100B水平升高与慢性心力衰竭患者临床严重程度、肾功能受损及心血管主要终点事件的关系

目的探讨血清S100B水平在慢性心力衰竭(CHF)患者临床严重程度、肾功能受损及心血管主要终点事件(MCE)中的应用价值。方法选择242例确诊为缺血性心肌病的住院患者作为研究对象,根据患者是否与肾功能不全(RI)组合,将患者分为CHF-RI组(n=96)和CHF-非RI组(n=146)。另外,64例健康受试者为正常对照组及62例单纯RI患者为RI组。收集血液样本,受试者均接受了包括总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、糖化血红蛋白(HbA1c)、血尿素氮、肌酐和尿酸等实验室检查。受试者均接受超声心动图检查。比较血清S100B水平与心功能、肾功能、MCE的关系。通过多因素Logistic回归分析确定心力衰竭危险因素。结果CHF患者血清S100B水平与左室射血分数(LVEF)呈负相关(r=-0.248,P=0.016),与左心室舒张末期容积(LVEDV,r=0.213,P=0.047)和N-末端脑利钠肽前体(NT-proBNP,r=0.233,P=0.039)呈正相关。MCE患者血清S100B水平显著高于无MCE患者(P=0.021)。多因素Logistic回归分析S100B、NT-proBNP、肿瘤坏死因子(TNF)-α和尿酸与CHF风险独立相关(P<0.05)。Cox比例风险分析显示血清S100B水平与MCE发生率显著相关(RR=1.738;95%CI:1.054~2.865;P=0.030)。结论血清S100B水平升高与CHF患者的心功能不全、RI严重程度和MCE相关,并且是CHF发展的独立预测因子和MCE的危险因素。     

缬沙坦对慢性心力衰竭患者血浆脑钠素水平及左室收缩功能疗效的研究

目的 探讨慢性心力衰竭(CHF)患者在常规治疗基础上加用缬沙坦治疗12周后脑钠素(BNP)水平的变化及心功能的疗效.方法 应用化学发光法测定52例CHF患者治疗前、后和18例对照组血浆BNP浓度:用多普勒超声心动图测定CHF组左室舒张末期内径(LVEDD)及左室射血分数(LVEF).结果 CHF患者血浆BNP水平(456±253)Pg/mL较对照组(28±6)pg/mL明显增高(P＜0.01);不同心功能患者血浆BNP水平差异亦有显著意义,依次为Ⅳ级＞Ⅲ级＞Ⅱ级(P＜0.01),CHF组BNP水平升高与心力衰竭程度呈正相关(r=0.672,P＜0.01).缬沙坦治疗后血浆BNP水平明显下降,与治疗前比较差异有非常显著性(P＜0.01).LVEF有所提高,LVEDD明显缩小与治疗前比较均差异有显著性(P＜0.05).结论 血浆BNP水平可以反映心力衰竭严重程度、作为治疗心力衰竭的一个可靠观察指标.缬沙坦能显著降低脑钠素水平,改善心功能.在心力衰竭的治疗中起着重要作用.     

5-氮胞苷体外诱导成人脂肪间充质干细胞分化为心肌样细胞的初步研究

目的:探索不同浓度5-氮胞苷(5-aza)在不同诱导时间下对成人脂肪间充质干细胞(ADMSCs)分化为心肌细胞的诱导作用,确定最佳诱导条件。方法:体外分离成人脂肪组织来源的间充质干细胞并进行传代培养,流式细胞仪鉴定细胞CD44、CD34的表达,用含不同浓度5-aza(3、5、10、15、20μmol／L)培养基分别诱导12小时、24小时、48小时、72小时,倒置相差显微镜下逐日观察细胞形态变化;于诱导后14、28天时免疫细胞化学染色鉴定心肌特异性肌钙蛋白I(cTn-I)的表达,分析细胞转化率。结果:分离培养的ADMSCs表达CD44,不表达CD34;5-aza诱导后14天时免疫细胞化学未见有心肌细胞特异性cTn- I表达,诱导28天细胞免疫细胞化学显示cTn-I表达阳性,以10μmol/L 5-aza诱导24小时为最佳体外诱导条件。结论:成人脂肪组织间充质干细胞可在体外5-aza诱导下向心肌细胞分化。     

FHL2通过SK-1/S1P通路改善高糖诱导内皮细胞功能障碍的机制研究

目的 探讨四个半LIM结构域蛋白2(FHL2)对高糖引起内皮细胞功能障碍的影响及其作用机制。方法 采用MTT检测含不同浓度葡萄糖培养基培养下的人脐静脉内皮细胞（HUVECs）的细胞活力。将HUVECs分为对照组（5 mmol/L葡萄糖）、高糖组（30 mmol/L葡萄糖）、siNC组（30 mmol/L葡萄糖+siNC）和siFHL2组（30 mmol/L葡萄糖+siFHL2）。利用Western blot检测对照组和高糖组的HUVECs中FHL2蛋白表达水平。采用实时定量PCR法检测转染siFHL2后FHL2的表达水平。运用Annexin V-FITC/PI双染检测各组细胞凋亡情况。利用Western blot检测凋亡相关蛋白FHL2、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、cleaved caspase 3表达水平。采用成管实验检测各组HUVECs的成管能力。利用Western blot检测各组SK-1/1-磷酸鞘氨醇（SK-1/S1P）通路中的蛋白表达水平，酶联免疫吸附（ELISA）检测S1P表达水平变化。结果 与对照组相比，高糖组HUVECs内FHL2表...     

血浆脑钠素与不稳定型心绞痛危险度分层的关系及临床意义

目的 探讨不稳定性心绞痛(UAP)患者临床危险度分层与血浆脑钠素(BNP)的关系及临床意义.方法 应用化学发光法对35例心功能正常的UAP患者(UAP组)进行血浆BNP水平检测(其中,低危组15例,中危组12例,高危组8例),并与30名健康人作比较.结果 UAP组较健康对照组血浆BNP水平明显增高(P<0.01).血浆BNP水平在UAP组各亚组之间差异有显著性(P<0.01),BNP水平随着危险度级别的增高而增加,各级之间差异有显著性(P<0.01).结论 心功能正常的UAP患者血浆BNP水平增高,BNP水平与心绞痛临床危险度分层有关,危险度级别越高,BNP水平越高.     

体外定向化学诱导成人脂肪源性间充质干细胞分化为心肌样细胞

目的：研究在体外不同浓度、不同作用时间诱导条件下5-氮胞苷（5-aza）对脂肪间充质干细胞（ADMSCs）诱导分化为心肌细胞的影响。方法：酶消化筛选法体外分离ADMSCs并传代培养，流式细胞仪鉴定细胞CD44、CD34的表达，不同浓度5-aza（1、5、10、15、20μmol／L）分别诱导12、24、48、72h，相差显微镜下观察细胞形态变化；诱导后4周时免疫细胞化学鉴定心肌特异性肌钙蛋白Ⅰ（cTn—Ⅰ）的表达，分析细胞转化率。结果：体外分离培养的ADMSCs表达CD44，不表达CD34；5-aza诱导后4周时免疫细胞化学显示cTn—Ⅰ表达阳性，以10μmol／L5-aza诱导24h为适宜诱导条件；结论：体外5-aza化学诱导下成人脂肪组织间充质干细胞具有向心肌细胞分化的潜能。     

刺囊酸对异丙肾上腺素诱导大鼠心肌缺血损伤的影响

目的：观察刺囊酸对异丙肾上腺素（ISO）诱导大鼠心肌缺血损伤的影响。方法：将30只健康雄性sD大鼠随机等分为对照组（S）、异丙肾组（I）、刺囊酸＋异丙。肾（E）组,并造模给药。给ISO后24h,麻醉处死动物。测定血清肌酸激酶（CK）、乳酸脱氢酶（LDH）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）表达。HE染色后在光镜下观察心肌组织形态学改变。结果：和I组比较,E组血清中LDH、CK和MDA含量明显降低（P〈0．01）,SOD的活力明显升高（P〈0．01）。E组大鼠心肌病变的程度较I组减轻较明显。结论：刺囊酸对ISO诱导大鼠缺血损伤的心肌具有一定的保护作用。     

阿卡波糖对冠心病合并糖耐量减低患者血清脂联素和瘦素水平的影响

目的探讨冠心病合并糖耐量减低患者的血清脂联素(Adiponectin)和瘦素(Leptin)水平及阿卡波糖的干预效果。方法根据口服葡萄糖耐量试验(OGTT),将46例冠心病患者分为冠心病合并IGT组(CHD并IGT组)(n=19)和单纯冠心病组(单纯CHD组)(n=27),33例体检者分为单纯IGT组(n=15)和正常对照组(n=18)。采用酶联免疫吸附法检测受试者血清脂联素和瘦素水平,同时测定OGTT空腹血糖(FBG)和餐后2小时血糖(2hFBG)、空腹胰岛素(Fins)、血脂及超敏C反应蛋白(hs-CRP),并测量身高、体重、腰围,计算体重指数(BMI)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。对于冠心病合并IGT组和单纯IGT组均给予阿卡波糖干预3个月后复测上述指标。结果冠心病患者的血清脂联素水平下降,合并IGT时进一步降低,血清脂联素水平与HOMA-IR、HDL-C、SBP及性别相关。IGT患者的血清瘦素水平升高,血清瘦素水平与BMI、腰围相关,女性显著高于男性。血清脂联素和瘦素水平无相关性。经阿卡波糖干预后,BMI、腰围、2hPBG、TC、TG、LDL-C、HOMA-IR水平均下降。血清脂联素水平显著升高,升高的水平与TC的变化相关;血清瘦素水平降低,女性降低水平高于男性。结论阿卡波糖可能通过影响冠心病合并IGT患者血清脂联素和瘦素水平来改善肥胖、餐后高血糖、胰岛素抵抗及血脂紊乱等,进而起到心血管保护作用。     

经桡动脉途径冠心病介入治疗的安全性与有效性分析

目的:评价冠心痛患者经桡动脉途径冠状动脉介入治疗(PCI)的安全性和有效性.方法:选择我院261例行PCI治疗的冠心痛患者,按动脉穿刺途径随机分为经桡动脉入径组（139例）和经股动脉入径组(122例),对比分析两组间穿刺成功率与PCI成功率、手术操作时间及X线曝光时间、术中置入支架数、造影剂用量、局部及全身并发症发生情...