包裹左旋多巴/苄丝肼PLGA微球通过Tau蛋白/△FosB信号通路治疗异动症大鼠的实验研究

目的 探讨可缓释包裹左旋多巴/苄丝肼微球对异动症大鼠的治疗作用及其机制.方法 通过注射6-羟基多巴胺(6-OHDA)制作帕金森病(Parkinson disease,PD)大鼠模型,制模成功的PD大鼠模型接受左旋多巴(25mg/kg)/苄丝肼(12.5mg/kg)腹腔注射21 d制作异动症大鼠模型.将异动症大鼠分成普通剂型组(n=13)和微球组(n=13)两组.普通剂型组给予普通剂型左旋多巴/苄丝肼皮下注射(按体质量左旋多巴12 mg/kg、苄丝肼15mg/kg),微球组给予等剂量包裹左旋多巴/苄丝肼微球皮下注射.分别于治疗第1、5、10、15和第20天,在大鼠腹腔注射阿扑吗啡后计数其旋转圈数,并于治疗3周后对大鼠进行异常不自主运动(AIM)评分(包括上肢、口面部和轴性3部分).另设PD组和假手术组大鼠各13只.以Western Blot检测大鼠纹状体区△FosB、Tau蛋白和磷酸化Tau蛋白水平,免疫组织化学法测定大鼠纹状体区磷酸化Tau蛋白阳性细胞水平.结果 普通剂型组大鼠在治疗后的第1、5、10、15和20天阿扑吗啡诱导的旋转圈数分别为221±34.4、180±25.4、123±17.3、91±13.1、84±10.7,微球组大鼠的旋转圈数分别为223±35.1、172±26.8、131±18.7、97±14.9、82±10.5,两组各时点分别比较差异均无统计学意义(P＞0.05).微球组大鼠轴性AIM、上肢AIM、口面AIM评分分别为6.5±0.9、4.1±0.5、5.8±0.7,均低于普通剂型组大鼠(分别为10.3±1.9、6.3±0.9、8.2±1.2)(均P＜0.05).Western blot结果显示,普通剂型组大鼠纹状体△FosB水平[(620.7±48.3)％]高于PD组[(290.2±31.5％)](t=2.11,P＜0.05),但低于微球组[(320.5±32.8)％](t=4.56,P＜0.01).普通剂型组纹状体区磷酸化Tau蛋白水平[(340.4±27.1)％]高于PD组[(130.4±21.5)％](t=2.67,P＜0.05),微球组[(134.6±14.1)％]低于普通剂型组(t=4.13,P＜0.01).免疫组化结果示,普通剂型组大鼠纹状体区磷酸化Tau蛋白阳性细胞指数为(14.6±2.3)×104,高于PD组[(6.9±1.1)×104](t=3.98,P＜0.01),微球组[(7.2±1.1)×104]明显低于普通剂型组(t=3.76,P＜0.01).结论 微球治疗减轻了异动症大鼠的症状,其原因可能是由于可缓释包裹左旋多巴/苄丝肼微球通过影响Tau蛋白/△FosB信号通路的活性,进而改善了异动症大鼠的症状.     

帕金森病患者血清人软骨糖蛋白39水平的改变及其与病情和认知功能的相关性

目的探讨帕金森病(PD)患者血清人软骨糖蛋白39(YKL-40)水平的改变及其与病情和认知功能的相关性。方法用ELISA法给63例PD患者和60名正常对照者进行血清YKL-40水平检测,以及蒙特利尔认知评估(Mo CA)量表评分。并给PD患者进行统一PD评定量表(UPDRS)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ评分,评定病情。对PD患者的血清YKL-40水平与UPDRSⅠ、Ⅱ、Ⅲ评分、病程及Mo CA量表进行相关性分析。结果 PD组的血清YKL-40水平[(3.717±0.1015)ng/ml]明显高于正常对照组[(2.919±0.1827)ng/ml](P0.001)。PD患者的血清YKL-40水平与UPDRSⅠ无相关性(r=0.21,P0.05),与UPDRSⅡ、Ⅲ评分呈正相关(r=0.9251,r=0.7767;均P0.0001),与PD患者的病程亦呈正相关(r=0.4323,P0.01),与Mo CA量表评分呈负相关(r=-0.6985,P0.0001)。结论 PD患者的血清YKL-40水平显著增高,并与病情和认知功能密切相关。YKL-40可成为PD诊断和病情判断的生物学指标。     

基层医院静脉留置针应用滞后原因分析与对策

静脉留置针又称套管针，作为头皮针的换代产品，具有减少血管穿刺次数，减少液体外渗，对血管的刺激性小，有利于用药和紧急抢救，减轻护士工作量等优点。目前，我国许多医院都将静脉留置针作为临床输液治疗的主要工具，成为一项普遍的护理操作技术。但是在我国广大的基层医院，静脉留置针的应用还处于十分落后的局面，有的基层乡村医院，甚至从来没有用过静脉留置针，更甚者不知道其为何物，其应用处于相当原始落伍的状态。现分析总结如下。     

人羊膜上皮细胞移植在神经系统疾病中的应用

1人羊膜上皮细胞的神经生物学特征 1．1人羊膜上皮细胞的干细胞性质与分 化羊膜是由最终发育成胎儿的内细胞团在开始分化成其它组织器官之前首先分化出来的一层薄膜组织。它是包绕胎儿的两层膜的内层,来源于形成肠管之前的外胚层,人羊膜上皮细胞是克隆原细胞,原始的人羊膜上皮细胞经培养有分化成3个胚层细胞的潜能,例如：内胚层的肝细胞,胰腺细胞,中胚层的心肌细胞,外胚层的神经细胞,在一定的培养条件下,人羊膜上皮细胞可以形成球形结构,     

人羊膜上皮细胞侧脑室移植对帕金森病大鼠模型行为、多巴胺能神经元、神经递质影响的实验研究

目的 观察人羊膜上皮细胞(HAECs)移植入帕金森病(PD)大鼠模型侧脑室后的存活及分化情况,及其对PD大鼠模型旋转行为、纹状体区多巴胺及其代谢产物的影响.方法 采用6-羟多巴立体定向脑内注射制作PD大鼠模型,将制模成功大鼠随机分成3组:人羊膜上皮细胞移植组(HAECs组)、磷酸缓冲组(PBS组)和帕金森组(PD组),1w后腹腔注射阿朴吗啡观察各组大鼠旋转行为的变化,连续观察10w,HAECs组5w后用人特异性抗体Nestin和Vimentin检测人羊膜细胞的存活情况,10w后酪氨酸羟化酶(TH)染色观察各组PD大鼠模型黑质部TH阳性神经元的变化情况及HAECs的分化情况,高效液相色谱--电化学仪测定纹状体多巴胺(DA)、高香草酸(HVA)、3,4-二羟基苯乙酸(DOPAC)等神经递质的水平.结果 HAECs在PD大鼠侧脑室内移植可以长期存活达10w,并且可以分化为DA能神经元,HAECs组大鼠旋转数较PBS组及PD组明显降低(P<0.01),黑质部TH阳性神经元数量较PD组及PBS组升高(P<0.01),HAECs组大鼠纹状体区DA及其代谢产物DOPAC、HVA含量较PBS组明显升高(P<0.05).结论 人羊膜上皮细胞移植入PD大鼠侧脑室可以改善PD大鼠的旋转行为,其机制可能与增加纹状体区DA等神经递质有关.     

帕金森病患者血清脂联素水平与运动症状及非运动症状的相关性

目的 探讨帕金森病(PD)患者血清脂联素水平与运动症状以及非运动症状的相关性.方法 选取94例PD患者以及90名健康对照者,利用ELISA法检测PD患者及健康对照者血清脂联素水平,并记录PD患者的年龄、多巴丝肼片剂量,并对所有PD患者行帕金森病评价量表第三部分评分(UPDRSⅢ)、Hoehn-Yahr分期、ADL、Webster、疲劳严重度量表(FSS)、匹茨堡睡眠质量指数(PSQI)、自主神经功能量表(SCOPA-AUT)、汉密尔顿抑郁量表(HAMD)评估.结果 PD患者血清脂联素水平为(8.2士2.6)mg/L,明显低于健康对照组的(17.5±7.1)mg/L,且差异有统计学意义(t=-4.12,P＜0.01).脂联素水平与PD患者的UPDRSⅢ评分、H-Y分期、Webster评分、ADL评分及PSQI评分均呈负相关(r分别为-0.71,-0.82,-0.77,-0.64,-0.69;P＜ 0.05).结论 PD患者血清脂联素水平降低,且与PD患者的运动症状及非运动症状均有关.     

急性脑梗死脑水肿与扩大的血管周围间隙 相关性研究

目的 探讨血管周围间隙扩大（EPVS）及其严重程度与急性缺血性脑梗死患者产生脑水肿 （CED）严重程度的相关性。方法 回顾性分析 2015 年 8 月至 2020 年 10 月徐州医科大学附属医院收治的 发病 24 h 内就诊的急性脑梗死患者的临床资料。通过患者入院后的头颅影像学检查资料，评估患者脑 梗死 CED 程度及 EPVS 等级。将患者分为有水肿组与无水肿组，研究患者 EPVS 与 CED 之间存在的关联 性。进一步将患者 CED 程度分为 CED1、2、3 三组，EPVS 分为轻、中、重三组，分析影响 CED 严重程度的 因素及之间的关系。结果 共纳入急性脑梗死患者342例，男性216例，女性126例，年龄（66.47±12.10）岁。 有水肿组的心房颤动比例、NIHSS 评分、脑白质高信号、EPVS 等级均明显高于无水肿组，差异有统计学 意义（P＜ 0.05）。多因素 Logistic 回归分析表明，NIHSS 评分、EPVS 中重度与发生水肿呈正相关（β=0.067、 0.916，P=0.013、0.003），即水肿发生风险增加（OR=1.069、2.500）是其独立危险因素。根据患者不同程度 水肿分组的单因素及多因素 Logistics 回归分析结果表明，EPVS 程度是导致中、重度水肿的独立危险因 素（P＜ 0.05），且随着 EPVS 程度的加重，发生水肿风险增加（中度水肿组OR=4.692、5.100，P=0.015、0.026； 重度水肿组OR=9.432、13.099，P=0.008、0.009）。结论 EPVS 是患者发生 CED 的独立危险因素，EPVS 可能是急性脑梗死患者发生 CED 的影像预测标志。     

CaMK Ⅱ在跑步机训练改善帕金森病模型小鼠记忆功能中的作用

目的 研究钙离子/ 钙调蛋白激酶Ⅱ（CaMK Ⅱ）在跑步机训练改善帕金森病（PD）模型小鼠 记忆功能中的分子机制，为PD的治疗提供一个新的思路。方法 将6-羟基多巴胺立体定向注射至小 鼠左侧纹状体内制备偏侧PD小鼠模型，利用圆柱体实验筛选PD 模型。将造模成功的PD小鼠（n=32）随 机分为PD 非跑步机训练组（PD+no-Ex 组，n=8）、低速跑步机训练组（PD+Low-Ex，n=8）、中速跑步机训练 组（PD+Medium-Ex，n=8）和高速跑步机训练组（PD+High-Ex，n=8），并设Sham 组（n=8，在相同部位注射 生理盐水）作为对照。利用Morris水迷宫实验观察各组小鼠的学习记忆能力，并对其行为学结果进行分 析评价，选取Sham组、PD+no-Ex 组及PD+Low-Ex 组海马组织，利用Western blot 检测小鼠海马中环磷腺 苷效应元件结合蛋白（CREB）、酪氨酸羟化酶（TH）、细胞外信号调节蛋白激酶1/2（ERK1/2）和CaMK Ⅱ的 磷酸化水平。结果 Morris水迷宫定位航行实验结果表明各组小鼠的平均逃避潜伏期随着训练时间的 延长呈逐渐下降趋势，低中高速跑步机训练都有利于PD 小鼠记忆功能的恢复（P＜ 0.05），但低速跑步机 训练组小鼠改善得更明显（P＜ 0.05）。空间探索实验结果则表明，与Sham组比较，PD+no-Ex 组小鼠穿 越平台次数明显减少，差异有统计学意义（P＜ 0.05）；与PD+no-Ex 组比较，不同速度跑步机训练组小鼠 穿越平台次数明显增加，差异有统计学意义（P＜ 0.05）。Western blot 结果显示，与Sham 组比较，PD+no- Ex 组磷酸化CREB、ERK1/2、CaMK Ⅱ及TH水平明显降低，差异均有统计学意义（P ＜ 0.05）；与PD+no- Ex 组比较，PD+Low-Ex 组上述指标明显升高，差异均有统计学意义（P＜ 0.01）。结论 低速跑步机训练 对PD 模型小鼠学习记忆能力的改善作用更显著，其可能是通过上调海马中蛋白激酶A（PKA）介导的信 号转导通路，从而改善PD小鼠的认知功能。     

帕金森病相关性疼痛的相关因素及其对生活质量的影响

目的探讨帕金森病(PD)相关性疼痛的相关因素及其对生活质量的影响。方法根据是否伴有疼痛将120例PD患者分为疼痛组(49例)和非疼痛组(71例)。采用PD统一评分量表(UPDRS)和Hoehn-Yahr(H-Y)分级评估患者的严重程度,采用PD生活质量量表-39(PDQ-39)测评其生活质量,用数字评分法(NRS)评估疼痛组患者疼痛程度。采用汉密尔顿抑郁量表(HAMD)、汉密尔顿焦虑量表(HAMA)和MMSE评价患者的焦虑、抑郁及认知情况。结果与无疼痛组比较,疼痛组H-Y分期及UPDRSⅠ、UPDRSⅢ服药后(med-on)、UPDRSⅢ服药前(med-off)、PDQ-39、HAMA、HAMD评分均显著升高(P0.05～0.01)。Spearman相关分析显示,NRS评分与H-Y分级及UPDRSⅠ、UPDRSⅢmed-off、UPDRSⅢmed-on、PDQ-39、HAMA、HAMD评分呈正相关(P0.05～0.01),与年龄、发病年龄、病程、受教育年限及UPDRSⅡ、MMSE评分无相关性(均P0.05)。线性回归分析显示,UPDRSⅡ、HAMA、NRS评分对PDQ-39有显著性影响(均P0.01)。结论 PD相关性疼痛可能与精神活动、运动症状、焦虑抑郁相关。PD相关性疼痛是影响PD患者生活质量的独立预测因子。     

帕金森病运动并发症发生机制中G蛋白偶联受体激酶6与N-甲基-D-天冬氨酸受体关系的研究

Objective To investigate the relationship between G protein-coupled receptor kinase 6 (GRK6) and N-methyl-D-aspartate (NMDA) receptor in the mechanism study underlying motor complications in Parkinson's disease (PD).Methods The rat models (n= 25) of Parkinsonism related motor complications were established and were randomly divided into levodopa-induced dyskinesia (LID) group (n= 10,intraperitoneal injection of levodopa for 23 d),MK-801 treatment group (n= 10,intraperitoneal injection of MK-801 at day23 after intraperitoneal injection with levodopa for 22 days) and PD group (n= 5,intraperitoneal injection of vitamin C).Another 5 rats were served as controls (sham-operation group).The behavior changes of rats in MK-801 treatment group were observed,and the expression of GRK6 in the striate of rats was detected by immunohistochemistry and Western blot.Results After the chronic treatment with levodopa methyl ester,PD rats displayed abnormal involuntary movements,which was similar to levodopainduced dyskinesia in PD patients.Immunohistochemistry showed that GRK6-positive cells of lesion side were decreased in LID rats as compared with PD rats [(3.23±0.41 ) × 103 vs.(4.81 ± 1.31 ) ×103,P＜0.01].Rats in MK-801 treatment group displayed the decreased AIM scores and increased peak rotation,and the increased GRK6-positive cells of lesion side as compared with LID rats (P＜0.05).Western blot showed that the levels of GRK6 was 83.7% ±2.1% in PD group (presented as lesion side/unlesion side),76.8% ± 2.2% in LID group and 91.1% ± 2.7% in MK-801 treatment group (intergroups comparison:all P＜0.05).These results were in accordance with the results of immunohistochemistry.Conclusions Antagonist of NMDA receptor can be used to reduce the motor complications in rats.It may be due to increased GRK6 which inhibits the overactivation of glutamic acid receptors.