应用基因芯片直接检测结核病患者各类标本中利福平和异烟肼耐药的价值

目的 研究结核分枝杆菌(MTB)耐药基因芯片直接检测结核病患者临床标本中利福平和异烟肼耐药相关基因的临床价值。方法 回顾性分析125例通过硝基苯甲酸(PNB)和噻吩-2-羧酸肼(TCH)鉴别培养为MTB的临床标本,其中痰标本90例、支气管灌洗液12例、脓液12例、胸腔积液6例、组织标本3例、腹腔积液和尿液标本各1例,应用绝对浓度法同时进行利福平(RFP)和异烟肼(INH)药物敏感性试验(简称“绝对浓度法药敏试验”),并用基因芯片直接检测临床标本中MTB rpoB、katG和inhA基因型。以绝对浓度法药敏试验为标准,评价基因芯片检测RFP、INH耐药和耐多药(MDR)的敏感度和特异度,并且比较两种检测结果的一致性。结果 在125例结核病患者临床标本中,绝对浓度法药敏试验显示对RFP、INH的耐药率和MDR发生率分别为20.0%(25/125)[其中高耐占88.0%(22/25)、低耐占12.0%(3/25)]、17.6%(22/125)[其中高耐占18.2%(4/22)、低耐占81.8%(18/22)]、16.8%(21/125)。初治和复治结核病患者临床标本中MDR-MTB的检出率分别为7.6%(7/92)和39.4%(13/33)。以绝对浓度法药敏试验为标准,应用基因芯片直接检测临床标本中MTB rpoB、katG和inhA基因型,预示对RFP、INH耐药和MDR的敏感度分别为72.0%(18/25)、63.6%(14/22)和61.9%(13/21),特异度分别为91.0%(91/100)、86.4%(89/103)和89.4%(93/104),两种方法的一致率分别为87.2%(109/125)、82.4%(103/125)和84.8%(106/125)。 结论 应用耐药基因芯片直接检测结核病患者临床标本中MTB对 RFP和INH耐药的相关基因突变具有中等的敏感度和较高的特异度,可快速检出对RFP、INH耐药和MDR-TB患者,为临床早期开展有效化疗提供实验依据。     

肺结核并发糖尿病患者临床特征及淋巴细胞亚群检测结果分析

目的 探讨肺结核并发糖尿病(pulmonary tuberculosis complicated with diabetes mellitus, PTB-DM)患者临床特征及淋巴细胞亚群特点。方法 回顾性收集2018年4月1日至2019年5月31日在解放军总医院第八医学中心结核二科住院的符合纳入标准的肺结核患者。根据是否并发糖尿病将其分为两组:PTB-DM组85例,单纯肺结核组(PTB组)96例。对两组患者临床特征包括性别、年龄、治疗史和胸部CT检查结果进行比较分析;对两组患者淋巴细胞亚群和结核分枝杆菌特异性反应T细胞检测结果分别进行比较分析。结果 PTB-DM组男性和女性分别占76.4%(65/85)和23.6%(20/85),PTB组分别占57.3%(55/96)和42.7%(41/96),差异有统计学意义(χ²=7.42,P=0.006)。PTB-DM组<25岁、25~60岁和>60岁的患者分别占2.4%(2/85)、68.2%(58/85)和29.4%(25/85); PTB组则分别占25.0%(24/96)、63.5%(61/96)和11.5%(11/96),差异有统计学意义(χ²=23.55,P=0.000)。PTB-DM组初治和复治患者分别占74.1%(63/85)和25.9%(22/85),PTB组分别占84.4%(81/96)和15.6%(15/96),差异无统计学意义(χ²=2.92,P=0.088)。PTB-DM组胸部CT扫描显示无空洞、有空洞、病变范围<3个肺叶和≥3个肺叶者分别占23.5%(20/85)、76.5%(65/85)、31.8%(27/85)和68.2%(58/85);PTB组分别为53.1%(51/96)、46.9%(45/96)、54.2%(52/96)和45.8%(44/96);PTB-DM组胸部CT有空洞和病变范围≥3个肺叶的患者明显多于PTB组,差异有统计学意义(χ²=16.56,P=0.000和χ²=9.20,P=0.002)。PTB-DM组结核分枝杆菌特异性反应T细胞阳性率为81.3%(65/80),PTB组阳性率为74.2%(66/89),差异无统计学意义(χ²=1.22,P=0.270)。PTB-DM组总T淋巴细胞绝对计数、CD4⁺T淋巴细胞绝对计数、CD8⁺T淋巴细胞绝对计数、自然杀伤细胞(NK细胞)绝对计数、NK样T淋巴细胞绝对计数和总B淋巴细胞绝对计数的中位数(四分位数)值分别为1069.00(753.50,2372.50)、548.00(381.00,787.50)、380.00(270.50,574.50)、184.00(111.00,294.50)、60.00(36.00,120.50)和162.00(80.50,244.00)个/μl,PTB组则分别为1161.50(858.50,1601.00)、628.00(472.75,860.50)、457.50(286.00,614.75)、191.50(115.75,315.75)、65.50(34.50,119.50)和184.50(112.25,301.00)个/μl,两组间6项指标差异无统计学意义(Z=-1.80,P=0.073;Z=-1.47,P=0.142;Z=-1.46,P=0.144;Z=-0.57,P=0.568;Z=-0.09,P=0.931;Z=-1.93,P=0.053)。结论 PTB-DM中老年男性较多,病灶范围广泛、严重; PTB是否并发DM对淋巴细胞亚群6项指标检测结果无明显影响。     

C8orf4基因在大肠癌中的表达

目的：筛查大肠癌分化相关分子标志物。方法：应用美国Affymetrix HG-U133寡核苷酸芯片对不同分化程度大肠癌组织和正常大肠黏膜组织的基因表达谱进行检测。采用肿瘤样品分类法（T-class）对各样品进行基因分类。并应用实时荧光定量RT-PCR检测候选基因在不同分化程度大肠癌中的差异表达。结果：T-class分析获得分类精度100%的大肠癌分化差异表达基因＆ ESTs 8个。其中C8orf4基因（chromosome 8 open reading frame 4）经非多元统计分析，在大肠癌组较正常黏膜表达下调。实时荧光定量RT-PCR检测该基因在不同分化程度大肠癌组间表达，其标准化表达值与基因芯片该基因探针组信号值相关性分析，呈线性相关。两种方法检测C8orf4基因在不同分化程度大肠癌组表达趋势相符。结论：C8orf4基因与大肠癌分化密切相关，可作为大肠癌分化的候选分子标志物。     

多房囊性肾瘤1例报道并文献复习

多房囊性肾瘤(m ultilocular cystic nephrom a,M CN)是一种少见的非遗传性肾脏囊性良性病变,因其组织成分复杂多样,该肿瘤命名混乱。现报道一例并结合文献复习重点阐述其病理诊断及鉴别诊断要点。1材料及方法1.1临床资料患者女性,36岁,无明显诱因突然出现新鲜肉眼血尿、伴少量血块。无尿急、尿痛及尿频症状,心肺腹未见异常。于2005年4月15日入院,行B超检查发现右肾中极囊实性占位病变,多普勒检查示实性占位中有少量血流信号。多参数肾图提示双肾分泌、排泄均正常。CT扫描示:右肾中下极腹侧肾实质见大小约3.5cm×4cm类圆形占位影,CT密度…     

MSI和VEGF在NSCLC组织中的表达及临床病理相关性研究

目的：研究微卫星不稳定性和血管内皮生长因子在非小细胞肺癌中的表达及其之间的相关性。方法：应用PCR-变性聚丙烯酰胺技术检测94例非小细胞肺癌肿瘤组织及相应正常肺组织的D3S1067、D3S659、D3S966及AR四个位点的微卫星不稳定性。采用免疫组织化学方法测定94例非小细胞肺癌病理切片中血管内皮生长因子的表达情况，并对二者与患者的年龄、性别、病理类型、组织分化程度、临床分期、淋巴结转移和生存时间相关性进行统计分析。结果：在所有病例中64．89％呈现至少一个位点的微卫星不稳定性阳性。微卫星不稳定性阳性组与阴性组相比较，其淋巴结转移率明显增高，差异有统计学意义（P〈0．05）。血管内皮生长因子阳性率为62．8％，其基因的表达与肺癌患者的细胞分化程度、TNM分期、5年生存率和淋巴结转移状态密切相关（P〈0．05）。微卫星不稳定性和血管内皮生长因子阳性患者的生存时间显著低于微卫星不稳定性阴性患者（P〈0．05）。COX回归模型分析显示，微卫星不稳定性和血管内皮生长因子对非小细胞肺癌患者是一个重要的预后判断因素（P〈0．01）。结论：微卫星不稳定性和血管内皮生长因子的表达与非小细胞肺癌的临床病理学特征密切相关，二者的检测将有助于肺癌的诊断，评估肺癌患者的恶性程度和预后。     

结核分枝杆菌Rv1419蛋白抗原表位的预测

 目的 预测结核分枝杆菌Rv1419蛋白的抗原表位。方法 利用DNAStar软件包中Protean软件对Rv1419氨基酸序列进行分析,采用包括二级结构、亲水性、抗原性、可及性、柔韧性、电荷分布等多参数预测其二级结构及T细胞和B细胞抗原表位。结果 Rv1419蛋白具有丰富的二级结构和多处抗原指数较高的区段,含有少数潜在的B细胞抗原肽表位（可能在67～70、72～82、142～154、131～137位氨基酸残基或其附近）,这些表位抗原性较好,都含有β转角和无规则卷曲结构,呈现在表面的可能性和柔韧性都较大。该蛋白含有较多潜在的T细胞抗原肽表位（可能在5～15、18～22、29～32、43～55、58～62、64～68、86～97、99～109、110～114、117～123、126～128、136～140位氨基酸残基或其附近）。结论 结核分枝杆菌Rv1419蛋白是一个T细胞抗原表位占优势的蛋白抗原,也存在B细胞抗原表位,本研究结果为该蛋白抗原表位的进一步研究、应用奠定了基础。     

结核分枝杆菌Ag85A／ESAT-6嵌合基因DNA疫苗与抗痨药物联合治疗小鼠结核病

目的 研究结核分枝杆菌Ag85A/ESAT-6嵌合基因DNA疫苗及其与抗痨药物联合治疗小鼠结核病的效果.方法 用结核分枝杆菌临床分离的利福平和异烟肼敏感株HB240-1尾静脉注射17～19g的6～8周龄雌性BALB/c小鼠后,将小鼠随机均匀地分为5组,感染后第3d开始,分别用pVAX1空载体(A组)、利福平和异烟肼(B组)、利福平、异烟肼和Ag85A/ESAT-6嵌合基因DNA疫苗(C组)、Ag85A/ESAT-6嵌合基因DNA疫苗(D组)、HSP65基因DNA疫苗(E组)治疗40d,每组10只小鼠.治疗结束后2w,分别取肺、肝和脾观察病理改变、称取重量、做菌落计数.结果 小鼠感染5w后,肺内菌量可达到1.8×106 CFU,脾内菌量达到1.7×106CFU.治疗结束后2w,B组和C组肺、脾脏器重量指数显著低于D组和E组,D组和E组脾脏器重量指数低于A组,但差别不显著.A组肺脏病变程度最重,病变范围80%～100%,干酪样坏死灶为弥漫性;D组和E组肺脏病变范围50%,干酪样坏死灶为片状;B组和C组肺脏病变程度较轻,病变范围较小,干酪样坏死灶为点状.A组脾脏9只重度肿大;B组和C组脾脏未见明显病变;D组和E组脾脏各有4只重度肿大.与A组相比,E组、D组、B组和C组肺脏菌落数分别减少了45%、50%、98.9%、99%;脾脏菌落数依次减少了50%、55%、99.2%、98.4%.与pVAX1空载体治疗组相比,各治疗组均有不同程度的疗效,Ag85A/ESAT-6嵌合基因疫苗组与HSP65基因疫苗组疗效相当.结论 Ag85A/ESAT-6嵌合基因DNA疫苗组联合化疗的疗效明显强于Ag85A/ESAT6嵌合基因DNA疫苗单独应用.     

TCT技术与HPV分型技术在子宫颈病变筛查中的应用价值

为探讨液基薄层细胞检测法（TCT）与人乳头状瘤病毒（HPV）分型检测在子宫颈病变筛查中的应用价值,对18534例妇科宫颈刷检标本进行TCT检测,其中257例标本采用导流杂交技术（FTH）检测HPV分型。结果表明,257例标本中,108例HPV病毒检测结果为阳性（阳性率42.1%）,包括93例高危亚型感染,15例低危亚型感染,20例感染两种以上HPV亚型,149例HPV为阴性（57.9%）。HPV是诱发女性宫颈癌及生殖器病变的主要病源。TCT检测技术联合HPV分型应用于宫颈癌早期防治以及确诊子宫颈病变具有着重要意义。     

对比分析三维超声对子宫畸形诊断的临床价值

目的对比二维与三维经腹或经阴道超声对子宫畸形诊断结果,评价三维超声诊断子宫畸形临床价值。方法对二维诊断子宫畸形或疑诊子宫畸形131病例,进行相应三维超声扫查,对诊断结果进行分类比较,总结二者区别所在。部分接受核磁检查及宫腔镜手术和碘油造影的病例对其超声检查结果进行比较。结果三维超声明确诊断131例子宫畸形,其中在二维扫查可获得明确诊断121例,2例单角有内膜无残角子宫二维超声未得到明确诊断,1例单角子宫有残角有内膜被诊断为不全纵隔子宫,2例弓形子宫被二维超声诊断为正常子宫,1例双角子宫和2例弓形子宫被诊断为不全纵隔子宫。19例纵隔子宫核磁或宫腔镜手术证实,4例单角子宫中2例宫腔镜及腹腔镜联合手术、2例外院输卵管碘油造影证实,与3D超声符合率达100%;19例纵隔子宫2D超声诊断18例,4例单角子宫2D超声均未诊断。结论二维超声诊断双子宫及完全纵隔子宫多无困难,较少见先天子宫畸形:如单角子宫,易发生漏诊或误诊。三维超声能够得到子宫冠状切面成像,能更准确诊断子宫先天发育异常,易于区分不全纵隔子宫、双角子宫、弓形子宫及单角子宫。     

牛贝消核提取物对耐多药结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌的体外抑菌作用的研究

目的研究不同工艺制备的中药复方牛贝消核提取物的体外抑菌活性,为制备抗结核中成药制剂提供实验基础。方法制备分别含50,100,200 g·L-1牛贝消核水提取物、醇提取物的改良罗氏培养基,并分别制备含1,10μg/ml异烟肼(Isonicotinic acid hydrazide,INH)和50,250μg·ml-1利福平(Rifampicin,RFP)的改良罗氏培养基为对照,将3株耐多药结核分枝杆菌分离株、牛结核分枝杆菌和4株非结核分枝杆菌分别接种于含药的改良罗氏培养基中,置37℃培养4周,测定其最低抑菌浓度(MICs)。结果牛贝消核水提取物对这8株供试菌的MICs均为200 g·L-1;醇提取物对牛结核分枝杆菌和母牛分枝杆菌的MICs均为100 g·L-1,对3株耐多药结核分枝杆菌分离株、胞内、瘰疬、偶发分枝杆菌的MICs均为200 g·L-1。结论牛贝消核水提取物和醇提取物对敏感或耐药的结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌均有不同程度的抑制作用,醇提取物的抑菌活性比水提取物略强。