重组酶介导的蓝氏贾第鞭毛虫特异性等温核酸扩增方法的建立及评价

目的　建立基于重组酶介导的等温扩增技术（RAA）的蓝氏贾第鞭毛虫核酸检测方法,并评价其检测敏感性和特异性。方法　选择蓝氏贾第鞭毛虫β?贾第素（β?giardin）基因作为检测靶基因,设计、合成特异性检测引物及荧光探针,建立荧光RAA检测体系。分别以不同拷贝数的重组质粒（含β?giardin基因靶序列）和不同浓度蓝氏贾第鞭毛虫基因组DNA为模板进行荧光RAA扩增,评价其检测敏感性;分别以蓝氏贾第鞭毛虫、日本血吸虫、华支睾吸虫、微小隐孢子虫、似蚓蛔线虫、沙门氏菌及志贺氏菌基因组DNA为模板进行扩增,评价其检测特异性。结果　成功建立了蓝氏贾第鞭毛虫荧光RAA检测方法,其可在等温（39 ℃）条件下实现对靶基因片段的快速、特异性扩增（20 min内）。分别以重组质粒和蓝氏贾第鞭毛虫基因组DNA为模板,该方法的检测敏感性可达102拷贝/μL和1 pg/μL;以日本血吸虫、华支睾吸虫、微小隐孢子虫、似蚓蛔线虫、沙门氏菌及志贺氏菌基因组DNA为模板的RAA检测结果均为阴性,具备较好特异性。结论　建立了一种操作简便、敏感、特异的可用于蓝氏贾第鞭毛虫核酸检测的荧光RAA方法。     

重组酶介导的隐孢子虫属特异性等温核酸扩增 方法的建立及评价

目的　建立一种可用于隐孢子虫检测的重组酶介导的等温核酸扩增（RAA）方法,并对其检测敏感性和特异性进行评价。方法　以隐孢子虫属特异性18S rRNA核酸序列作为检测靶标,采用Amplfix软件设计、合成引物及荧光检测探针,构建并优化RAA荧光反应体系;分别以不同拷贝数的含18S rRNA靶序列的重组质粒、不同浓度隐孢子虫卵囊基因组DNA及不同数量隐孢子虫卵囊基因组DNA为模板进行RAA荧光法检测,以评价其敏感性;分别以隐孢子虫卵囊、蓝氏贾第鞭毛虫包囊、日本血吸虫虫卵、似蚓蛔线虫虫卵、华支睾吸虫虫卵、沙门氏菌、志贺氏菌基因组DNA为模板进行RAA荧光法检测,以评价其特异性。结果　成功建立了隐孢子虫检测RAA法,该方法可在39 ℃、20 min内得到隐孢子虫属18S rRNA基因片段的有效扩增。以不同拷贝数的含18S rRNA靶序列的重组质粒、不同浓度隐孢子虫卵囊基因组DNA及不同数量隐孢子虫卵囊基因组DNA为模板,该方法最低检出限分别为102拷贝/μL、1 pg/μL和1个/50 μL;以蓝氏贾第鞭毛虫包囊、日本血吸虫虫卵、似蚓蛔线虫虫卵、华支睾吸虫虫卵、沙门氏菌、志贺氏菌基因组DNA为模板的荧光RAA扩增结果均为阴性。结论　成功建立了一种可用于检测隐孢子虫卵囊DNA的RAA法,该方法操作简便、反应快速,敏感性和特异性均较好。     

重组酶介导的隐孢子虫属特异性等温核酸扩增 方法的建立及评价

目的　建立一种可用于隐孢子虫检测的重组酶介导的等温核酸扩增（RAA）方法，并对其检测敏感性和特异性进行评价。方法　以隐孢子虫属特异性18S rRNA核酸序列作为检测靶标，采用Amplfix软件设计、合成引物及荧光检测探针，构建并优化RAA荧光反应体系；分别以不同拷贝数的含18S rRNA靶序列的重组质粒、不同浓度隐孢子虫卵囊基因组DNA及不同数量隐孢子虫卵囊基因组DNA为模板进行RAA荧光法检测，以评价其敏感性；分别以隐孢子虫卵囊、蓝氏贾第鞭毛虫包囊、日本血吸虫虫卵、似蚓蛔线虫虫卵、华支睾吸虫虫卵、沙门氏菌、志贺氏菌基因组DNA为模板进行RAA荧光法检测，以评价其特异性。结果　成功建立了隐孢子虫检测RAA法，该方法可在39 ℃、20 min内得到隐孢子虫属18S rRNA基因片段的有效扩增。以不同拷贝数的含18S rRNA靶序列的重组质粒、不同浓度隐孢子虫卵囊基因组DNA及不同数量隐孢子虫卵囊基因组DNA为模板，该方法最低检出限分别为102拷贝/μL、1 pg/μL和1个/50 μL；以蓝氏贾第鞭毛虫包囊、日本血吸虫虫卵、似蚓蛔线虫虫卵、华支睾吸虫虫卵、沙门氏菌、志贺氏菌基因组DNA为模板的荧光RAA扩增结果均为阴性。结论　成功建立了一种可用于检测隐孢子虫卵囊DNA的RAA法，该方法操作简便、反应快速，敏感性和特异性均较好。     

江苏省土源性线虫病流行趋势和防治历程

土源性线虫病曾在江苏省广泛流行,严重威胁人民身体健康、阻碍社会经济发展。经过多年积极有效防治,江苏省土源性线虫人群感染率大幅下降,从1989年的59.32%下降至2019年的0.12%,自2013年以来人群土源性线虫感染率均维持在0.5%以下的水平。自1987年以来,江苏省采取土源性线虫病综合防控策略,但各阶段防控措施的侧重点存在差异,主要包括驱虫服药、改水改厕、健康教育和监测与防治效果评估等。至2019年底,全省所有县（市、区）均达到有效控制土源性线虫病标准。今后仍需加强健康教育和监测、落实精准防控,以进一步巩固江苏省土源性线虫病防治成效、消除土源性线虫病对人群的危害。本文对江苏省土源性线虫病流行情况、防控历程及策略演变等进行了回顾与总结。     

基于重组酶介导等温扩增技术的细粒棘球绦虫核酸检测方法的建立

目的　建立一种基于重组酶介导等温扩增技术（RAA）的细粒棘球绦虫核酸检测方法。方法　针对细粒棘球绦虫12S rRNA基因序列片段,设计、筛选并合成RAA特异性扩增引物和荧光检测探针,构建细粒棘球绦虫荧光RAA检测方法。分别以含靶序列的不同拷贝数重组质粒和不同浓度细粒棘球绦虫基因组DNA为模板进行荧光RAA扩增,评价其检测灵敏度;分别以细粒棘球绦虫、多房棘球绦虫、日本血吸虫、曼氏血吸虫、十二指肠钩虫、华支睾吸虫、牛带绦虫、曼氏迭宫绦虫、猪带绦虫基因组DNA为模板进行荧光RAA扩增,评价其检测特异性。结果　成功建立了细粒棘球绦虫荧光RAA检测法,在39 ℃条件下20 min内可以实现对细粒棘球绦虫基因组DNA特异性扩增,最低可以检测出10拷贝/μL含靶序列的重组质粒DNA和0.1 ng/μL细粒棘球绦虫基因组DNA样本,具备较高敏感性;对多房棘球绦虫、日本血吸虫、曼氏血吸虫、十二指肠钩虫、华支睾吸虫、牛带绦虫、曼氏迭宫绦虫、猪带绦虫基因组DNA均无阳性扩增,具备较高特异性;且该荧光RAA法可成功检出细粒球绦虫包囊中DNA。结论　成功建立了一种快速、灵敏、特异的可用于细粒棘球绦虫核酸检测的荧光RAA法。     

2017年江苏省重要寄生虫病防控技术培训效果分析

目的 评估2017年江苏省重要寄生虫病防控技术培训对于提升基层专业技术人员寄生虫病防控意识及检测水平的效果。方法 采用理论授课和实践操作相结合的方式对从事寄生虫病防治的基层专业技术人员进行培训,培训结束后分别对学员进行理论和镜检技能考核。结果 共有13个市132名学员参加了培训,无学员缺考。总成绩平均分为118.36分,苏北、苏中和苏南地区学员总考核成绩间差异有统计学意义（[χ2]=13.38,P < 0.01）,苏北地区学员成绩显著高于苏中（P < 0.001）和苏南地区（P = 0.016）。理论考核平均分为79.05分,及格率为92.4%;苏北、苏中、苏南地区学员理论考核成绩间差异有统计学意义（[χ2]= 14.51,P < 0.01）,苏北地区学员成绩显著高于苏中（P < 0.001）和苏南地区（P = 0.009）。镜检考核平均分为39.32分,及格率为89.4%;苏北、苏中、苏南地区学员镜检考核成绩间差异无统计学意义（F = 2.37,P = 0.09）。7种寄生虫虫卵检出率间差异有统计学意义（[χ2]= 31.23,P < 0.01）;其中卫氏并殖吸虫卵检出率最高,为75%;血吸虫和布氏姜片吸虫虫卵检出率较低,分别为51.5%和54.5%;鞭虫、未受精蛔虫、华支睾吸虫和带绦虫虫卵检出率分别为71.2%、65.9%、72.7%、72.0%。结论 专业技术培训提升了江苏省基层专业技术人员对于重要寄生虫病的防控意识及病原学检测水平,为下一步开展重点寄生虫病防控工作提供了技术保障。     

江苏省慢性丝虫病现状调查

目的 了解江苏省慢性丝虫病患者现状,为继续做好慢性丝虫病患者关怀照料工作提供基础数据。方法 根据历史在册病例资料,2018年6-7月对江苏省慢性丝虫病患者逐个随访并开展线索调查,通过问卷调查获取患者基础资料,对患者特征、关怀照料点分布及覆盖人群等信息进行分析。结果 江苏省现存慢性丝虫病患者3 160例,男性占40.0%,女性占60.0%;60岁及以上占91.8%。患者主要分布于宿迁（24.2%）、淮安（19.5%）、苏州（17.3%）、徐州（11.2%）、盐城（9.8%）等设区市。单纯淋巴管/结炎、单纯淋巴水肿/象皮肿、单纯乳糜尿、单纯鞘膜积液和同时有上述2种或以上症状的病例分别占2.7%、37.1%、11.2%、0.9%和48.1%。97.8%的淋巴水肿/象皮肿患者水肿部位发生在下肢,90%以上的患者分期在I～III期。目前全省有慢性丝虫病患者照料点220个,覆盖患者2 091人,当年开展关怀照料活动平均次数为3.2次,平均累计开展活动年数为11.3年。结论 江苏省慢性丝虫病患者数量明显减少,表现为高龄、病程长等特点,关怀照料点未覆盖全部患者。今后应对全部慢性丝虫病患者开展关怀照料,以减轻其症状、提高其生活质量。     

江苏省沿海地区高危人群异尖线虫感染风险调查

目的了解江苏省沿海地区高危人群异尖线虫感染风险,为制定江苏省异尖线虫病预防控制措施提供基础数据。方法 2018年选择江苏省沿海地区南通市如东县、连云港市海州区和盐城市东台市作为调查点,对从事海鱼捕捞、鲜活海鱼销售、喜食鲜活海鱼者等3类异尖线虫感染高危人群开展异尖线虫病防治知行信调查,检测血清特异性异尖线虫Ig G抗体,并对上述人群血清Ig G抗体阳性的影响因素进行logistic回归分析。采集当地鲜活海鱼样本,检测异尖线虫幼虫感染情况,计算感染率和感染度。结果本次调查3类高危人群625人,其中男性349人(占55.8%)。问卷调查显示,听说过异尖线虫病的有81人(13.0%);3类人群对异尖线虫病防治知识知晓率普遍较低,生食或半生食海鱼者占21.6%,5.8%的调查对象选择吃未煮熟的海鱼;3.2%食用海鱼后出现恶心、呕吐、腹泻等症状;5.1%出现全身过敏症状,65.6%砧板切生熟食不分。血清学检测结果显示,调查人群血清异尖线虫特异性Ig G抗体阳性率为7.0%。Logistic回归分析显示,受教育程度[OR=0.687,95%CI(0.478, 0.987)]和是否存在全身过敏症状[OR=4.641,95%CI(1.411,15.268)]是调查人群血清学Ig G抗体阳性的影响因素。累计调查海鱼494条,异尖线虫幼虫感染率为64.0%,感染度为8.1条/鱼,其中带鱼和青占鱼感染率较高。结论江苏省沿海地区高危人群异尖线虫病防治知识知晓率较低,且存在生食或半生食、砧板切生熟食不分等高危行为;该地区海鱼异尖线虫感染率高。后续应进一步加强异尖线虫病健康教育和健康促进工作。     

江苏省生活饮用水中贾第鞭毛虫和隐孢子虫污染情况调查

目的了解江苏省生活饮用水中贾第鞭毛虫和隐孢子虫的污染状况,为饮用水水质卫生、安全供水提供科学依据。方法选取江苏省13个设区市的28家水厂,分别采集水源水、自来水厂出厂水、管网末梢水样本(其中水源水采集10 L,出厂水和末梢水各100 L),并进行抽滤、淘洗、离心浓缩、免疫磁分离、荧光染色镜检的处理,检测贾第鞭毛虫包囊及隐孢子虫卵囊的含量。结果累计采集江苏省13个设区市的水样84份,包括水源水、水厂出厂水、管网末梢水各28份。其中,水厂出厂水和管网末梢水中均未检出贾第鞭毛虫包囊和隐孢子虫卵囊,但在盐城(盐龙湖)、连云港(蔷薇河)、常州(钱资湖)水源水中检出贾第鞭毛虫包囊,阳性率为10.71%(3/28),密度均为1个/10 L;在南京(长江)、镇江(长江)、扬州(京杭大运河)的水源水中检出隐孢子虫卵囊,阳性率为10.71%(3/28),密度均为1个/10 L。结论江苏省部分地区水源水中可检出贾地鞭毛虫和隐孢子虫,存在一定的安全用水隐患,须进一步加强水源卫生监管,加强饮用水的监测,保证居民的饮水安全。     

2015—2022年江苏省棘球蚴病网络报告病例流行病学特征分析

通过中国疾病预防控制信息系统收集2015—2022年江苏省棘球蚴病报告病例资料并进行个案流行病学调查，选择既往疑似本地病例集中出现的溧阳市及宜兴市2个棘球蚴病重点地区开展中间宿主、终末宿主感染情况调查，每年在两市屠宰场抽取100～200份羊脏器样品，采用内脏剖检法检查羊棘球蚴感染情况，采集1～3个行政村不少于100只家犬的粪样，ELISA检测犬粪棘球绦虫抗原。采用PASW 18.0对报告病例的时间、地区、人群分布、诊疗情况和中间宿主、终末宿主监测结果等进行描述性分析。结果显示，2015—2022年，江苏省累计报告棘球蚴病病例29例，其中确诊病例占62.07%(18/29)，临床诊断病例占37.93%(11/29)。疑似本地感染病例共14例，外地输入性病例共15例。输入性病例中12例来源于新疆，2例来源于西藏，1例来源于巴基斯坦。常州市报告病例数最多，为13例（其中10例为溧阳市的疑似本地感染病例）。报告的29例病例中，男性、女性报告病例数分别占34.48%(10/29)和65.52%(19/29);40～60岁报告病例数最多，占51.73%(15/29)；职业以农民为主，占41.38%...