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目的 研究脊髓压迫性损伤(compressed spinal cord injury,CSCI)后脱髓鞘病变与半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-12(caspase-12)表达变化之间的关系,探讨CSCI后脱髓鞘病变机制.方法 成年SD大鼠75只,按随机数字表法分为5组:正常组、对照组、压迫1d组、3d组、7d组,每组15只.采用自行设计制作的脊髓压迫模型,通过电镜和TUNEL染色、免疫荧光双标分别检测各组CSCI后神经纤维脱髓鞘的超微结构以及少突胶质细胞凋亡情况;运用免疫印迹技术检测与细胞凋亡有关的caspase-12表达.结果 CSCI后神经纤维出现脱髓鞘病变,并随着压迫时间延长而逐渐加重;脊髓损伤后出现少突胶质细胞凋亡,压迫7d组与正常组相比,差异有统计学意义(P<0.05).caspase-12表达也随压迫时间延长而上调.结论 caspase-12介导了少突胶质细胞凋亡,是CSCI后神经纤维脱髓鞘病变的机制之一. 相似文献
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目的 探讨神经细胞内前咽缺陷蛋白-1(Aph-1)的蛋白降解是经蛋白酶体途径还是经溶酶体途径介导.方法 在人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)建立稳定表达Aph-1细胞株的基础上,应用蛋白酶体和溶酶体酶抑制剂分别处理Aph-1细胞株,并结合Western blotting、放射性同位素脉冲示踪技术(Pulse-chase)、免疫荧光双标等技术,检测细胞内Aph-1的蛋白表达变化.结果 Western blotting结果显示,特异性蛋白酶体抑制剂能显著提高神经细胞内源性和外源性Aph-1的蛋白表达水平,且高度特异的蛋白酶体抑制剂乳胞素(Lactacystin)对Aph-1表达的增强效应呈剂量依赖性和时间依赖性;而非蛋白酶体蛋白酶抑制剂ALLM和溶酶体酶抑制剂对Aph-1的蛋白表达无影响;Pulsechase结果显示,蛋白酶体抑制剂可增强细胞内新合成Aph-1的表达水平,其增强作用是通过阻止35S-Aph-1的蛋白降解实现;免疫荧光双标结果显示,Aph-1与泛素在细胞内共存.结论 神经细胞内Aph-1的蛋白降解由蛋白酶体途径介导,与溶酶体途径无关;Aph-1在降解之前经泛素化修饰.Abstract: Objectives To investigate whether degradation of anterior pharynx decfective-1(Aph-1) goes through proteasomal pathway or lysosomal pathway.Methods Various methods such as cell culture,Western blotting,pulse-chase metabolic labeling technique,double immunofluoresecnt staining,combined with proteasomal and lysosomal inhibition were used to check Aph-1 expression level in stable Aph-1-transfected or non-transfected neuronal(SH-SY5Y)cell line.Results Using Western blotting,treating the neuronal cells with proteasome specific inhibitors significantly increased the expression of both endogenous and exogenous Aph-1.The effect of the proteasome inhibitors on Aph-1 expression was dose-and time-dependent Lysosomal pathway was not involved in Aph-1 degradation. Pulse-chase metabolic labeling experiment showed that the turnover of newly-synthesized radiolabeled Aph-1 protein was blocked by Lactacystin.Double immunofluorescent staining revealed colocalization of Aph-1 and ubiquitin in the same cells.Conclusion Degradation of Aph-1 protein is mediated by proteasomal pathway in neuronal cells,and is not related to lysosomal pathway.Aph-1 protein is ubiquitinated before degradation. 相似文献
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培养学生主体意识、发挥其主体作用成为高校教育教学改革的必然趋势。局部解剖学作为以实验教学为主的课程,学生主体作用的发挥对提升教学效果起着更为关键影响。重庆医科大学人体解剖学教研室结合局部解剖学教学各环节特点,采取多种措施保证学生在学习上发挥主体作用。如,在预习和复习环节,通过图片绘制锻炼学生形象思维能力;在解剖操作环节,通过对解剖结构与临床疾病关系的讨论及变异结构识别,培养学生学习兴趣和创新能力;在考核评价环节,采取形成性评价,促进学生的学习主动性,并保证对学生评价的客观公正。这些措施的实施,提高了局部解剖学教学质量。 相似文献
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为了更全面地提高教学质量和培养学生综合学习能力,尝试建立《局部解剖学》课程形成性评价体系。把考试考核贯穿于课程教学的全过程,使课程教学不但重结果、而且重过程:使学生重视平时学习,养成良好的学习习惯,极大地减少了靠一次期末考试定成败的偶然性。多样的考试考核方法和叠加的综合成绩评定.使考试测验自始至终都能起到促进和帮助学生学习的作用。激励学生爱学、会学、创造性学习,监控教学全过程,是建立该体系的根本目的。 相似文献
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