PCR体系中dNTP的配制和存放问题

ＰＣＲ体系中ｄＮＴＰ的配制和存放问题张玉琴，王申五（北京医科大学血液病研究所，北京１０００３４）ＰＣＲ基因扩增技术简单易行，应用日趋广泛，但影响因素较多，有时得不到满意结果。除了Ｔａｑ聚合酶的因素外，四种三磷酸脱氧核苷（ｄＮＴＰ）的不稳定常常是造成Ｐ...     

原发性高血压与HLA-DRB等位基因相关的研究

目的：分析高血压患者的遗传易感性的遗传性背景。方法：采用PCR-SSP技术对病例组56例、正常对照组104例进行HLA-DRB等位基因分型。结果：HLA-DRB1*12等位基因频率显著高于正常组，并与发病年龄密切相关，即发病年龄越早，与DRB1*12的关联强度越大。HLA-DRB1*03也出现随发病年龄的提前，而显示出明显的关联趋势。结论：HLA－DRB*12是高血压病的相关基因，与该病的遗传易感性有较密切关系。     

抗病毒口服液的含量测定

抗病毒口服液为我院经验配方,具有祛风解表、清热解毒功能.用于外感发热、流感、上呼吸道感染、扁桃体炎、腮腺炎等.其中主要成分为黄芩、板兰根、羌活、鸭跖草等药物.本文采用薄层扫描法对黄芩甙进行含量测定.1 仪器与试药CAMAG SCANNER 3型薄层扫描仪、半自动点样仪(CAMAG)及100μl微量注射器(HAMILTON);试剂均为     

复制缺陷型腺病毒AdE1CMV-NGF的制备

通过DNA重组技术 ,经亚克隆和克隆过程构建分泌表达型重组腺病毒穿梭质粒pAdE1CMV NGF ;制备完整高纯度辅助病毒 pJM1 7。将 pAdE1CMV NGF和 pJM1 7在 2 93细胞中同源重组 ,获得复制缺陷型腺病毒重组体AdE1CMV NGF。梯度系列稀释测得滴度为 4 .6× 1 0 10 PFU/mL。     

逆转录病毒介导的人卵巢癌 p53基因治疗体外及小鼠体内实验研究

目的 :评价人卵巢癌的 p5 3基因治疗效果。 方法 :用携带人野生型 p5 3的逆转录病毒转导 p5 3蛋白表达缺如的人卵巢癌细胞系SK OV 3,通过体外及小鼠体内实验研究转基因的表达及对肿瘤的抑制作用。结果 :逆转录病毒介导的 p5 3基因能够在体外及小鼠体内人卵巢癌细胞SK OV 3中表达 ,并对人卵巢癌生长有抑制作用。体外抑制率为 5 7%～ 88% ;对体内肿瘤抑制率为 40 %。结论 :逆转录病毒介导的外源野生型p5 3能够抑制人卵巢癌生长 ,增加病毒滴度将进一步提高体内治疗效果     

逆转录病毒载体介导的bcl-2反义RNA促进胃癌MGC-803细胞凋亡

bcl-2是Tsujimoto在Ⅱ型B细胞淋巴瘤中发现的一种基因,其过度表达能抑制撤退生长因子、射线、热休克、化疗药物、病毒及促凋亡基因等多种因素诱导的细胞凋亡 .bcl-2蛋白高表达赋予肿瘤细胞对多种化疗药物的抗性,导致化疗失败或复发.逆转bcl -2的表达可能提高化疗效果.我们将bcl-2的编码序列反向插入逆转录病毒表达载体中并转导实体瘤胃癌细胞株MGC-803,观察bcl-2反义序列对实体瘤肿瘤细胞的作用.     

多药抗性基因的临床实验研究

基因转移技术的发展使外源耐药基因转染造血干细胞成为可能,为化疗药物带来的严重骨髓抑制提供了解决办法,并且作为选择性标志基因,在其它基因治疗中发挥重要作用。1 多药抗性基因及其编码产物 1984年发现肿瘤细胞对于一种或多种药物的抗药性与一种基因的表达有关,这种基因称为多药抗性基因(mdrgene)。Riondan等利用中国仓鼠卵母细胞(CHO china ham-ster overy)的mRNA构建了cDNA文库(library),从中克隆mdr的cDNA片段,确定mdr定位于7号染色体q~(21、1)。它编码的蛋白质由riordan于1979年提纯,确定其是由1280个氨基酸组成的跨膜糖蛋白,称P-gp。分子量为170～180 kDa,又称P170。该蛋白可与ATP反应,并利用ATP获得能量将药物泵出细胞外,包括紫杉醇、蒽环类抗生素、秋水仙素、表鬼臼霉素类等,但它的反应底物不包括抗代谢药及烷化剂。 抗药性基因是一个大家族,除mdr外还包括:突变型二氢叶酸还原酶(DHFR)基因、多药抗性相关蛋白(MRP)基因、谷胱甘肽S-转移酶基因(GST)、癌基因(cHa-ras,bc1-2,bcr-ab1,erbB-2,fos,jun,MDM-2)、热休克蛋白(HSP)基因,药物代谢相关酶类及金属硫蛋白(MT1)基因。     

枸杞山茱萸水煎液增强小鼠耐缺氧抗疲劳能力的实验研究

目的 研究枸杞山茱萸水煎液对小鼠耐缺氧抗疲劳能力的影响.方法 采用强迫游泳法测定小鼠的游泳和力竭游泳时间,常压耐缺氧法测定小鼠的存活时间,小鼠断头缺氧试验测定小鼠张口喘气停止时间和呼吸次数.结果 枸杞山茱萸水煎液连续灌胃给药,能显著延长小鼠的游泳时间[高剂量组(51.18±19.7)min、低剂量组(29.45±11.69)min、NS组(15.24±3.85)min]、常压缺氧下的存活时间[高剂量组(21.04±7.63)s、低剂量组(18.34±6.33)s、NS组(15.87±1.64)s]和断头喘气时间[高剂量组(29.33±4.76)s、低剂量组(22.50±4.83)s、NS组(19.17±2.86)s]增加呼吸次数[高剂量组(13.88±2.53)次、低剂量组(15.17±1.47)次、NS组(10.17±2.79)次](P＜0.05,P＜0.01).结论 枸杞山茱萸水煎液能增强小鼠的抗疲劳和耐缺氧能力,提高动物机体的应激反应能力.     

复方逍遥合剂中黄芩苷的薄层扫描测定

建立了薄层扫描法测定复方逍遥合剂中黄芩苷含量,并采用TLC法对黄柏、白芍、柴胡、贝母等成分进行鉴别.黄芩苷点样量在0.15～0.75μg范围内线性关系良好(r=0.9987),平均回收率99.2%(RSD 1.5%).     

血管内超声指导的冠状动脉介入治疗对减少肾功能不全患者对比剂肾病的进展

慢性肾功能不全患者的介入病例数逐年增加,肾功能不全患者有更高的对比剂肾病发生率。然而对比剂肾病有着严重的危害和后果,可导致手术相关并发症明显增加,住院死亡率和长期死亡率显著增加。如何降低对比剂肾病的发生率,使更多的肾功能不全患者能安全地接受介入治疗是冠心病介入领域的重要课题。现就血管内超声指导的冠状动脉介入治疗对减少肾功能不全患者对比剂肾病的有效性研究做一综述。