定量分析鼻咽癌患者外周血游离EBV

目的:分析外周血游离Epstein-Barr病毒(EBV)是否特异地出现于鼻咽癌患者。方法:收集鼻咽癌患者和非鼻咽癌肿瘤患者血浆各50例,正常人血浆30例,提取DNA,荧光定量PCR检测EBV拷贝数,比较游离EBV在上述人群的差异。结果:在25例(50%)鼻咽癌患者血浆中检测到游离EBV,其拷贝数波动于1×103拷贝/ml血浆～2.6×106拷贝/ml血浆,中位数为5.3×105拷贝/ml血浆。在50例非鼻咽癌肿瘤患者和30例正常人血浆中均未检测到游离EBV。结论:游离EBV出现于鼻咽癌患者外周血,可能是一个较特异的鼻咽癌标志物。     

草酸铂与5-氟脲嘧啶联合介入治疗结直肠癌肝转移

目的 比较应用草酸铂与5－氟脲嘧啶（5－Fu)联合的介入治疗方案与单用5－Fu介入治疗方案对结直肠癌术后多发性肝转移癌患者的疗效及副作用。方法 观察组（21例）应用草酸铂 5-Fu肝动脉灌注化疗 表阿霉素与碘油乳剂栓塞肝动脉。对照组（30例）术中应用5－Fu肝动脉灌注化疗 表阿霉素与碘油乳剂栓塞肝动脉。两组均以每4周为1周期，重复2－4周期，客观疗效与毒性反应按WHO标准进行评价。结果 观察组、对照组客观疗效（CR＋PR）分别为57％及40％（P＜0．01），中位生存期观察组13．0个月，对照组11．6个月，白细胞减少、恶心、呕吐、腹痛、发热等副作用两组差异无显著性。观察组有4例出现外周神经毒性反应。结论 草酸铂与5－Fu联合用药介入治疗结直肠癌多发性肝转移的治疗效果优于5－Fu单一用药。     

The detection of MDR1 gene expression using fluorogenic probe quantitative RT-PCR method

Competitive RT-PCR and quantative PCR using internal control as reference are usually used to detect the MDR1 gene expression in cancer cells. Both of these methods are end-point detecting method with considerable difference of product amounts between exponential and plateau phase. Therefore it is very difficult to exactly quantify primary template copies. Furthermore, there are some problems with competitive RT-PCR in practice, such as the PCR product contamination that result in fals…     

荧光定量RT-PCR检测mdr-1基因表达

建立荧光定量ＲＴ－ＰＣＲ检测肿瘤细胞ｍｄｒ－１基因表达的方法,了解肺癌组织中ｍｄｒ的表达水平。方法：建立荧光定量ＲＴ－ＰＣＲ方法,在ＰＥ７７００型检测仪上定量检测Ｋ５６２／ＡＤＭ耐药株和Ｋ５６２不耐药株细胞ｍｄｒ－１有达水平,同时检测４５例初治肺部肿瘤病人组织标本。     

实时定量检测肝癌组织中端粒酶逆转录酶基因的表达

在肝癌中 ,端粒酶活性高达 80 %以上 ,且活性越高 ,复发率也越高。因此 ,定量检测端粒酶活性对诊断肝癌、预测复发等有重要意义。我们采用实时定量ＲＴ ＰＣＲ方法 ,对 5 0例肝癌及癌旁组织中的端粒酶ｈＴＥＲＴ基因表达水平进行了定量检测 ,现将结果报告如下。一、资料与方法1 组织标本 :5 0例肝癌及配对的癌旁组织为我校肿瘤医院 1998～ 2 0 0 0年手术的肿瘤标本 ,均经病理检查确诊。男4 6例 ,女 4例 ;患者年龄 2 6～ 72岁 ,平均 4 8.1岁。2 组织总ＲＮＡ的提取 :用Ｔｒｉｚｏｌ(Ｇｉｂｃｏ公司 )提取总ＲＮＡ ,操作按说明书进行。提取后…     

荧光定量逆转录-聚合酶链反应检测白血病bcr/abl mRNA

目的　建立荧光定量RT PCR法检测白血病融合基因bcr ablmRNA的方法 ,为白血病临床诊断及微量残留病监测提供有用工具。方法　RT PCR扩增培养的K5 6 2细胞bcr abl融合基因 ,A T载体克隆法构建定量标准模板 ,用PE770 0型检测仪 ,建立荧光定量RT PCR方法 ,对方法的灵敏性、稳定性、重复性进行测定 ;定量检测 14例慢性髓细胞白血病 (CML)患者和 4例急性淋巴细胞白血病(ALL)患者外周血样本。结果　建立的荧光定量RT PCR方法 ,可检测出约 10 - 5μgK5 6 2总RNA中的bcr abl融合基因和 10个bcr abl重组质粒拷贝 ,重复性的CT值 (Cyclethreshold)管间、批间变异系数 (CV)分别为 :2 0 % ,3.7%。 14例CML患者bcr abl融合基因表达量中位数为 5 .15× 10 4 拷贝 μgRNA ,产物经电泳分析 ,其中 11例为b2a2 ,3例为b3a2 ,1例 12× 10 4 拷贝 μgRNA的CML患者 ,骨髓移植后 1个月变为 0 .2 3× 10 4 拷贝 μgRNA。 4例ALL患者中 1例有bcr abl融合基因的表达 ,为b2a2 ,表达量为 8.2×10 5拷贝 μgRNA。 结论　建立的荧光定量RT PCR方法灵敏、特异、重复性好 ,结果用拷贝数表示 ,准确可靠 ,利于统一标准。该方法能检测出b2a2、b3a2两种类型的融合基因 ,可广泛用于CML的诊断和微量残留病的检测     

采用改进方法检测肺癌组织端粒酶活性

用改进的ＴＲＡＰ法检测肺癌的端粒酶活性,探讨端粒酶活性与肺癌的关系。方法：用培养瓶替代液氮瓶收集标本,采用ＴＲＡＰ改进方法,内含３６ｐｂ质控模板预防假阴性,增加强物长度避免二聚体形成,且使反应一步完成,并用银染法显示检测结果,对４５例病理确诊的肺癌手术标本及一株肺癌细胞株的端粒酶活性进行检测。