非放射性HBV－DNA探针在乙型肝炎病毒检测中的应用

以地高辛甙元随机引物法标记ＨＢＶ－ＤＮＡ探针，以此探针检测慢性乙型肝炎患者的血清、肝组织，同时以ＥＬＩＳＡ法检测血清ＨＢｅＡｇ、ＨＢｃＡｂ。结果：血清ＮＢｅＡｇ阳性率２７％（１０／３７），血清ＨＢＶ－ＤＮＡ检出率５７．１％（２０／３５），两者有显著性差异。血清ＨＢｃＡｂ阳性率７８．４％（２９／３７），肝组织ＨＢＶ－ＤＮＡ检出率８３．８％（３１／３７），两者无显著性差异。血清与肝组织ＨＢＶ－ＤＮＡ检出率有显著性差异。提示：血清ＨＢＶ－ＤＮＡ检测是较ＨＢｅＡｇ更为准确客观反映血液带毒状况的指标。而准确反映肝脏带毒状况的指标是肝组织ＨＢＶ－ＤＮＡ检测。当ＨＢｅＡｇ阴转，血清ＨＢＶ－ＤＮＡ阴性而肝组织ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性时，需注意肝硬化及肝癌的发生。     

纤维结合素角膜上皮愈合作用的研究

人血浆纤维结合素对家兔刮除和板层切除后的角膜上皮愈合均有一定促进作用，角膜上皮裸区明显缩小，优于对照眼。临床治疗５类角膜上皮障碍５９例６１眼，均获得显著疗效。     

HBV DNA及HBxDNA亚片段在肝癌细胞内的整合及作用

为探讨ＨＢＶＤＮＡ及其亚基因片段ＨＢｘＤＮ在肝细胞肝癌（ＨＣＣ）中整合特点用机制，制备了地高辛标记的３．２ｋｂＨＢＶＤＮＡ全基因及０．５９ｋｂＨＢＶＤＮＡ／ＢａｍＨＩ，ＢｇｌⅡＢＨｘＤＮＡ亚基因探针。点杂交、原位杂交及Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交检测ＨＢＶＤＮＡ的存在情况，筛选ＨＢＶＤＮＡ纯整合标本，以ＨＢｘＤＮＡ探针检测ＨＢｘＤＮＡ在ＨＣＣ染色体的整合。结果显示ＨＢＶＤＮＡ在肝细胞内以核型为主（７０％）     

IL－10对大鼠佐剂性关节炎的治疗及免疫机理探讨

形成佐剂性关节炎（ＡＡ）的动物模型，研究ＩＬ－１０的抗炎作用及其机理。结果表明，经腹腔注射ＩＬ－１０后能改善ＡＡ大鼠病情，用ＩＬ－１０治疗取得显效后，ＡＡ大鼠血清及关节液内炎症细胞因子ＩＬ－１，６，８，ＴＮＦ水平均明显下降，腹腔巨噬细胞和脾淋巴细胞分泌细胞因子的能力均受到抑制。表明ＩＬ－１０是通过抑制炎症细胞因子的产生而发挥治疗作用的。此项研究为用ＩＬ－１０治疗人风湿性关节炎（ＲＡ）等难治性炎症性疾病提供了理论和实验依据     

抗-HCV增补测定法的特异性

作者选择经两种第三代筛选试验(Or-tho v 3.0和Murex VK48)检测抗-HCV均为阴性的920份供血者标本,再用两种抗-HCV增补测定法——RIBAⅢ(Ortho)和Western印迹法(Murex VK68)进行验证,以确定其特异性。 结果所有初现的反应带均可重复。用RIBA Ⅲ法检测,有6份(0.65％)标本出现单条重复反应带;用Western印迹法检测,有5份(0.54％)标本出现单条重复反应带。然而,用这两种检测法无一份标本检出1条     

肝癌组织靶向性正义与反义表达载体pEBAF/N-ras的构建

目的用分子克隆技术构建肝癌组织特异性N-rascDNA正义与反义表达载体.方法用BamHI酶切携带目的基因的质粒pZIP-NeoSV(X)1,获得1.06kbN-rascDNA;同时以BamHI将载体pEBAF线性化,并行去磷酸化修饰,用T4DNA连接酶将两者连接,转化感受态细菌DH5α.先以酶切和随机引物法标记的N-rascDNA探针进行菌落原位杂交筛选阳性重组克隆,再以PvuⅡ酶切鉴定插入方向,同时进行DNA测序和同源性分析.结果成功构建肝癌组织特异性正义与反义表达载体pEBAF/s-N-ras和pEBAF/as-N-ras.结论成功构建的N-rascDNA正/反义表达载体,为原发性肝癌的发生机理和基因治疗研究奠定良好的基础.     

p16在肝细胞癌组织内变异的研究

应用分子杂交及免疫组化方法检测５６例ＨＣＣ组织内的抑癌基因ｐ１６。结果显示,ＨＣＣ标本中ｐ１６蛋白在癌细胞内表达的阳性率为３７５％（２１／５６）,而ｐ１６ＤＮＡ斑点杂交的阳性率为５５３６％（３１／５６）。Ｓｏｕｔｈｅｒｎ转膜杂交证实,１２５％（７／５６）ＨＣＣ标本存在ｐ１６的甲基化变异,４４６４％（２５／５６）ｐ１６基因缺失。提示ＨＣＣ发生、发展过程中存在ｐ１６基因的缺失和甲基化变异     

基因工程学理论和技术教学经验浅谈

基因工程学是一门新兴的前沿科学,已成为二十一世纪生命科学中一门重要的学科,基因工程技术已渗透到医学、工业、农业等多种生命科学领域。现已利用基因工程的技术对二十多种疾病,七百多个病人进行基因治疗;已使许多疾病的发病机理得以阐明,使临床上不少疾病的诊断和治疗有了长足的进步,基因工程药物的生产和临床应用,不仅推动了医学的发展,而且带动了医药工业的腾飞;转基因植物的成功大大提高了农作物的产量并使我们的世界更加灿烂;克隆羊的出现震惊了全世界。二十一世纪,基因工程将发挥更大的作用。     

冷沉淀中纤维结合蛋白的测定及其意义

纤维结合蛋白(FN)是一种具有广泛生物学功能的糖蛋白,它能促进细胞与细胞、细胞与基质的粘连,调理单核巨噬系统的吞噬功能。近年来发现冷沉淀中富含FN,国外已用于纠正创伤、烧伤和严重感染患者血浆的低FN水平。1989年以来,我们对冷沉淀和冷沉淀FN滴眼剂的FN含量进行了检测,现报告如下。