免疫组化法检测非甲-非庚型肝炎患者肝组织中输血传播病毒

目的　检测非甲-非庚型肝炎患者肝组织输血传播病毒(TTV)感染状况,TTV感染与肝组织炎症程度 及与血液学指标的相关性。方法　应用免疫组织化学法检测52例非甲-非庚型肝炎患者肝组织中TTV,并经原位 杂交证实;对TTV阳性和阴性组的血液学生化指标,诸如血清丙氨酸转氨酶(ALT)、血清天冬氨酸转氨酶(AST)、血 清总胆红素(TBIL)、白蛋白(ALB)、γ 球蛋白(γ G)、凝血酶原活动度(PTA)及组织学活动指数(HAI)进行了比较。 结果　非甲-非庚型肝炎患者肝组织中TTV抗原(TTVAg)阳性15例,检出率为28.8%;阳性物质主要定位于肝细 胞浆内,呈棕黄色细小颗粒,偶见肝细胞核内有表达;TTV阳性表达细胞呈单个、散在或片簇状分布;TTVAg阳性的 组织切片经苏木素-伊红(HE)染色后,可观察到病毒性肝炎的一些病理变化,如肝细胞胞浆疏松化、气球样变、嗜酸 样变、灶性坏死、凋亡、小叶内及汇管区炎细胞浸润;从15例TTVAg阳性病例中任选10例进行TTV DNA原位杂交 检测,结果8例阳性,二者符合率80.0%;同时对5例免疫组化TTVAg阴性肝组织进行TTV DNA原位杂交检测,结 果5例均为阴性,二者符合率100%;TTVAg阳性组ALT、AST、TBIL、γ G均值均高于TTVAg阴性组,ALB、PTA 均值均低于TTVAg阴性组,但两组比较差异无统计学意义(P>0.0     

抗丁型肝炎病毒mAb的制备及其初步应用

目的 :以基因工程表达丁型肝炎病毒抗原蛋白 (HDAg)为抗原 ,建立分泌单克隆抗体 (mAb)的杂交瘤细胞系 ,并对其分泌的mAb进行鉴定。方法 :用Ni NTA技术纯化HDAg免疫BALB/c小鼠 ,取脾细胞及骨髓瘤细胞按常规方法融合、筛选、克隆化及腹水注射制备mAb。采用ELISA及免疫组化技术进行鉴定。结果 :筛选出 2株能稳定分泌特异性抗 HD的mAb杂交瘤细胞株 (HD1,HD2 ) ,经多次复苏传代仍能稳定分泌抗体 ,特异性强 ,效价高。应用于ELISA测定患者血清HDAg均呈特异性阳性反应。免疫组化检测肝组织显示 ,针对该mAb的抗原主要分布于细胞核或浆内。结论 :此两株丁肝杂交瘤细胞株分泌的抗体对丁肝抗原具有特异亲和性 ,为丁型肝炎病毒的临床诊断及病理检测提供技术基础     

汉滩病毒重组腺病毒疫苗与DNA疫苗的联合免疫效果分析

汉坦病毒基因组由L、M、S3个负链RNA片段组成，M片段编码囊膜糖蛋白G1和G2，G1和G2在病毒的吸附、病毒膜与细胞膜的融合、中和抗体的产生等方面起着重要作用。以腺病毒为载体的活载体疫苗安全性好，能有效感染呼吸道和肠道等组织细胞，不仅能激发黏膜免疫，还能诱导系统免疫和细胞免疫反应。我们分别以腺病毒和质粒pcDNA3．1为载体，构建了含有完整汉滩病毒基因M片段和单独表达G1的重组腺病毒和重组DNA疫苗。DNA疫苗能够引发体液和细胞介导的免疫应答，但接种后只能引发很弱的免疫应答。为了克服上述疫苗的缺     

用嗜肝DNA病毒模型筛选抗病毒中草药

对叶下珠等21种中草药进行抗乙肝病毒药物研究,通过体外及体内逐步筛选发现,叶下珠和虎杖提取物对鸭乙型肝炎病毒(DHBV)及乙型肝炎病毒(HBV)均有较好的抑制效果,旱莲草对HBVDNAp有一定的抑制作用。     

舌鳞癌角蛋白单抗的制备与鉴定

目的:以人舌鳞状细胞癌角蛋白组群为抗原,制备了抗舌鳞癌角蛋白单克隆抗体,并对单抗的特异性进行鉴定和免疫组织定位。方法:提取和纯化的舌鳞癌角蛋白免疫小鼠,建立了五株稳定分泌抗体的杂交瘤细胞株。免疫组化方法对18例口腔鳞癌病例进行抗体的特异性鉴定。结果:共获得5株抗角蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞株,分别命名为Lck1-5,免疫鉴定Lck1、Lck3、Lck4、Lck5都可在癌组织及癌转移淋巴结中部分表达,表达阳性细胞位于癌巢中的癌细胞胞浆中。其中以Lck4的特异性和敏感性最高。结论:成功进行了舌鳞癌角蛋白单克隆抗体的制备,其中Lck4敏感度、特异度最高。     

基孔肯雅病毒空斑中和试验的研究

基孔肯雅(Chikungunya简称CHIK)热是一种由蚊媒传播的病毒性传染病。在非洲及东南亚地区常有流行。临床症状与登革热相似,以发热和关节疼痛为主,有时伴有出血现象。我国一些地区血清学调查也发现在人和猪的血清中存在着本病的血凝抑制抗体,为了开展特异性诊断方法,作者进行了CHIK病毒空斑中和试验研究。材料和方法病毒:CHIK病毒引自药品生物制品检定所,以感染乳鼠脑作为种子病毒,保存在     

基孔肯雅病毒空斑中和试验的研究

基孔肯雅(CHIKUNGUNYA简称CHIK)热是一种由蚊媒传播的病毒性传染病,在东南亚一带常有流行,临床症状与登革热相似。为对此病进行实验室诊断,我们研制了高价抗血清,并建立了该病毒空斑中和试验的方法。     

巨大脾包虫病一例

巨大脾包虫病一例兴安盟人民医院普外科王凯陈万荣贾智硕刘广义１临床资料患者，男，５２岁。左上腹肿物１０余年，增长较缓慢，无不适感，４年来时有上腹部隐痛，近１月余发觉肿物增长较快，感觉进食后，胃区胀痛。既往生长在牧区，有牛、羊等接触史。体检：心肺无异常，...     

立克次体的纯化及其分析

本文用斑疹伤寒群和斑点热群立克次体鸡胚培养的感染卵黄囊膜在1MKCl溶液中制成10%～20%悬液,以差速离心沉淀和乙醚处理法提取纯化立克次体.该法纯化的立克次体涂片经Giemsa、H_(33258).荧光素及免疫酶标染色,在光镜下观察,立克次体形态完整,纯度较好.其斑疹伤寒群的普氏立克次体(E株)平均蛋白回收量为0.88mg/g膜,斑点热群的西伯利亚立克次体(Barbash株)和国内分离鉴定的斑点热立克次体精河株、斑点热立克次体黑龙江株及斑点热立克次体内蒙株的平均蛋白回收量为0.34～0.40mg/g膜.纯化的立克次体在核酸提取、DNA碱基成份的测定和全立克次体蛋白组成及抗原多肽构成的分析中取得了满意结果.     

用单克隆抗体分析鉴定登革3型病毒的不同抗原决定簇

登革病毒(DEN)抗原成分复杂,与许多虫媒披膜病毒都有严重的血清学交叉反应。杂交瘤单克隆抗体(Mcab)技术建立之后,Dittmar等人首先制备出了抗DEN-3病毒的McAb,可进行DEN-3病毒的鉴定分型。随后,Henchal等人制备出了抗DEN1-4型病毒的McAb,用这些McAb进行DEN病毒抗原决定簇研究,依据间接免疫荧光染色(IFA)证实了DEN病毒的四种不同抗原决定簇,即:黄病毒属特异的、DEN-1-4型病毒特异的、DEN-1、3型病毒特异的和DEN病毒各型型特异的。阎国珍等人在研究抗DEN-4病毒McAb时,获得了抗DEN-2、4型病毒特异的McAb,证明DEN-2和DEN-4病毒间有共同特异抗原决定簇。本文介绍通过用抗DEN-3病毒McAb对不同披膜病毒抗原交叉反应测定来分析鉴定