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目的 构建小鼠 Krüppel 样因子 4(KLF4)慢病毒表达载体,并建立 KLF4 过表达小鼠腹腔巨噬细胞 RAW264.7 细胞株。方法 采用聚合酶链式反应(PCR)技术扩增目的基因 KLF4 后,构建重组质粒 pLVX-KLF4,并 通过 PCR、双酶切和测序方法对其进行鉴定。重组质粒与 pSPAX2、pMD2.G 辅助质粒通过 Lipofectamine® 3000 共转 染 293T 细胞,包装病毒并测定病毒滴度。将获得的慢病毒感染 RAW264.7 细胞,实时定量 PCR 法检测 KLF4 mRNA 的表达。分选流式细胞仪分选 GFP 阳性 RAW264.7 细胞。流式细胞术检测 KLF4 对 RAW264.7 细胞周期的影响。 EdU 法检测 KLF4 对 RAW264.7 细胞增殖的影响。结果 经 PCR、双酶切鉴定和测序证实,成功构建了包含小鼠 KLF4 基因的慢病毒穿梭质粒,RT-PCR 证实 Lenti-KLF4 感染的 RAW264.7 细胞中 KLF4 mRNA 表达高于未感染的 对照组 RAW264.7 细胞(P<0.05)。初次浓缩后测定小鼠 KLF4 基因重组慢病毒的滴度为 2.05×108 TU/mL。分选出 KLF4 过表达的 RAW264.7 细胞。KLF4 过表达的 RAW264.7 细胞周期变化显示为 S 期延长,G0/G1 期缩短。EdU 检 测显示 KLF4 过表达的 RAW264.7 细胞增殖活性增高。结论 成功构建了 KLF4 的慢病毒表达载体,并建立 KLF4 过表达的 RAW264.7 细胞株,KLF4 过表达促进了 RAW264.7 细胞的增殖。 相似文献
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黏膜下注射加肛门环缩术治疗直肠脱垂38例分析 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:总结直肠脱垂的手术治疗体会。方法:调查我院1997年至2004年直肠脱垂的手术治疗病例91例,分为2组:采用黏膜下注射加肛门环缩术治疗者为综合组,为38例;采用单纯黏膜下注射治疗或单纯肛门环缩术治疗者为对照组,共53例。结果:综合组治愈率为95%,对照组治愈率为79%。结论:综合组治愈率明显高于对照组,且统计中还发现脱垂程度越大综合组治愈率越高于对照组。 相似文献
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据报道,阑尾炎中5%为腹膜后阑尾炎,是较为常见的一种异位阑尾炎。根据其与后腹膜的关系分为两种,即完全腹膜后和部分腹膜后。其临床表现、症状、体征较复杂,术前不易确诊,因而术中术式选择及处理极其重要。 相似文献
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糖尿病和肺癌均是世界范围内的常见病,严重影响人类身体健康。近年流行病学研究显示:糖尿病可能增加肺癌的发病率,是肺癌发生的危险因素之一。二甲双胍作为治疗糖尿病的一线药物,具有降低肺癌发病率的作用,同时其本身可能具有抗肿瘤活性,但其作用机制仍不清楚。深入研究二甲双胍的作用机制,有望降低糖尿病患者肺癌发病率,同时可为肺癌的临床治疗提供新的靶点。文中就二甲双胍抗肺癌的可能作用机制作一综述。 相似文献
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背景:各种神经退行性疾病传统的内外科治疗只能缓解症状而不能阻止疾病的进一步发展,细胞替代治疗近年进展迅速,但是干细胞存在的伦理问题及免疫排斥等问题不容忽视,而诱导多能干细胞的产生为这些问题提供了新的解决途径。目的:综述神经退行性疾病的治疗现状以及诱导多能干细胞作为新的细胞来源治疗神经退行性疾病的可能性。方法:应用计算机检索1995/2010PubMed数据库(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/PubMed)及万方数据库(http://www.wanfangdata.com.cn),英文检索词为"induced pluripotent stem cell,PD,ALS,SMA,degenerative disease",中文检索词为"干细胞,帕金森病"。初检得到文献374篇,根据纳入标准选择29篇文章进行综述。结果与结论:疾病特异诱导多潜能干细胞可保持疾病特异的基因型,有利于疾病分子机制的进一步阐明,且其拥有与胚胎干细胞类似的多向分化能力;在体外动物模型中可分化为多巴胺能神经元,缓解帕金森病的临床症状,在神经退行性疾病的临床治疗方面具有广泛的应用前景。 相似文献
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目的 探讨白细胞计数(white blood cells, WBC)、C反应蛋白(C-reactive protein, CRP)、中性粒细胞/淋巴细胞比值(neutrophil to lymphocyte ratio, NLR)、降钙素原(procalcitonin, PCT)、白介素6(interleukin-6,IL-6)、血沉(erythrocyte sedimentation rate, ESR)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)以及外周血涂片手工分类计数等指标在儿科早期肺炎支原体肺炎(mycoplasma pneumoniae, MPP)和细菌性肺炎中的诊断价值。方法 回顾性选取2022年1月至2023年6月首都医科大学附属北京友谊医院通州院区儿科收治的患儿210例为研究对象,其中MPP组患儿85例,细菌性肺炎组患儿125例。比较两组患儿基线资料、血清学指标及外周血手工分类结果,通过Logistic回归模型筛选与患儿MPP鉴别相关的影响因素,并采用ROC曲线分析相关因素在MPP鉴别诊断中的价值。结果 细菌性肺炎组在WBC、CRP、PCT、I... 相似文献