体外转染Cyclin A2基因对原代大鼠心肌细胞增殖的影响

目的探讨体外转染细胞周期素A2(Cyclin A2)基因对原代大鼠心肌细胞增殖的影响,为心脏再生提供细胞学依据。方法 SD乳鼠12只,分离、培养、鉴定原代乳鼠心肌细胞并分为3组,实验组:转染带有强化绿色荧光蛋白(GFP)和Cyclin A2基因的重组腺病毒(Ad-Cyclin A2-GFP);空病毒组:转染不含目的基因带有GFP的重组腺病毒(Ad-Null-GFP);阴性对照组:未做转染处理,仅加入等量的培养基。利用GFP示踪技术,评估原代心肌细胞转染效率;转染后的细胞继续体外培养3~5d,利用免疫荧光技术分别检测Cyclin A2、磷酸化组蛋白H3(H3P)、心肌肌钙蛋白-T(c Tn T)。结果 1.荧光GFP示踪表明原代心肌细胞的转染效率高达(97±0.74)%;2.免疫荧光标记显示,空病毒组和对照组结果相似;心肌细胞特异性标记蛋白c Tn T分布于细胞质,原代心肌细胞纯度高达(95±0.62)%;心肌细胞Cyclin A2主要在胞核内聚集,少数分布于细胞质。H3P为核蛋白在细胞核内分布。3.转染Cyclin A2后,实验组H3P阳性率明显高于空病毒组和对照组,差异具有统计学意义(P0.05);实验组可见大量多核细胞,以双核为主,伴少量3核细胞。结论腺病毒作为转染载体对原代心肌细胞有很好的侵染效率;Cyclin A2超表达促进原代心肌细胞形成双核。     

成人与新生儿心脏连接蛋白43表达差异

目的　探讨成人与新生儿心脏连接蛋白 4 3(Cx4 3)表达差异。　方法　应用SP免疫组织化学和图像分析方法 ,观测成人与新生儿心脏Cx4 3的蛋白表达。　结果　 1 新生儿心脏Cx4 3在心房和心室均呈斑点状遍布于心肌细胞侧面连接处和细胞质内 ,闰盘处极少。 2 成人Cx4 3表达在心房肌非均质分布于细胞侧面连接处和端闰盘处 ;心室肌典型地排列在闰盘处。 3 图像分析表明 ,心肌细胞Cx4 3分布密度 ,新生儿心房 <心室 ,成人心房 >心室。成人心房、心室均低于新生儿。　结论　新生儿Cx4 3主要分布于心肌细胞侧连接处 ,成人心房和心室存在差异。Cx4 3分布密度新生儿心房 <心室 ,成人心房 >心室 ;成人心脏低于新生儿。提示 ,Cx4 3有增龄变化。     

心房纤颤与心肌细胞凋亡的关系

目的　探讨心房纤颤患者的心房肌细胞是否存在细胞凋亡。方法　利用EdUTP缺口末端标记技术染色和透射电镜观察心房纤颤患者的心房肌组织。结果　心房纤颤患者心房肌少数细胞核不规则 ,核膜有皱褶 ,染色质凝集成颗粒状 ;细胞器密度增加 ,肌原纤维固缩或坏死 ,线粒体脱嵴 ,溶酶体和心钠素颗粒增多 ;有些细胞膜有皱褶。心肌细胞间胶原纤维和纤维细胞增多 ,有些纤维细胞的染色质在核膜下凝集明显。结论　心房纤颤状态下 ,有少部分心肌细胞和纤维细胞有凋亡现象 ,这可能不是房颤的病因而是房颤的结果。     

心脏间隙连接研究现状

目的　探讨心脏间隙连接与心脏疾病的关系。方法　分析近年来有关心脏间隙连接资料和研究结果。结果　心脏间隙连接由连接蛋白组成 ,为心肌的同步收缩提供低电阻传导途径。在心肌质膜处形成紧密成束的聚合体 ,典型地存在于心肌闰盘处。目前已发现连接蛋白有 14种 ,心血管系统主要分布有 :Cx37、Cx40、Cx43、Cx45、和Cx46等。Cx43被认为是心脏特有的连接蛋白。心肌间隙连接的数目、分布和组成在不同动物、同种动物的不同组织及不同发育时期均表现出差异 ,并与各种心脏病的发生密切相关。结论　心脏间隙连接的结构、分布、功能以及心脏发育过程 ,和疾病状态下间隙连接的改变有关。     

人脐带间充质干细胞诱导分化心肌样细胞的研究进展

人脐带间充质干细胞是来源于间充质的多潜能干细胞,易分离,无特异分子标记,在体内、外可诱导分化为心肌样细胞。诱导后,人脐带间充质干细胞内ERK的磷酸化和MEF-2蛋白的表达水平明显升高,进而引发STAT3磷酸化的增加以及MEF-2C和MyoD基因表达的上调,从而激活肌源性以及心肌特异基因的转录,促使人脐带间充质干细胞向心肌方向分化。但其分化机制还有待深人研究。     

p53-Ser~(392)的磷酸化在肿瘤治疗中的作用

磷酸化是p53转录后修饰最常见的方式,但对p53-Ser392的磷酸化在肿瘤治疗中的作用及具体机制知之甚少。我们就p53-Ser392的磷酸化状态对野生型及突变型p53功能的影响、放疗化疗因素及蛋白激酶对p53-Ser392的磷酸化水平的调节和p53-Ser392的磷酸化研究意义进行了阐述。     

基质细胞衍生因子-1α和白细胞介素-1β诱导淋巴管内皮表型的作用

目的探讨基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)及白细胞介素-1β(IL-1β)诱导内皮细胞表达淋巴管表型的作用。方法 SDF-1α和IL-1β分别诱导内皮细胞株CRL-1730,用Real-time PCR、Western blotting及免疫细胞化学等方法检测其内皮及淋巴管标志物,的表达情况。结果 SDF-1α诱导培养之后,CRL-1730细胞株的内皮细胞标志物血管性血友病因子(vWF)、血管内皮钙黏蛋白(VE-cadherin)、血管内皮生长因子受体(VEGFR)2随其浓度增高而表达降低,淋巴管标志物平足蛋白(podoplanin)、同源异形盒蛋白-1(Prox-1)和淋巴管内皮透明质酸受体-1(LYVE-1)随其浓度增高而表达增高。IL-1β诱导之后,CRL-1730细胞株的vWF、VEGFR2和podoplanin、prox-1、LYVE-1的变化趋势同SDF-1α,而VE-cadherin的表达量基本不变。结论 SDF-1α和IL-1β都能够诱导血管内皮细胞表达淋巴管标志物。     

连接蛋白43在正常胎儿和室间隔缺损患儿心脏的表达

目的 探讨正常胎儿和室间隔缺损患者心脏连接蛋白43（Cx43)表达的分布规律。方法 应用SP免疫组化方法。检测10例正常胎儿和5例室间隔缺损患者心肌细胞Cx43的蛋白表达。结果 1、Cx43主要在心室肌表达，心房较少，2、正常胎儿心室肌细胞的Cx43多数分布于细胞表面，少数位于闰盘处，3、室间隔缺损心肌Cx43表达的颗粒细小，分布不均。结论 Cx43的表达在胎儿时期主要位于心肌细胞表面，闰盘处少。室间隔缺损在未出现心功能异常之前对Cx43的表达影响不明显。     

家猪房室交界区的组织学观察

利用石蜡切片 ,HE和 Masson染色 ,光镜观测了 7例猪房室交界区的形态学和组织学特征。家猪房室结位于冠状窦口前方 ,大小为 7.0 2× 2 .6 5× 1.2 9mm3。传导细胞分两类 :1细胞短柱状 ,有时有分叉 ,细胞质内有横纹 ,核相对较大 ,此类细胞多位于结上部和前部 ;2典型的移行细胞 ,多位于结的后部和下部。有 2例存在副房室结。结上部和前部、房室束、右束支内的细胞在形态上介于 Purkinje细胞和心肌之间 ,未见典型的 P细胞。说明猪的传导细胞与其它哺乳动物有差异 ,但不同形式的传导细胞却在履行相同的传导功能