经免疫重建制备的抗胃癌单克隆抗体A12

单克隆抗体(McAb)做为载体在定位诊断及导向治疗应用研究中至关重要。理想的McAb应能与绝大多数靶细胞呈阳性反应,以期减少相应抗原异质表达对靶向治疗的不利影响,同时与正常组织应较少反应,以减少非特异分布和副反应。本文采用SY86B人胃癌裸鼠模型及外源性BALB/c脾细胞免     

p185胞外区基因表达载体的构建

目的 获得p185胞外区基因并与载体相连接,构建重组质粒。方法 从过度表达p185 r NIH3T3-erbB2细胞中提取总RNA,以特异性引物逆转录合成cDNA,再通过PCR扩增出目的基因片断,经酶切后与质粒载体组成重组质粒。用此重组质粒转化大肠杆菌XL1-Blue,在含氨苄青霉素的LB培养基上培养,挑取阳性克隆并鉴定。结果 得到了带有p185胞外区基因的重组质粒。结论 通过逆转录PCR扩增和基因重组到载体pQE40而成功地得到p185胞外区基因表达载体。     

EXPRESSION OF VEGF RECEPTOR KDR IN DIFFERENT ORIGINATED CARCINOMAS

Ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓｉｓｔｈｅｐｒｅｒｅｑｕｉｓｉｔｅｏｆｓｏｌｉｄｔｕｍｏｒｇｒｏｗｔｈ．１Ｄｕｒｉｎｇｔｈｅｐｒｏｃｅｓｏｆｔｕｍｏｒｐｒｏｇｒｅｓｉｏｎ，ｔｕｍｏｒｃｅｌｓｃａｎｓｅｃｒｅｔｅｖａｒｉｏｕｓａｎｇｉｏｇｅｎｉｃｆａｃｔｏｒｓ...     

应用噬菌体随机肽库筛选结肠癌患者血清中的肿瘤标记物的研究

目的用噬菌体随机呔库技术对结肠癌病人血清进行差异性筛选。以获得特异性的肿瘤标志物。方法用噬菌体随机十二肽库与结肠癌病人血清和正常人血清进行淘选．经过几轮吸附和洗脱得到重组噬菌体库。采用ELISA方法进行单克隆鉴定。挑选20个阳性范隆测序获得相同的序列：19B（GSMSRYVRWYIP）。人工合成小肽19B的寡核苷酸序列，并将其与原核表达载体PGEX-4T—I连接。转化大肠杆菌BI-21（DF3），诱导融合蛋白的表达。以Glutathione Sepharose 4B进行纯化。结果用纯化的蛋白包被抗原板检测24例正常人血清和24例结肠癌病人的血清．证实小肽在正常人血清和结肠癌病人血清间存在差异。结论小肽19B有可能作为检测结肠癌的生物标志物。     

分子佐剂TBhsp和MT在肝细胞再生磷酸酶-3(PRL-3)单克隆抗体制备中的作用

目的探讨结核分枝杆菌热休克蛋白(TBhsp)和结核分枝杆菌T细胞刺激表位(MT)在肝细胞再生磷酸酶-3(PRL-3)单克隆抗体(mAb)制备过程中的佐剂作用。方法构建对照质粒pET28a-PRL-3和佐剂-PRL-3融合蛋白表达质粒pET28a-PRL-3-MT、pET28a-TBhsp-PRL-3和pET28a-TBhsp-PRL-3-MT,并纯化其表达蛋白,分别免疫BALB/c小鼠,ELISA检测并比较各组的抗血清效价,选取效价最高的小鼠,采用杂交瘤技术制备PRL-3 mAb,并进行类和亚类鉴定。结果成功构建了上述4种PRL-3相关的重组表达质粒,并表达纯化出相应的融合蛋白,其中PRL-3-MT融合蛋白免疫组抗体效价高于其他组;用该组小鼠进行细胞融合并筛选获得均为IgG类的10株分泌PRL-3 mAb的细胞株。结论 MT在PRL-3 mAb制备中可以发挥较为明显的免疫佐剂作用。     

抗血管内皮细胞生长因子受体单抗的制备及鉴定

目的：制备血管内皮细胞生长因子受体（ｋｉｎａｓｅｉｎｓｅｒｔｄｏｍａｉｎｃｏｎｔａｉｎｉｎｇｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＫＤＲ）的单克隆抗体并鉴定其特异性。方法：在大肠杆菌中表达重组ＫＤＲ融合蛋白。融合蛋白经凝胶分离纯化后免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，取其脾细胞，用传统杂交瘤技术与小鼠骨髓瘤细胞融合及次黄嘌呤、氨基喋呤与胸苷选择性培养。单克隆杂交瘤上清经ＥＬＩＳＡ双筛和ＳＰ免疫组化筛选并鉴定其亚类。结果：经ＥＬＩＳＡ双筛和组化筛选获得了一株能稳定分泌人ＫＤＲ单克隆抗体的杂交瘤细胞株（命名为ＳＳＷ２），其分泌抗体亚类为ＩｇＧ１，产生的腹水效价可达１×１０－６。结论：ＳＳＷ２同血管内皮细胞尤其是肿瘤组织的血管内皮细胞有较强的阳性反应。     

免疫毒素的研究进展

肿瘤的导向治疗开创了肿瘤治疗的新篇章.在众多的导向治疗中免疫毒素发展较为迅速,尤其是利用现代生物技术,分别将起导向作用的载体和杀伤效应的毒素基因进行一系列的改建,然后重组而获得的免疫毒素有了长足的发展,许多免疫毒素已经进入临床Ⅰ,Ⅱ期试验,显示出良好的应用前景.     

乳腺癌患者血清HER-2/neu胞外域的临床意义

乳腺癌患者血清HER-2/neu胞外域(ECD)水平升高与预后差指标如总生存期、无疾病生存期短有关,对激素治疗和某些化疗制剂反应差,但对Herceptin单独或与化疗制剂联合治疗的反应增强。许多研究者赞成检测进展期乳腺癌患者血清HER-2/neuECD水平,因为在转移出现之前常出现血清HER-2/neuECD水平升高,而且血清HER-2/neuECD的变化与疾病临床过程相平行。因此,检测乳腺癌患者血清HER-2/neuECD水平对选择合适的治疗方案及评估预后具有重要意义。     

SNCG 基因的研究进展

synucleinγ(SNCG)，又称为BCSG1(breast cancer specific gene1)或persyn，属于synuclein家庭成员，该家族有3个成员，分别为α—synuclein、β—synuclein和γ—synuclein。近年来的研究发现，SNCG的表达与乳腺癌细胞的生长、浸润、转移和预后有关，该基因在乳腺癌中过度表达，其多拷贝的性质导致肿瘤易转移和临床预后较差。最近发现SNCG与卵巢癌关系密切。