肾综合症出血热病毒单克隆抗体的制备及其特性研究

用肾综合症出血热病毒(HFRSV)陈株免疫获得5株单克隆抗体(McAb)。B_9株McAb具 有血凝抑制和体内保护活性;F_3、H_(11)株McAb具有较弱的中和活性及体内保护活性。B_9株McAb与重型HFRSV毒株的大部份反应,与轻型HFRSV毒株不反应;F_3、H_7株McAb与检测的24个HFRSV毒株都反应。B_(11),F_3、H_7、H_(11)4株McAb可用于酶联免疫吸附试验(FLISA )。     

肾综合征出血热病毒单克隆抗体的制备及其特性研究

用肾综合征出血热病毒(HFRSV)陈氏株免疫获得5株单克隆抗体(McAb).B_9株McAb具有血凝抑制和体内保护活性:F_-3、H_(11)株McAb具有较弱的中和活性及体内保护活性;B_9株McAb与重型HFRSV毒株的大部分发生反应.与轻型HFRSV毒株不反应;F_3、H_7株McAb与检测的24个HFRSV毒株均发生反应.B_(11)、F_3、H_7、H_(11)等4株McAb可用于酶联免疫吸附试验。     

一种简便的针对同种型或独特型决定簇抗球蛋白反应的检测方法

目前临床应用McAb作为免疫抑制或治疗肿瘤疾病已越来越广泛。对于这些病人,检测是否有影响继续使用McAb进行治疗的抗球蛋白应答是重要的。如病人只是产生针对治疗用McAb的独特型的抗球蛋白反应,改用另一种独特型决定簇不同的抗体有可能使治疗继续下去。如仅是针对同种型或同种异型起反应,那么替换一种不同亚类或     

^90Y间接法标记单克隆抗体的实验研究

目的：采用间接法对抗CEA单抗（McAb）及CD45McAb进行^90Y标记,并确定最佳标记条件,为90Y放射免疫导向治疗CEA分泌性肿瘤及急性白血病奠定基础。方法：利用DTPA环酐（cDTPAa）作为络合剂,将^90Y偶联至CEAMcAb与CD45McAb上,确定cDTPAa与抗体偶联的最佳条件,并测定偶联物的免疫活性及在体外的稳定性。结果：在抗体浓度为20mg/ml时,最佳偶联条件为：抗CEA单抗与cDTPAa的摩尔比为1：20,偶联反应中pH值8.2,在最佳偶联条件下,^90Y标记CEAMcAb与CD45McAb的标记率均〉93,放化纯度均〉95,体外稳定性良好,并且两类标记物均保持较好的免疫活性。结论：^90Y标记的CEAMcAb与CD45McAb是较理想的放射免疫靶向治疗制剂,可用于下一步的CEA分泌性肿瘤及急性白血病的治疗研究。     

抗人甲状腺球蛋白单克隆抗体的研制和初步应用

本文采用体细胞杂交瘤技术和酶联免疫吸附试验筛选技术,获得了6株持续分泌抗人甲状腺球蛋白 McAb 的杂交瘤细胞系。这6种 McAb 对人 T_3/T_4、及家兔、小牛、大鼠的甲状腺球蛋白均无交叉反应,但其中4种 McAb 对狗甲状腺球蛋白有不同程度的交叉反应,包括2种 McAb对人甲状腺微粒体也有交叉反应,余2种 McAb 均无交叉反应。将所得杂交瘤细胞接种 BALB/c鼠腹腔,获得高效价的腹水 McAb。本文还以这些 McAb 用免疫组化法,研究和检测病理甲状腺组织中甲状腺球蛋白的可能性进行了初步探索,并讨论了其临床意义。     

肺癌的单克隆抗体

肺癌的组织学分类有四种:扁平上皮癌、腺癌、小细胞癌及大细胞癌。本文主要介绍与肺癌有关的单克隆抗体(McAb)。肺小细胞癌单克隆抗体:McAb TFS-4与神经母细胞瘤等部分脑肿瘤及正常神经组织有交叉反应,但对小细胞癌反应局限。此抗体可用于检查活体组织、痰细胞、胸水细胞。有补体依赖性细胞的损害性。McAb14.18能识别GD_2(disialoganglioside)     

以人IgG作免疫原同时获取抗人γ重链及κ、λ轻链单克隆抗体的研究

本文报道用纯化的IgG免疫BALB/c小鼠,同时获得抗人γ重链及抗κ、λ轻链三种单克隆抗体。经鉴定,抗人γ重链McAb只与IgG反应,不与其它Ig及轻链反应。抗κ及λ链McAb除分别与游离的κ、λ轻链反应外,也与和Ig分子中重链结合的κ、λ反应。免疫电转印法测定,抗γ链McAb识别分子量为50KD的重链抗κ、λMcAb识别分子量为22KD的轻链。将所得抗κ、λ单克隆抗体分别与正常人周血单个核细胞进行反应,染色结果表明κ链表达与λ链表达细胞之比为2∶1;两种抗体配对混合后的反应结果与多克隆抗体Sm Ig一致。实验结果表明所获抗体符合抗γ、κ、λ单克隆抗体的特点。     

单克隆抗体分析西安地区单纯疱疹病毒的抗原性

应用15种抗HSV型共同性和2种分别抗HSV-1和HSV-2型特异性McAb,分析了自西安地区分离出的43株HSV临床株的抗原性。间接免疫荧光试验的结果表明,从宫颈炎病人中分离出的15株HSV除1株为HSV-1外,14株为HSV-2。从口唇、眼部感染分离出的28株HSV均为HSV-1。用15种型共同性McAb对HSV的抗原性分析表明,6种McAb对所有临床株均呈阳性反应,另外9株McAb仅与部分HSV毒株呈阳性反应。43株HSV分离株中22株(51.2％)可与所有型共同性McAb反应,21株(48.8％)仅与部分McAb反应。比较HSV-1和HSV-2分离株与型共同性McAb反应的结果发现,HSV-2毒株的抗原性改变仅发生于3个抗原位点上,而HSV-1毒株的抗原性改变可发生于9个抗原位点上。同时对3株HSV参考株的抗原性分析表明,HSV-2参考株333仅与7种型共同性McAb反应且不与抗HSV-2型特异性McAb反应。研究结果表明,由同一地区分离出的HSV在抗原性上有明显差异,对造成这种抗原性差异的原因有待进一步研究。     

以人IgG作免疫原同时获取抗人γ重链及κ、λ轻链单克隆抗体的研究

本文报道用纯化的IgG免疫BALB／c小鼠，同时获得抗人γ重链及抗κ、λ轻链三种单克隆抗体．经鉴定，抗人γ重链McAb只与IgG反应，不与其它Ig及轻链反应。抗κ及λ链McAb除分别与游离的κ、λ轻链反应外，也与和Ig分子中重链结合的κ、λ反应。免疫电转印法测定，抗γ链McAb识别分子量为50KD的重链抗κ、λ McAb识别分子量为22KD的轻链。将所得抗κ、λ单克隆抗体分别与正常人周血单个核细胞进行反应，染色结果表明k链表达与λ链表达细胞之比为2；1：两种抗体配对混合后的反应结果与多克隆抗体SmIg一致。实验结果表明所获抗体符合抗γ、κ、λ单克隆抗体的特点。     

人体实质性肿瘤的单克隆抗体及其临床应用(文献综述)

<正> 自杂交瘤技术问世以来,现已迅速运用单克隆抗体(McAb)试图解决肿瘤抗原及肿瘤的诊断、治疗等一系列问题。本文主要介绍人体实质性肿瘤McAb的研制近况及探讨用于临床诊断和治疗的可能性。 一、人体实质性肿瘤McAb的研制: (一)已建立的杂交瘤及其McAb的特性:目前制得肿瘤McAb大部分是小鼠骨髓瘤细胞与免疫小鼠的脾脏细胞融合的杂交     

骨髓瘤蛋白(IgDλ)独特型单克隆抗体的制备

本文用从1例骨髓瘤患者(IgDλ)尿中提取的λ链作为抗原,免疫Balb/c小鼠,通过两次融合,分别经3～4次克隆后获得86株分泌单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞,经鉴定其中15株为抗独特型McAb。其中12株仅与同源性λ链和IgD反应,不与正常人λ链,k链,IgG、IgA、IgM、IgD、IgE及白蛋白(HSA)和一系列副球蛋白反应.间接免疫荧光法证明,抗独特型McAb与骨髓瘤患者外周血淋巴细胞和骨髓细胞阳性率高达23%,不与正常人群外周血淋巴细胞和骨髓细胞反应,其中部分McAb与实验室培养的浆细胞瘤株呈现阳性反应.     

抗HSV-1淋巴细胞杂交瘤的建立及应用单克隆抗体对HSV分型

应用HSV-1 SM44株感染的BHK-21细胞及提取的感染细胞膜蛋白抗原免疫BALB/c小鼠。以免疫小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞系Sp2/0融合,经ELISA筛选仅与HSV-1反应的阳性克隆及克隆化,建立了一株产生抗HSV-1型特异性McAb的杂交瘤细胞系(Mad-2)。经ELISA,IF及抗原吸收试验证明,该细胞系的培养上清及制备的小鼠腹水均与HSV-1呈特异性反应,但不与HSV-2反应。ELISA测定McAb Mad-2的腹水效为10~(-7),Ig亚类鉴定为IgG-1。应用Mad-2和抗HSV型共同性McAb 1A12及抗HSV-2型特异性McAbCH-A9,对43株临床HSV分离株做了ELISA及IF分型。结果表明,28株口唇、眼部感染分离株和1株宫颈炎分离株均与1A12和Mad-2反应,不与CH-A9反应,为HSV-1。余14株宫颈炎分离株均与1A12和CH-A9反应,而不与Mad-2反应,为HSV-2。ELISA和IF分型的结果完全一致。本研究提示作者应用的一套抗HSV McAb有可能作为HSV型别鉴定的标准试剂。     

刀豆凝集素单克隆抗体特性分析和初步应用

建立了一株能分泌抗刀豆凝集素(ConA)单克隆抗体(McAb)的细胞株-CA2。ELISA证实所得 CA2 McAb仅与 ConA有反应,而与菜豆凝集素(PHA)、美洲商陆(PWM)、花生凝集素(PNA)、扁豆凝集素(LcA)以及牛血清白蛋白(BSA)都无交叉反应。免疫印迹试验进一步证实该McAb 只能与 ConA 形成免疫沉淀线。该McAb 能抑制 ConA对RLc-802细胞的凝集作用,竞争抑制试验显示α-甲基甘露糖、果糖不能抑制 CA2 McAb与 ConA 的结合,提示它可能是针对 ConA蛋白结合点部位抗原决定簇的 McAb。应用该McAb证实了急性T淋巴细胞白血病细胞株Molt_4、CEM和B淋巴母细胞CCRF-sb以及转化的扁桃腺淋巴细胞表面膜存在有分子量大小不同的 ConA受体,提示同是ConA受体,可能具有不同的生物学功能。     

单克隆抗体在研究绿脓杆菌表面抗原中的应用

McAb与各种免疫化学技术结合,用于分析细胞表面抗原。在交叉免疫电泳中,应用两种不同脂多糖特异的McAb,揭示了在一株绿脓杆菌内存在LPS亚群。为确定微孔蛋白F的表面位置,这种蛋白特异性的四株McAb都显示出能与完整绿脓杆菌细胞作用,在间接免疫荧光试验中产生高强度荧光。在小鼠中,一种F蛋白特异的McAb成功地显示了对绿脓杆菌感染的保护,表明F蛋白是能在活菌内表达的。采用免疫荧光,显示脂蛋白H_2书异的McAb只是在O抗原缺陷的绿脓杆菌变株中能与该蛋白作用。蛋白F特异性McAb能与溴化氰裂解或胰酶及链酶蛋白酶消化的F蛋白片段反应,这充分证明McAb在抗原分析中可用作特异性试剂。根据肽段分析,可测定F蛋白独特抗原决定区域的化学性。     

抗人肺癌单克隆抗体(3D3)的研制及其特性鉴定

本文用人肺腺癌组织免疫的BALB/c小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤Sp2/0细胞融合,获得1株单克隆抗体(McAb 3D3)。Ig类测定为IgG_1型。杂交瘤培养上清液和腹水的效价分别为1∶10~3～10~4和1∶10~6。采用间接免疫荧光法(IFA)观察到McAb3D3主要与肺腺癌细胞株A549和L342反应,与其它组织肿瘤细胞株没有反应。ABC免疫酶染色试验显示McAb3D3主要与肺腺癌组织反应,与正常肺组织没有反应。     

恒河猴对多次注射人单克隆抗体的反应

妨碍小鼠单克隆抗体(McAb)用于人体内治疗的主要原因之一,是机体出现抗小鼠McAb反应。作者用2株抗人巨细胞病毒的IgG_1亚型人McAb(EV2-7和EV1-15)在数月内分别多次注射给5只恒河猴,以研究人McAb对灵长类的致免疫性。发现注射EV2-7的3例恒河猴和注射EV1-15的1例恒河猴,McAb在体内均表现为正常的药理动力学过程。仅在注射EV1-15的另一例恒     

分泌抗骨肉瘤单克隆抗体杂交瘤细胞建株研究

用人体骨肉瘤细胞株HOS-8603脾内一次性免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞 NSO融合,经ELISA和 FIA筛选,获得2株分泌抗人体骨肉瘤单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株(OS-MAb_1)和OS-MAb_2)。用ABC 免疫酶标法检测发现(OS-MAb_1)杂交瘤细胞所分泌的 McAb,除对人体骨肉瘤组织呈阳性反应外,对部分骨巨细胞瘤、软骨肉瘤和尤文氏肉瘤组织呈阳性反应,而对其它肿瘤组织和正常成人及胎儿组织呈阴性反应。同位素~(125)I标记该抗体,在荷人骨肉瘤裸鼠体内定位,发现72小时起到96小时肿瘤放射性影像清晰,放射性积聚高于其他部位。显示OS-MAb_1株所分泌的抗人体骨肉瘤McAb作为定位诊断和导向治疗载体的可能性。     

抗牛型结核杆菌单克隆抗体的制备、鉴定及其纯化抗原的研究

用牛结核杆菌超声抗原及纯蛋白衍生物(PPD)免疫BALB/c小鼠,经融合、筛选和克隆化得到9株稳定分泌单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株,应用抗原蛋白酶消化试验、抗原过碘酸氧化试验、加成试验及免疫印迹分析等,表明9株McAbs所识别抗原决定簇均对蛋白酶敏感,其中2株的抗原决定簇既存在于蛋白质中,又存在于脂类中。9株McAbs所识别的抗原分子量均为30kDa。4株均作用于同一抗原决定簇,其它McAb各作用于另外互不相同的抗原决定簇。免疫电镜观察,McAb 1A3所作用的蛋白质抗原主要分布在细胞内,少量分布于细菌胞壁。9株McAbs除1株外均显示出很强的特异性,其中4株仅与牛型结核茵反应阳性。利用McAb 1A3通过亲和层析柱纯化牛型结核杆菌PPD后,得到亲和层析纯抗原Ag 1A3,它仅与牛型结核杆菌免疫血清反应阳性,与其它分枝杆菌免疫血清反应阴性;对牛型结核杆菌致敏的豚鼠皮肤反应阳性,而与人型及BCG致敏豚鼠皮肤反应阴性。     

单克隆抗体放射免疫显像和治疗副反应初探

报告了应用本科研制的~(131)I-AFP McAb对肝癌RII 33例和RIT 24例,给予的~(131)I-AFP McAb量分别为RII:74～185MBq/IgG 0.1-1mg;RIT:740～2960 MBq/IgG 0.5～5mg,治疗前后检测肝、肾功能,白细胞计数,临床观察给药后有无反应。分析结果33倒RII病人,给药后未见不良反应。24例RIT病人,治疗前后白细胞及肝、肾功能未见显著变化,3例病人出现畏寒,发抖,呼吸急促,心悸等输液反应,持续10～15min后消失,少数病例出现恶心,呕吐和发热。1例患者在二年内共应用4次,均未见不良反应,还讨论了McAb应用后的抗抗体及过敏反应,以及今后改进等问题。     

应用单克隆抗体分析甲状腺球蛋白的抗原性

应用自制的10种抗人甲状腺球蛋白(HTg)单克隆抗体(McAb)对HTg 进行抗原性分析。7种McAb同时结合人和狗的甲状腺球蛋白(Tg),3种 McAb仅结合 HTg。根据竞争结合抑制试验的结果,可将McAb 分成反应性不同的5个组,其中8种 McAb对2-ME 处理的HTg的结合力显著下降,2种 McAb对 SDS 解聚及热变性HTg的结合力下降。Graves′病,桥本氏甲状腺炎等抗HTg自身抗体可抑制6种McAb对HTg的结合。这些结果提示:1.HTg分子上至少存在着5个抗原区域,一些抗原决定簇决定着种属特异性,另一些可能为哺乳动物共有。2.抗HTg McAb可以识别依赖二硫键的抗原决定簇。3.与抗HTg自身抗体反应的一些抗原决定簇,可能分布在一定的抗原区域内。