不同浓度三氧化二砷对哮喘小鼠气道树突状细胞的作用

目的 :研究 3种不同浓度三氧化二砷 (arsenictrioxide,As2 O3)对哮喘小鼠气道树突状细胞 (dendriticcells ,DCs)分布和募集的作用。方法 :BALB c小鼠 5 0只随机分为5组 ,即对照组、哮喘组、低剂量 (1mg kg)As2 O3组、中剂量 (5mg kg)As2 O3组和高剂量 (10mg kg)As2 O3组。采用免疫组织化学染色、计算机图像分析和扫描电镜技术分别检测气道DCs。结果 :对照组小鼠整个肺组织构成了一个NLDC 14 5 +DCs网络 ,NLDC 14 5 + DCs密度从大气道到小气道分别为(5 0 0± 5 0 )个 mm2 到 (6 0± 10 )个 mm2 上皮面积 (P <0 0 5 ) ;哮喘组小鼠肺内NLDC 14 5 + DCs密度较对照组显著增加 (P <0 .0 1) ,但不影响其肺内分布 ;哮喘小鼠经As2 O3处理后 ,肺内NLDC 14 5 + DCs密度显著下降 (P <0 0 1) ,但不影响其肺内分布 ,且三种不同浓度砷剂处理组间无显著性差异 (P >0 0 5 )。结论 :下调肺内DCs密度而不影响其肺内分布 ,可能是As2 O3治疗哮喘的一个重要机制 ;低剂量As2 O3治疗哮喘具有潜在的应用前景。     

胃癌根治术病人围术期异体输血后外周血单核细胞CD40L表达的变化

目的 研究胃癌根治术病人围手术期异体输血外周血单核细胞(PBMCs)白细胞分化抗原40配体(CD40L)表达的变化。方法 胃癌根治术病人30例,随机分为3组,每组10例。A组围术期不输血,B组围术期输入去白细胞的全血,C组围术期输入异体全血。另选10例健康人作为对照。分别在手术前、术后2、5、10 d采外周静脉血5 ml,用Ficoll分离液梯度离心法分离出PBMCs和血浆,将PBMCs置于自身血浆环境中,并在植物血凝素(PHA,20 mg/L)的刺激下进行培养,48 h后收获细胞,用流式细胞术检测CD40L表达。结果 健康人外周血未受PHA刺激时检测不到CD40L的表达,经PHA刺激后CD40L 细胞占CD4 T细胞的百分数为1.7％±0.4％,与三组胃癌病人术前比较差异无显著性(P>0.05)。与术前比较,B组术后2 d PBMCs CD40L表达升高(P<0.05),C组术后各时点升高(P<0.05);与A组比较,B组术后2 d升高(P<0.05),C组术后各时点升高(P<0.05);与B组比较,C组术后各时点升高(P<0.05)。结论 围手术期异体输血可造成免疫抑制,输异体血后CD40L表达增加,且输全血比输去白细胞的全血更明显。围手术期成分输血优于输注全血。     

抗戊型肝炎病毒重组蛋白单克隆抗体的制备和初步应用

目的:制备抗-戊型肝炎病毒的单克隆抗体,并将其用于分析戊型肝炎病毒不同毒株结构蛋白的抗原表位。方法:采用来自墨西哥株(Mexicanstrain)的戊型肝炎病毒重组蛋白(p166Mex)免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,经酶联免疫吸附试验(ELISA)法筛选阳性克隆,并将获得的单克隆抗体与戊型肝炎病毒缅甸株(Burmastrain)和美国株(USAstrain)的重组蛋白(p166Bur、p166US)进行交叉反应测定。结果:最终获得4株能稳定分泌抗-p166Mex的杂交瘤细胞株,即D8G10、E5E12、D4A3、B7E6。其中D8G10,E5E12和B7E6细胞株的培养上清液,还能分别与p166Bur和p166US重组蛋白发生阳性反应。结论:利用已获得的抗-p166Mex单克隆抗体,初步确定3种不同的戊型肝炎病毒重组蛋白(p166Bur、p166US、p166Mex)含有一种共同的抗原表位。     

系统性红斑狼疮患者淋巴细胞亚群早期凋亡的初步研究

目的：检测系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMC)中不同细胞亚群发生凋亡的情况，并初步分析其在SLE发病机制中的意义。方法：取28例SLE患者和性别年龄与之相匹配的20个正常对照者。采用淋巴细胞亚群标志、Annexin-V及碘化丙啶三色荧光标记、流式细胞术检测细胞的早期凋亡。结果：SLE患者体内CD3^ T细胞、CD4^ T细胞和CD8^ T细胞的凋亡百分率均显著高于正常对照组(P＜0．05)。同时，SLE患者T淋巴细胞的死亡百分率也高于正常人。经激素治疗一定时间后，这些细胞亚群的凋亡率会进一步升高(P＜0．01)，但CD4／CD8比值恢复至接近正常人。SLE患考体内CDl9^ B淋巴细胞的凋亡或死亡百分率和正常对照组相比均无明显差别，激素治疗对B细胞凋亡和死亡的影响亦不显著。结论：在SLE患者体内主要是T淋巴细胞凋亡增加，但SLE患者淋巴细胞数目减少不仅仅是因为细胞凋亡所致，死亡细胞数目明显升高也是其中一个重要原因。激素治疗可诱导SLE患者T淋巴细胞进一步发生凋亡，并使T细胞亚群比例有所改善。     

多种底物在免疫金银染色检测抗核抗体试验中的联合应用

将多种底物联合应用于免疫金银染色检测ANA试验,与各底物单独应用比较,可明显改善检测的敏感性与核型显示。其中,两种鼠脏器印片联合应用的结果可与Hep-2细胞的结果相当,三种及四种鼠脏器印片联合应用的结果可与Hep-2细胞和一种鼠脏器印片联合应用的结果相当,且均不使正常人ANA阳性率明显升高。     

临床医学专业学位教育的困境与发展走向

自临床医学研究生、临床医学专业学位教育实施以来，社会评价并不高，甚至存在相当数量的负面评价。究其因，一是源于对临床医学专业学位教育的认识误区，二是源于我国目前临床医学专业学位教育制度本身的缺陷。目前，我国高等医学教育体系尚不完善，专业学位教育、研究生教育及毕业后职业技能基本培训之间关系错综复杂，功能定位不清，形成相互干扰和冲突。建议进一步梳理思路，正确认识专业学位教育、研究生教育和住院医师规范化培训的教育特征与功能定位，建立各自恰当的培养目标与培养模式，最终实现在全国建立先进、科学、完善、与国际接轨的完整的医学教育体系。     

人类疱疹病毒6型刺激人脐带血单个核细胞产生α-干扰素的研究

用生物活性法检测人类疱疹病毒6型(HHV-6)GS株和CN8南京地方株感染的人脐带血单个核细胞培养上清中干扰素(IFN),结果表明感染后24h即可检出,48～72h达到峰值,以后逐渐下降。用IFN-α、β、γ的单抗分别处理感染细胞上清,仅IFN-α的单抗可以显著中和其干扰素活性。双向琼脂扩散试验与对流免疫电泳试验以及耐酸性(pH2.0,1h)、热稳定性(56℃,30min)试验都提示上清中的IFN为IFN-α。     

单核巨噬细胞对HSV－1的抵抗及LPS、BCG对其的影响

以ＨＳＶ－１接种人单核细胞系Ｕ９３７和小鼠腹腔巨噬细胞，通过病毒感染滴度测定，间接荧光抗体试验检测病毒抗原及多聚酶链反应检测病毒基因，在体外实验中研究了单核巨噬细胞对ＨＳＶ－１的抗性及其影响因素。结果证实，Ｕ９３７和小鼠腹腔巨噬细胞均能逐步清除ＨＳＶ－１，从感染中恢复；１０～２０μｇ／ｍｌＬＰＳ处理细胞能削弱细胞的抗性、促进病毒基因表达，而５μｇ／ｍｌＢＣＧ能增强细胞的抗性、加速病毒的灭活和清除。     

环磷酰胺和环孢素A对SLE患者外周血Th细胞亚群免疫调节的作用

目的:探讨环磷酰胺(CY)和环孢素A(CsA)对SLE患者外周血Th细胞亚群的免疫调节作用.方法:以10例重度活动的SLE患者和6例正常对照的PBMC为研究对象,将细胞悬液分为空白组、植物血凝素(PHA)刺激组、PHA CY组、PHA CsA组、CY组和CsA组分别给药,体外细胞培养24 h后,利用三色流式细胞术检测CD4 IL-10 T细胞、CD4 IFN-γ T细胞比例和CD8 IL-10 T细胞、CD8 IFN-γ T细胞等比例,同时记录相应细胞的荧光强度.结果:CsA促进静息和活化状态下PBMC培养中表达CD4 IL-10 T细胞比例增加,同时CD4 T细胞表达IL-10荧光强度增强.CY虽然促进SLE PBMC培养中表达CD4 IL-10 T细胞比例增加,但对CD4 T细胞表达IL-10的荧光强度无明显增强.CsA抑制PBMC培养中表达CD8 IL-10 T细胞的比例,同时CD8 T细胞表达IL-10的荧光强度减弱.而CY虽然抑制SLE PBMC培养中表达CD8 IL-10 T细胞的比例,但CD8 T细胞表达IL-10的荧光强度却是减弱的.CsA对活化状态下正常对照和SLE PBMC培养中表达CD4 IFN-γ T细胞比例的抑制作用优于CY,且CY对SLE患者PBMC培养中CD4 T细胞表达IFN-γ荧光强度抑制作用也是减弱的.CsA和CY均可抑制活化状态下,正常对照PBMC和静息状态下SLE PBMC培养中表达CD8 IFN-γ T亚群细胞的比例,且CY的抑制作用优于CsA.但CY对SLE PBMC培养中CD8 T细胞表达IFN-γ荧光强度的增强作用不如CsA.结论:CsA和CY均能使CD4 T细胞受抑,CD8 T细胞上升.但CsA对T细胞活化,炎症相关细胞因子表达启动的反应更为敏感,免疫调节作用更为显著.