人疱疹病毒6型感染与口腔鳞癌关系的初步研究

目的研究人疱疹病毒6型(HHV-6)感染与口腔鳞癌的关系。方法用间接免疫荧光试验及聚合酶链反应,分别检测口腔鳞癌和对照组患者血清中抗HHV-6 IgG及外周血单个核细胞中HHV-6 DNA序列;用免疫组化染色法检测口腔鳞癌组织标本中HHV-6抗原。结果16例口腔鳞癌患者和16例其他口腔疾病患者血清中抗HHV-6 IgG的阳性数分别为16例和12例,几何平均滴度分别为1:118和1:64,差异有显著意义(P<0.05)。上述两组患者HHV-6 DNA的检出数分别为10例和2例(P<0.05)。其中12例口腔鳞癌组织标本经免疫组化染色检测,9例(9/12)HHV-6抗原阳性,而8例对应癌旁组织中,阳性者仅有2例(2/8),两者间差异有显著意义(P<0.05)。结论HHV-6可能是口腔鳞癌发生的诱因,在肿瘤发生发展中起一定作用。     

EBV-LMP2A重组腺病毒体外转染树突状细胞激发特异性CTL的研究

目的：用EBV潜伏膜蛋白2A(EBV-LMP2A)重组腺病毒转染树突状细胞(DC)激发特异性细胞毒性T细胞(CTL)，分析CTL的特性。方法：用AdS-LaMP2A重组腺病毒转染EBV健康携带者及鼻咽癌患者的DC，与自体来源的外周血单个核细胞(PBMC)混合培养，激发LMP2A特异性CIL。用LDH释放法检测CIL杀伤活性；流式细胞术(FACS)检测培养细胞群体中CD3^ 、CD4^ 、CD8^ 、CD56^ 细胞的组成；生物活性法检测细胞培养上清中IFN-γ含量；RT-PCR分析CTL的FasL mRNA表达。结果：EBV健康携带者及鼻咽癌患者的PBMC，经AdS-LMP2A转染的自体DC两次刺激后，都能诱导出显著的EBV-LMP2A特异的CIL。EBV健康携带者CTL的杀伤活性，随DC刺激次数的增加而逐渐增强，诱导的CTL细胞群体以CD^4 和CD8^ 细胞组成为主，且CD4^ 细胞比例高于CD8^ 细胞，另含少量CD56^ 细胞；在不同时段所诱导的CTL上清中，均含一定量的IFN-γ并随刺激次数和诱导时间的延长呈上升趋势；RT-PCR研究表明，所诱导的CTL有FasL mRNA的表达。结论：以腺病毒载体介导EBV-LMP2A基因转染的成熟DC，在体外能激发较强的LMP2A特异的功能性CTL，可用于EBV相关NPC的免疫治疗。     

心肌损伤修复实验指标：MyoD基因重组腺病毒载体的构建及鉴定

背景：MyoD基因是肌肉转录因子家族成员之一，转染MyoD基因可以启动肌分化过程，使非肌细胞转变为肌细胞。MyoD基因仅在骨骼肌表达，基于心肌细胞和骨骼肌细胞有相同的收缩装置，可以设想将外源MyoD基因诱导坏死心肌局部的成纤维细胞向具收缩功能的骨骼肌细胞转化，可能会成为临床治疗心衰的又一种方法。目的：构建和鉴定MyoD基因重组腺病毒载体，为研究MyoD对心肌损伤的修复作用提供试验基础。设计：单一样本实验。单位：南京医科大学第一附属医院心脏科。材料：实验于2004-09／2005-09在南京医科大学微生物学与免疫学实验室完成。以MyoD基因和非复制型腺病毒表达载体为研究对象。方法：从pEMSV—MyoD质粒上用聚合酶链反应法扩增出MyoD cDNA片段，再通过聚合酶链反应使MyoD基因加上CACC序列接头，经过定向拓扑克隆使目的基因连接到转移载体上，再通过LR酶促反应，将目的基因转移到腺病毒表达载体DNA上，获得MyoD基因重组的腺病毒DNA，用脂质体转染法转染HEK293A细胞，包装扩增出MyoD基因重组的腺病毒。主要观察指标：聚合酶链反应鉴定和DNA测序来证实MyoD cDNA片段大小和序列的正确性，并测定病毒滴度。结果：经聚合酶链反应鉴定和DNA测序证实MyoD基因重组腺病毒含大小正确的目的片段，其DNA序列正确。病毒滴度为1．3&;#215;10^11pfu／mL。结论：成功构建了MyoD基因重组腺病毒载体。     

340例儿童急性呼吸道感染常见病毒病原的检测

目的: 了解小儿急性呼吸道感染(acute respiratory tract infection ARTI)中病毒感染状况,为预防和治疗疾病提供依据?方法:收集2009年5月~2010年4月期间340例确诊为ARTI住院患儿的深部鼻咽分泌物(NPS)临床标本,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测常见的7种呼吸道病毒:呼吸道合胞病毒(RSV)?流感病毒(IFV)?副流感病毒(PIV)?人类偏肺病毒(HMPV)?腺病毒(ADV)?鼻病毒(HRV)和肠道病毒(EV)?统计分析各种病毒所致ARTI的临床特点及流行特征?结果:340例标本中共检出212例阳性,阳性率为62.35%?其中RSV感染为132例,阳性率为62.3%;IFV感染为45例?阳性率为21.3%;PIV感染为13例,阳性率为6.1%; HMPV感染为13例,阳性率为6.1%;ADV感染为4 例,阳性率为1.9%; HRV感染为2例,阳性率为0.9%; EV感染为7例,阳性率为3.3%?结论:本地区诊断为ARTI住院儿童中病毒感染率为62.35%,其中以RSV为主?     

用二种诱生剂相继加入脐全血制备γ型和α型干扰素的研究

报道29批人脐带全血干扰素制备中,对同一份脐带全血先籍助PHA刺激产生IFN-γ,72小时后再用NDV诱生IFN-α,和常规法单独用NDV诱生IFN-α进行比较。经统计学处理二者比较P>0.05,无显著性差异。     

IL－10的研究进展

ＩＬ－１０是近年来发现的细胞素，是由单核巨噬细胞、Ｔ，Ｂ等多种细胞产生和具有多向性生物活性的强的免疫抑制因子，改变机体的免疫应答和ＭＨＣⅡ类抗原的表达，并介导ＴＨｌ和ＴＨ２两类Ｔ细胞之间的相互调节。ＩＬ－１０抑制ＴＨ１介导的ＤＴＨ反应，对临床的器官移植、杭炎症、抗寄生虫病和某些传染病的治疗将有潜在应用前景。     

流行性喘憋性肺炎的流行病学调查

流行性喘憋性肺炎的流行病学调查杜亚平，陈沛文，吴小玲，姚堃，季晓辉，赵有红，陈慎宝１９９２年１～３月间，靖江市部分乡镇发生了流行性喘憋性肺炎（简称流喘肺炎）流行，现将流行病学调查结果报告如下。１材料与方法１．１流行发生期间对乡防保人员紧急培训，拟订统...     

淋巴细胞和单核巨噬细胞培养中单纯疱疹病毒的感染与免疫

人类单纯疱疹病毒(HSV)的感染相当普遍。该病毒的特点在于易形成持续感染,交替出现潜伏和复发。当机体免疫力下降时,潜伏的病毒可活化,播散全身,引起全身性感染;或侵犯脑部,引起疱疹性脑炎,病人多在3周内死亡。病毒在体内潜伏、活化和播散的机制尚未阐明,     

抗SARS冠状病毒M蛋白片段单克隆抗体的制备与初步鉴定

目的:制备抗SARS冠状病毒(SARS-CoV)M蛋白N端1~43氨基酸(aa)单克隆抗体(mAb),并对其特性进行初步鉴定。方法:用纯化的SARS-M/GST融合蛋白抗原免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备抗M蛋白片段的mAb。用间接ELISA法筛选能分泌抗M蛋白片段mAb的杂交瘤细胞株。Westernblot和间接ELISA鉴定所获mAb的特异性,并用小鼠mAb亚类测定试剂盒检测所获的mAbIg亚类。为分析mAb识别位点,进一步将M蛋白片段截短为部分重叠的2段表达,以Westernblot初步定位mAb识别位点。结果:获得1株可分泌特异性抗SARS-CoVM蛋白片段的mAb杂交瘤细胞株(3H9),Ig亚类鉴定为IgG2a,轻链为κ型。Westernblot显示其mAb可特异识别SARS-CoVM蛋白N端1~43aa,间接ELISA证实mAb可与包被于聚苯乙烯微孔板上的SARS病毒全蛋白抗原发生特异性反应,其识别位点位于M蛋白N端16~28aa。结论:成功获得1株抗SARS-CoVM蛋白N端1~43aamAb杂交瘤细胞,并初步定位其识别位点。