骨肉瘤与活化B淋巴细胞融合疫苗的抗肿瘤效应

目的　建立骨肉瘤与活化 B淋巴细胞融合的肿瘤疫苗 ,探讨其生物学与抗肿瘤特性 .方法　以 50 0 g· L-1 聚乙二醇为融合剂 ,将 C3 h小鼠来源的 HGRPT基因缺陷型 LM9骨肉瘤细胞与脂多糖活化的小鼠 B淋巴细胞进行融合 .经HAT选择性培养基筛选后 ,再观察该融合瘤株的体内外生长特性 ,对小鼠的致瘤性以及抗肿瘤活性 .结果　该融合瘤株体外生长缓慢 ,对 C3 h小鼠无致瘤性 ,杂交瘤细胞细胞表达B7(70 .6% ) H- 2 Kb (53.4% ) ,融合疫苗保护的小鼠可获 1 0 0 %无瘤生存 (8/ 8)而 LM9和射线照射后的 L M9对照组小鼠全部死亡 (0 / 8) ,皮下接种融合疫苗治疗的荷瘤小鼠可获得80 %无瘤生存 .结论　活化 B淋巴细胞融合骨肉瘤细胞可能改变其生物学特性 ,对小鼠有较好的预防和治疗作用 ,说明了细胞融合方法构建的肿瘤疫苗具有潜在的应用价值     

构建MYC反应元件修饰hTERT核心启动子引导Fcy1表达的腺病毒载体

目的：构建串联的MYC反应元件修饰人端粒酶逆转录酶（hTERT)核心启动子引导酵母胞嘧啶脱氨酶基因Fcy1表达的复制缺陷型腺病毒载体。方法：将串联的MYC反应元件修饰的hTERT核心启动子及下游酵母胞嘧啶脱氨酶基因Fcy1克隆到穿梭质粒pDC316上，上辅助质粒pBHGlox(delta)E1,3Cre共转染HEK293细胞获得重组复制缺陷型腺病毒并在HEK293细胞中扩增重组病毒。PCR法及斑形成实验鉴定重组腺病毒和病毒滴度。结果：成功获得由6倍和18倍MYC反应元件修饰hTERT核心启动子引导Fcy1基因表达的复制缺陷型腺病毒载体。结论：MYC反应元件修饰hTERT核心启动子引导Fcy1基因表达的腺病毒载体为进一步研究骨肉瘤转录靶向基因治疗奠定了基础。     

医源性腓总神经伤分析

目的：总结40a来收治的48例医源性腓总神经损伤的临床资料，探讨其损伤机制和特点。方法：通过随访，依据其损伤原因和机制分类统计。结果：牵拉压迫伤33例，占69％；手术切割伤12例，占25％。导致腓总神经损伤的原因中以石膏压迫为最多，占37％，牵伸性损伤占31％。结论：骨科医师必须具备丰富的解剖知识和责任心，重在预防，一旦发生损伤，应早期诊断，采用有效的方法及时治疗。     

牛坐骨神经中神经再生抑制物的分离与鉴定

目的 在周围神经内寻找与中枢神经内轴突生长抑制因子有相同生物学活性的神经再生抑制物。方法 取新生小牛坐骨神经提取液经ＳｅｐｈａｃｒｙｌＳ－１００凝胶柱层析,得洗脱峰,再将各峰成分用不同分子的滤管超滤分别得到６组不同Ｍｒ的粗提液,将各组分加入到体外培养的ＰＣ１２细胞中观察细胞生长情况,并检测细胞活性。细胞活力检测指标是ＭＴＴ法细胞活性检测和细胞总蛋白含量测定。结果 有抑制活性的物质主要集中在Ｍｒ〈１     

脊柱手术致硬脊膜损伤213例

1 临床资料 2000-01/2006-01共施行脊柱胸腰椎后路开放手术1109例,术中发生硬脊膜损伤213(男171,女42)例,年龄21～83(平均52.6)岁,术后发生脑脊液漏57例,损伤率19.2%.     

脊髓爆震伤后早期脊髓前角运动神经元的形态学变化

目的:建立脊髓爆震伤动物实验模型,探讨脊髓爆震伤后早期脊髓前角运动神经元形态学变化. 方法:将36只家兔随机分为对照组(A组,n=12) ,6 h实验组(B组,n=12)及24 h实验组(C组,n=12),采用0.9 g单质金属炸药黑索金(RDX)将B,C组家兔炸伤,分别于伤后6 h及24 h两个时间点取材,进行HE染色、甲苯胺蓝染色及银浸染色,观察脊髓神经元形态学改变. 结果:脊髓爆震伤后6 h脊髓运动神经元发生可逆性改变,部分神经元坏死,死亡均数为12.58±2.23,而伤后24 h脊髓运动神经元大量坏死,死亡均数达到了31.52±2.69,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01). 结论:脊髓爆震伤后6 h内脊髓运动神经元以可逆性改变为主,提出早期发现和治疗的重要性.     

重度脊柱畸形的治疗

0 引言 重度脊柱畸形虽然还没有明确定义,但是通常,当畸形角度大于90°时,就称之为重度畸形. 如果畸形角度大于135°,就将其归为极重度畸形. 此类患者通常都有这样的一些特点:年龄小,发病早;畸形发展速度快;肺功能受损严重,身体弱;畸形僵硬,矫正困难;手术风险非常大. 为此,我们从重度脊柱畸形的病因、对机体功能的影响以及治疗进行探讨,以提高对本病的认识.     

酵母双杂交技术筛选与Fbxl16相互作用的蛋白质

目的：寻找体内能够与Fbxl16相互作用的蛋白质，用以揭示该蛋白的功能及其在脊髓损伤修复过程中的作用．方法：通过RT-PCR技术克隆scirrl基因编码区序列，将其克隆入pSos载体以构建质粒pSos-scirrl．把该重组质粒表达的融合蛋白hSos-Fbxl16作为诱饵蛋白，用改良的酵母双杂交技术筛选大鼠脑eDNA文库中能与Fbxl16相互作用的蛋白质，最后用酵母双杂交回转实验对获得的相互作用的可靠性加以验证．结果：成功构建了融合蛋白表达质粒pSos—scirrl之后，筛选出了14个与Fbxl16阳性相互作用的蛋白质；通过回转实验验证，确定其中两个蛋白能与Fbxl16相互作用，分别是cAMP依赖蛋白激酶α型催化亚基（protein kinase，cAMP-dependent，catalytic，alpha，Prkaca）和衣被蛋白复合物ζ亚基（coatomer protein complex，subunit zeta1，Copzl）．结论：Fbxl16和Prkaca的相互作用为解释cAMP通路与脊髓损伤的关系提供了新思路，提示Fbxl16与细胞内物质转运有关．     

TGFβ1抗体复合生物蛋白胶预防术后肌腱粘连

目的:研究TGFβ1抗体复合生物蛋白胶(FG)预防鞘管区屈肌腱粘连的作用和对肌腱愈合的影响.方法:将72只来亨鸡(leghorn)按随机化原则分为单纯TGFβ1抗体(TGFβ1 Ab)组、单纯生物蛋白胶(FG)组、TGFβ1抗体复合FG(TGFβ1 Ab FG)组及生理盐水(NS)组,每组各18只.分别将鸡左足第3,4趾趾深屈肌腱横断,作The 4-strand Cruciate repair缝合,在损伤周围注入药物.术后5 d行早期功能锻炼,在第1,3,8 wk处死取材,分别进行大体观察、组织学检查、生物力学测试.结果:TGFβ1 Ab复合FG组术后3,8 wk,缝合处粘连程度评分、肌腱滑动距离及模拟主动屈曲度均优于其余三组,且差异有统计学意义(P＜0.05).四个处理组的最大抗断裂载荷差异无统计学意义(P＞0.05).结论:TGFβ1抗体复合生物蛋白胶可以有效预防术后肌腱粘连,不影响肌腱的正常愈合进程.