温脉通对VSMC增殖及培养液中SOD MDA的影响

血管平滑肌细胞(VSMC)异常增殖是动脉粥样硬化等疾病的主要病理过程之一，抗VSMC增殖就可有效地防治动脉粥样硬化。本实验选择陈淑长教授临床治疗早期肢体动脉硬化性闭塞症(ASO)的有效方药温脉通。观察其对VSMC增殖及细胞周期的影响，同时测定培养液中SOD活性、脂质过氧化物的含量，探讨该方抑制VSMC增殖、防治ASO的作用机理。     

痰瘀同治方对高脂血清损伤体外培养细胞保护作用的研究

目的 :观察痰瘀同治方保护高脂血清损伤体外培养细胞的作用。方法 :采用高脂血清损伤内皮细胞 ,再给不同浓度中药血清 ,观察生化指标及细胞形态。结果 :痰瘀同治方小、中剂量组明显调节NO、ET、MDA、SOD、TNF含量 ,抑制细胞过度凋亡 ,对损伤的内皮细胞有明显的保护作用。     

清热益气中药对自发性糖尿病大鼠糖代谢、胰岛功能及形态的影响

目的:研究清热益气中药黄连人参对药对自发性2型糖尿病大鼠糖代谢调节及胰岛病理形态的作用。方法:采用高热量高脂饲料喂养诱导GK大鼠,建立自发性T2DM大鼠模型,设立模型组和治疗组,治疗组予黄连人参对药干预4周,并设Wistar大鼠作为空白对照,观察体质量、血糖、空腹胰岛素、糖耐量试验,进行胰腺病理学检测。结果:黄连人参对药组负荷后2 h血糖及血糖曲线下面积均低于模型组,胰岛β细胞指数水平较模型组升高,胰岛病理损伤及纤维化程度较模型组轻。结论:清热益气中药黄连人参可降低糖尿病大鼠血糖水平,改善胰岛功能,促进胰岛细胞损伤修复。     

比较不同传代人骨髓间充质干细胞的生物学特性:推荐第3～6代细胞可用于临床

背景:人骨髓内间充质干细胞含量稀少,且随着年龄增加或体质衰弱细胞数量会逐渐减少,因此进行大量扩增非常必要,但目前关于扩增后各代骨髓间充质干细胞的生物学特性是否相同仍无准确定论.目的:分析比较不同传代人骨髓间充质干细胞的生物学特性,着眼于推荐其应用于临床组织工程的实际需求.设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2008-03/10在北京中医药大学附属东直门医院骨科和中心实验室完成.材料:骨髓间充质干细胞来源于非造血系统疾病的患者骨髓,由北京中医药大学附属东直门医院骨科提供.方法:从患者髂后上棘抽取骨髓,Percoll法分离培养骨髓间充质干细胞.当细胞融合至90%以上时胰酶消化传代,定期在倒置显微镜下观察各代细胞形态变化,取第2代细胞用于指标检测.主要观察指标:细胞形态及免疫表型,MTT检测细胞活性,流式细胞仪分析细胞分裂及凋亡坏死比例.结果:传代培养的骨髓间充质干细胞形态均一,呈梭形、纺锤形,克隆样生长,培养至9代后生长减慢,并出现胞浆空泡化、胞体变大等老化现象.第2代细胞表面标志CD44,CD106,CD105均呈阳性表达,而CD34,CD45则呈阴性.骨髓间充质干细胞增殖到第9代MTT值达到最高,从第10代开始MTT值下降.细胞增殖到1 1代,分裂期细胞数量仍呈上升趋势,但从第6代开始凋亡细胞数量明显增加,第8代以后凋亡细胞数量达到60%以上.结论:通过对各代骨髓间充质干细胞生物学特性分析,推荐使用第3～6代骨髓间充质干细胞用于临床治疗使用.     

溃疡性结肠炎患者肺损害与血清ET-1水平相关性探讨

目的观察溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)患者血清内皮素-1(endothelin-1,ET-1)水平与肺损害的相关性,探讨UC肺损害的机制。方法选择90例2009年11月-2011年3月就诊于北京中医药大学东直门医院消化科门诊UC患者,观察并比较不同病程、病变范围、活动度的UC患者血清ET-1水平,探讨UC患者血清ET-1水平与肺功能各指标的相关性,包括肺活量(vital capacity,VC),用力肺活量(forcedvital capacity,FVC),一秒钟用力呼气容积(forced expiratory volume in one second,FEV1),一秒率(FEV1/FVC),峰流速(peak expiratory flow,PEF),最大中期呼气流速(maximal mid expiratory flow,MMEF),25%、50%、75%肺活量时的最大呼气流速(maximal expiratory flow in25%,50%,75%vital capacity,FEF25%,50%,75%),肺一氧化碳弥散量(diffusion capacity of the lungs for carbon monoxide,DLCO),肺泡通气量(alve-olar ventilation,VA),弥散常数(diffusion constant,KCO),肺总量(total lung capacity,TLC),残气量(residualvolume,RV),功能残气量(function residual volume,FRV),残气量/肺总量(RV/TLC)。另选择30名健康志愿者作为对照组,比较UC组与对照组肺部症状、胸部X线摄片、肺功能、血清ET-1水平及肝肾功能[丙氨酸转氨酶(alanine aminotransferase,ALT),天冬氨酸转氨酶(aspartate aminotransferase,AST),血尿素氮(blood u-rea nitrogen,BUN),血肌酐(serum creatinine,SCr)]。结果 UC组伴有咳嗽、胸闷等肺部症状10例(11.1%),胸部X线摄片异常25例(27.8%),肺功能异常54例(60.0%);UC组ALT升高2例(2.2%),AST升高2例,对照组ALT、AST均正常。UC组与对照组BUN及SCr均正常。与对照组比较,UC组血清ET-1水平升高,差异有统计学意义(P<0.05);各病变范围及活动度组患者血清ET-1水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05);病程≥5年UC患者血清ET-1水平较病程<5年者升高,差异有统计学意义(P<0.05)。UC患者血清ET-1水平与FEF25%及KCO呈负相关,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论血清ET-1水平可以更早地反映UC患者肺损害情况,血清ET-1可能是反应UC肺损害的敏感指标。UC患者肺损害可能与肺小气道阻塞,肺弹性功能减退以及弥散膜受损有关。     

健脑安对大鼠海马神经元糖皮质激素受体的影响

背景:先前实验中已经证实补肾活血化痰中药健脑安可抑制脑缺血再灌注后2～24h内糖皮质激素含量增高,降低高糖皮质激素的促神经细胞凋亡毒性作用。这一作用是否在受体环节也有影响尚不清楚。目的:观察中药健脑安对糖皮质激素受体的干预作用,进一步明确健脑安保护脑缺血再灌注后海马神经细胞的作用靶向;并与复方阿米三嗪进行阳性对照。设计:随机对照动物实验。单位:北京中医药大学中心实验室。材料:实验于2002-07/2003-03在北京中医药大学中心实验室进行。取SD雄性大鼠80只,随机分为假手术组、模型组、治疗组、阳性对照组和拮抗剂组5组,每组16只,每组又分为再灌注2,6,12和24h4个时点,每个时点4只。方法:①给药:除模型组外,其他4组大鼠于造模前7d开始灌胃给药,1次/d。假手术组给予7μL/(g·d)蒸馏水;阳性对照组予复方阿米三嗪7.39mg/(kg·d);治疗组予健脑安(肉苁蓉、石菖蒲、大黄等组成)生药6.7g/(kg·d);拮抗剂组给予糖皮质激素受体拮抗剂米非司酮10g/(kg·d),7μL/g。②给药7d后用大脑中动脉阻塞线栓法制备大鼠脑缺血再灌注模型,假手术组麻醉后,剥离颈总动脉后缝合,不予进栓线。主要观察指标:各组在再灌注相应时间点处死大鼠取脑,利用免疫组化方法观察大鼠糖皮质激素受体蛋白表达的变化,计算CA2区3个200倍视野内阳性细胞数。结果:80只大鼠全部进入结果分析。假手术组糖皮质激素受体表达损伤侧与健侧双侧对称,糖皮质激素受体表达无明显差别。模型组、治疗组、阳性对照组、拮抗剂组损伤侧较健侧糖皮质激素受体表达明显减少,亦明显少于假手术组(P<0.05)。治疗组、阳性对照组、拮抗剂组在再灌注各时间点的糖皮质激素受体表达量无明显变化,各组与模型组相比差异不显著(P>0.05)。结论:健脑安对糖皮质激素受体和糖皮质激素含量的调节有选择性,不能调节糖皮质激素受体的表达,与复方阿米三嗪相似;但健脑安可通过降低血浆和脑组织中糖皮质激素含量,发挥对脑缺血再灌注后的神经细胞的保护作用。     

骨髓间充质干细胞在纳米晶胶原基骨内生长以及成骨潜能*

摘要 背景：纳米晶胶原基骨修复材料是根据仿生原理制备的纳米骨框架材料,其微结构和成分两方面都与天然骨有相似性 ,具有良好的生物相容性。 目的：研究兔骨髓间充质干细胞与纳米晶胶原基骨修复材料体外复合培养的结合程度,以及构建组织工程骨的可行性。 方法：分离兔骨髓间充质干细胞,体外培养、纯化,取第3代骨髓间充质干细胞与纳米晶胶原基骨修复材料体外复合培养,第3,7,20天后激光共聚焦和扫描电镜观察二者复合程度。 结果与结论：骨髓间充质干细胞和纳米晶胶原基骨修复材料复合良好,共聚焦显微镜和环境扫描电镜观察均可见细胞生长;纳米晶胶原基骨修复材料能够作为良好的支架,它能使骨髓间充质干细胞在其内稳定生长。提示骨髓间充质干细胞在纳米晶胶原基骨修复材料内能很好的生长,并且具有成骨潜能。 关键词：纳米晶胶原基骨修复材料;骨髓间充质干细胞;支架;细胞培养;组织工程骨 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2011.03.003     

清开灵注射液对小鼠脑微血管内皮细胞缺氧模型紧密连接蛋白claudin-5的影响

目的 观察缺氧对脑微血管内皮细胞紧密连接蛋白claudin-5 表达的影响及清开灵的干预作用.方法 体外培养Balb/c 小鼠脑微血管内皮细胞,分为正常组、模型组和清开灵小中大剂量组,采用氧糖剥夺24 h 模拟缺血损伤,荧光定量PCR 法检测Claudin-5mRNA 的转录水平,western blot 法检测蛋白表达.结果 缺氧损伤后,Claudin 5mRNA 和蛋白表达水平明显降低（P 〈0.05）;与模型组比较,清开灵小、中、大各剂量组都有改善趋势,其中小、大剂量对基因转录水平提高明显,中剂量对蛋白表达的增强更显著,具有统计学意义（P 〈0.05）.结论 清开灵通过调节紧密连接蛋白claudin-5 表达,改善血脑屏障通透性从而阻抑脑缺血反应过程.     

EDTA-K2抗凝血浆与血清中心脏标志物检测结果的一致性验证

目的确定肌红蛋白(Myo)、肌钙蛋白I(cTnI)和肌酸激酶同工酶(CK-MB)在乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)抗凝血浆与血清标本中的检测结果是否存在明显差异。方法采用亚辉龙iFlash 3000-H化学发光测定仪检测133例患者EDTA-K2抗凝血浆与血清中Myo、cTnI和CK-MB水平。结果血清和血浆Myo、cTnI和CK-MB定性分析结果一致性较好。CK-MB和cTnI检测结果的Kappa一致性检验完全相符,Myo检测结果的Kappa一致性检验不完全相符。cTnI不受所用标本类型的影响,Myo和CK-MB则因标本类型而异。结论EDTA-K2抗凝血浆可作为血清替代标本检测cTnI,但不适合作为血清替代标本检测Myo和CK-MB。如在工作中需要使用EDTA-K2抗凝血浆,实验室应当根据具体情况建立相应的Myo和CK-MB参考区间。     

复方仙贞汤对去卵巢大鼠模型骨密度和骨形态的影响

目的 研究复方仙贞汤对去卵巢大鼠的骨密度和骨形态的影响。方法 3月龄的雌性SD大鼠，普通饲料喂养1周后，随机分为假手术组（Sham）、模型组（OVX）、尼尔雌醇阳性药物对照组、复方仙贞汤小剂量组、复方仙贞汤中剂量组、复方仙贞汤大剂量组。除假手术组，其余都经背部切开后切除双侧卵巢，制造去卵巢模型（OVX），假手术组则背部切开后切除部分脂肪组织再分层缝合。造模完成后，假手术组及模型组用生理盐水灌胃，阳性药物组用尼尔雌醇混悬液灌胃，复方仙贞汤小、中、大剂量组分别给以6．5g／kg、13g／kg、26g／kg大鼠体重（按生药计算）的复方仙贞汤药液，每日固定上午九点灌胃1次。全部动物共持续喂养3个月后处死，测定股骨的骨密度和胫骨骨体积、胫骨类骨表面，类骨质宽、骨吸收表面。结果 复方仙贞汤组和尼尔雌醇组均较模型组的骨密度显著性增高（P〈0．01），而且复方仙贞汤中剂量组与尼尔雌醇阳性对照组接近。与模型组比较，中药组和尼尔雌醇组的骨体积显著上升（P〈0．01），而类骨表面、类骨质宽和骨吸收表面却显著下降（分别P〈0．01）。结论 复方仙贞汤能提高去卵巢大鼠的骨密度和骨体积，减少类骨质宽、类骨质表面、骨吸收表面，提示复方仙贞汤能起到和尼尔雌醇相似的作用，即降低绝经后骨质疏松的高转换率，从而减慢骨质的丢失。