Purification and characterization of the carbonic anhydrase enzyme from Black Sea trout (Salmo trutta Labrax Coruhensis) kidney and inhibition effects of some metal ions on enzyme activity

In this study, the carbonic anhydrase (CA) enzyme was purified from Black Sea trout (Salmo trutta Labrax Coruhensis) kidney with a specific activity of 603.77 EU/mg and a yield of 35.5% using Sepharose-4B-l-tyrosine- sulphanilamide affinity column chromatography. For determining the enzyme purity and subunit molecular mass, sodiumdodecyl sulphate polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) was performed and single band was observed. The molecular mass of subunit was found approximately 29.71 kDa. The optimum temperature, activation energy (E_a), activation enthalpy (ΔH) and Q₁₀ values were obtained from Arrhenius plot. K_m and V_max values for p-nitrophenyl acetate of the purified enzyme were calculated from Lineweaver-Burk graphs. In addition, the inhibitory effects of different heavy metal ions (Fe²⁺, Pb²⁺, Co²⁺, Ag⁺ and Cu²⁺) on Black Sea trout kidney tissue CA enzyme activities were investigated by using esterase method under in vitro conditions. The heavy metal concentrations inhibiting 50% of enzyme activity (IC₅₀) were obtained. Finally K_i values and inhibition types were calculated from Lineweaver-Burk graphs.     

PDE5基因siRNA对人阴茎海绵体平滑肌细胞cGMP的影响

目的:观察PDE5基因小干扰RNA(siRNA)对人阴茎海绵体平滑肌细胞环磷酸鸟苷(cGMP)的影响,为阴茎勃起功能障碍(ED)的基因治疗提供实验依据。方法:使用美国Amb ion公司提供的设计软件设计并合成人PDE5基因的siRNA序列,合成3对PDE5 siRNA和1对阴性对照siRNA,转染人阴茎海绵体平滑肌细胞,同时设定空白转染组为对照组。以酶联免疫法分别检测转染后不同时间(24、48、72、96 h)点海绵体平滑肌细胞内cGMP浓度变化,观察PDE5 siRNA对海绵体平滑肌细胞内cGMP的影响。结果:siRNA1、siRNA2和siRNA3转染后人阴茎海绵体平滑肌细胞cGMP水平显著高于阴性对照siRNA组和空白对照组(P<0.05),在转染后72 h最为显著,siRNA1、siRNA2、siRNA3、阴性对照siRNA和空白对照组cGMP测定值分别为:5.89±0.19、3.52±0.16、2.88±0.08、0.72±0.12、0.60±0.16 pmol/m l,siRNA1组明显高于siRNA2、siRNA3组(P<0.05)。结论:体外化学合成的PDE5 siRNA能有效地增加海绵体平滑肌细胞内cGMP的水平,不同序列siRNA增加cGMP水平的能力不同,为ED的基因治疗提供了新思路。     

上肢骨肿瘤切除后的自体骨移植重建

目的探讨应用自体骨移植对上肢骨肿瘤切除后的骨缺损修复重建的效果。方法1998年8月～2004年3月，收治上肢骨肿瘤切除后的骨缺损16例。男8例，女8例。年龄7～45岁。经病理确诊，肱骨近端尤文肉瘤和骨肉瘤各1例；肱骨远端尤文肉瘤2例；桡骨远端骨巨细胞瘤8例，高分化软骨肉瘤2例，恶性纤维组织细胞瘤和骨肉瘤各1例。2例肱骨近端肿瘤行自体锁骨代肱骨；2例肱骨远端肿瘤行自体腓骨代肱骨；12例桡骨远端肿瘤中，1例行自体髂骨移植，11例行自体腓骨代桡骨进行重建。采用MSTS系统进行术后功能评价。结果2例肱骨近端自体锁骨移植患者分别随访36个月和12个月，术后保持部分肩关节前屈和后伸功能，但外展功能丧失；MSTS评分分别为23分和22分。2例肱骨远端自体腓骨移植患者分别随访4个月和6个月，肘关节功能良好，移植骨连接处已经出现骨愈合；MSTS功能评分分别为24分和19分。12例桡骨远端自体骨移植患者中11例随访6～75个月，功能良好，无明显并发症；1例髂骨植骨的桡骨远端骨巨细胞瘤术后3个月移植骨完全愈合，至今随访75个月，肿瘤无复发。MSTS功能评分18~27分，平均22．6分。结论自体骨移植在上肢骨肿瘤切除后骨缺损的重建，尤其是儿童的骨缺损重建中，是一种较好的方法。     

肾上腺素对氯普鲁卡因硬膜外阻滞患者药效学和药代动力学的影响

目的观察1:20万肾上腺素对3％盐酸氯普鲁卡因硬膜外阻滞患者药效学和药代动力学的影响。方法择期行下腹部手术患者20例,ASAⅠ或Ⅱ级,随机分为2组(n=10):盐酸氯普鲁卡因组(C组)和盐酸氯普鲁卡因加肾上腺素组(CE组)。分别用3％氯普鲁卡因6 mg·kg-1(C组)和含 1:20万肾上腺素3％氯普鲁卡因6 mg·kg-1(CE组)硬膜外阻滞,记录局麻药的起效时间、运动阻滞起效时间和给药后20min时运动阻滞程度;分别在给药前及给药后3、6、9、11、13、15、17、20、30、45、60、 90min采取桡动脉血1．5ml,高效液相色谱法检测血浆氯普鲁卡因浓度,经计算机软件拟合血药浓度 -时间曲线,并计算各项药代动力学参数。结果两组局麻药的起效时间、运动阻滞起效时间和运动阻滞程度差异无统计学意义。C、CE组血药浓度峰值(Cmax)分别为0．49±0．47、(0．32±0．22)mg· L-1,达峰值时间(Tmax)分别为8±3、(9±4)min;血药浓度曲线下面积(AUC)分别为10±6、(7±4)μg· min·ml-1;清除速率常数(K)分别为0．32±0．21、(0．36±0．32)min-1;两组间Cmax、Tmax、AUC及K比较差异无统计学意义(P>0．05)。结论 1:20万肾上腺素对3％盐酸氯普鲁卡因硬膜外阻滞的药代动力学和药效学没有影响。     

骨髓移植术后急性肠道移植物抗宿主病内镜及病理学诊断研究

目的评价内镜和病理学诊断在急性肠道移植物抗宿主病(GVHD)中的作用。方法回顾性总结和分析2001—2005年北京大学人民医院血液病学研究所临床已确诊的23例急性肠道GVHD患者的内镜及病理学资料。结果内镜下表现可分为:黏膜大致正常、血管纹理模糊或消失、弥漫性黏膜充血、水肿和脆性增加,重者出现糜烂、溃疡,甚至黏膜脱落或出血;病理学表现提示:隐窝上皮细胞凋亡、缺失,隐窝结构破坏,上皮和黏膜固有层不同程度的淋巴细胞浸润。结论内镜和病理学检查可以用于急性肠道GVHD的诊断,尤其是内镜在急性肠道GVHD的早期诊断方面具有重要作用,同时结合病理学检查最终确立诊断。     

非孕期子宫肌瘤红色变性40例分析

目的 了解非孕期子宫肌瘤红色变性的临床特征。方法 本组回顾分析了1993年1月～2001年2月间住院手术治疗40例非孕期子宫肌瘤红色变性的临床病理特征。结果 非孕期子宫肌瘤红色变性发生率为2.3%。生育年龄多见，绝经后也可发生。有典型表现者2例，占5%，非典型下腹隐痛而无发热者7例，占17.5%，肌瘤结节局部压痛者12例，占30%，无任何症状者30例，占75%，白细胞升高占10例，25%。90%的红色变性肌瘤直径在5cm以上，77.5%为壁间肌瘤。68.6%有典型牛肉样改变，54.8%旋涡状结构存在。65%为单纯红色变性，余35%可合并其他类型变性。结论 非孕期子宫肌瘤红色变性临床过程缓和，症状不典型，易漏诊，不作为手术指征，但因子宫肌瘤往往较大，多需手术治疗。     

高危患者降压治疗:重视控制血压底线

高血压高危患者的降压治疗既需降低血压，又需保持足够血流以保障器官灌注。血压降低过度无疑也有一定风险，因此控制皿压需要底线。高危高血压患者的个体差异大，在降压治疗过程中，临床医生既要以循证医学为鉴，叉须遵循个体化治疗原则，把握好降压幅度和速度，坚持高质量平稳降压，才能更好地保护靶器官，减少心脑血管意外的发生。     

冠心病危险因素与冠状动脉病变程度的相关性研究

目的:探讨冠心病危险因素与冠状动脉病变程度的关系.方法:选取150例冠心病患者行冠状动脉造影术及各项化验检查,冠状动脉病变程度以Gensini积分值表示,对冠心病危险因素和冠状动脉病变程度进行统计分析.结果:经多因素线性回归证实:非高密度脂蛋白胆固醇为冠状动脉病变程度的独立危险因素(P=0.030),而性别、年龄、空腹血糖、糖尿病、高血压、吸烟、家族史及甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇均与冠状动脉病变程度无明确相关.结论:非高密度脂蛋白胆固醇对冠状动脉病变严重程度具有重要的影响.