特立帕肽通过cAMP/PKA/CREB信号通路调控高糖微环境下的成骨细胞分化

目的 探讨特立帕肽对高糖微环境下小鼠胚胎成骨细胞（MC3T3-E1）分化的影响及作用机制。方法 将MC3T3-E1细胞分为正常糖组（NG,5.5 mmol/L葡萄糖）、NG+特立帕肽组（5.5 mmol/L葡萄糖+10 nmol/L特立帕肽）、高糖组（HG,25 mmol/L葡萄糖）、HG+特立帕肽组（25 mmol/L葡萄糖+10 nmol/L特立帕肽）和HG+特立帕肽+PKA抑制剂组（25 mmol/L葡萄糖+10 nmol/L特立帕肽+20 μmol/L H-89）。CCK-8法检测细胞增殖;ELISA实验检测各组cAMP水平;试剂盒检测碱性磷酸酶（ALP）活性;茜素红染色检测细胞矿化结节生成情况;鬼笔环肽染色后观察细胞骨架;Real-time PCR检测细胞中PKA、CREB、RUNX2和Osx的mRNA表达水平。结果 各组细胞增殖能力差异无统计学意义（P>0.05）。与NG组相比,NG+特立帕肽组细胞cAMP水平升高（P<0.05）,ALP活性增强（P<0.05）,茜素红矿化结节生成能力增强（P<0.05）,细胞骨架清晰程度有所提升,PKA、CREB、RUNX2和Osx的mRNA表达上调（P<0.05）;与NG组相比,HG组的上述检测结果则呈减弱趋势。与HG组相比,HG+特立帕肽组细胞cAMP水平上升（P<0.05）,ALP活性增强（P<0.05）,茜素红矿化结节生成能力增强（P<0.05）,细胞骨架清晰程度有所提升,PKA、CREB、RUNX2和Osx的mRNA表达上调（P<0.05）。与HG+特立帕肽组相比,HG+特立帕肽+H-89组细胞cAMP水平下降（P<0.05）,ALP活性减弱（P<0.05）,茜素红矿化结节生成能力减弱（P<0.05）,细胞骨架清晰程度下降,PKA、CREB、RUNX2和Osx的mRNA表达下调（P<0.05）。结论 特立帕肽可通过激活cAMP/PKA/CREB信号通路有效改善高糖微环境对MC3T3-E1细胞分化的抑制作用。     

唐山市大气PM2.5引起居民健康危害的经济学评价

目的 了解唐山市PM2.5污染对唐山市市区人口造成的健康危害,估算由于PM2.5造成的健康经济损失。方法 收集唐山市2013—2017年基本社会人口资料与大气PM2.5浓度。选择循环系统疾病住院等为健康效应终点,选用适当的暴露-反应关系,采取疾病成本法与支付意愿法相结合的方法评估PM2.5造成的健康效应的经济损失。结果 2013—2017年PM2.5污染造成的经济损失呈现逐年下降的趋势,其中2013年最高,为6.57亿元,占当年GDP的0.27%,2017年最低,为2.97亿元,占当年GDP的0.13%。结论 唐山PM2.5污染造成的健康损失呈现逐年下降的趋势,但数字仍然非常可观,需要进一步加强对PM2.5污染的监控与治理。     

基于数据挖掘的低增生性骨髓增生异常综合征与再生障碍性贫血分类模型研究

目的 构建低增生性骨髓增生异常综合征（hypo-MDS）与再生障碍性贫血（AA）鉴别诊断的决策树、贝叶斯、卷积神经网络、改进的支持向量机四种模型并选择出最优模型。方法 收集2010—2019年华北理工大学附属医院的AA与hypo-MDS患者的病例资料,使用统计学方法筛选指标,将处理后的样本以4[DK]∶1随机分为训练集和测试集,构建决策树、贝叶斯、卷积神经网络、改进的支持向量机四种模型,采用五折交叉验证法多次重复验证,通过灵敏度、AUC等指标评价鉴别诊断效果。结果 hypo-MDS患者红细胞、血红蛋白含量等指标低于AA患者,成熟单核细胞比例等指标高于AA患者,年龄和职业分布也存在差异(P＜0.05）;最终选出21个特异性指标。四种模型的分类效果比较:灵敏度分别为82.56%、65.12%、87.21%、79.07%;AUC分别为0.81、0.68、0.82、0.83;准确率分别为75.32%、69.48%、77.27%、74.03%。对卷积神经网络的误判病例分析得出年龄、血成熟淋巴细胞等7个指标均存在差异（P＜0.05）。结论 在决策树、贝叶斯、卷积神经网络、改进的支持向量机四种诊断模型中,卷积神经网络具有最佳分类效果。     

核辐射损伤患者院内护理救治能力量表的编制及信效度检验

目的 编制核辐射损伤患者院内护理救治能力量表,为提高护士的核辐射损伤患者护理能力提供评价依据。方法 采用文献查阅、组织访谈和专家咨询编制量表方法,随机选取某三甲医院330名临床护士作为研究对象,发放量表,进行条目分析及信效度检验。结果 本量表共分为核辐射损伤基础知识、专科装备使用能力、专科病区管理能力、基础护理能力、专科护理能力、自我能力认可6个维度,51个条目。探索性因子分析后,共分为6个主成分,累计解释方差为70.757%。验证性因子分析的χ²、df、χ²/df、CFI、IFI、TLI、NFI、PNFI、PCFI、RMSEA拟合指标均可接受。Cronbach’s α系数为0.976,重测信度为0.823。全体一致S-CVI（S-CVI/UA）为0.84,评价内容效度S-CVI（S-CVI/Ave）为0.98,条目水平内容效度I-CVI为0.78～1.00;结论 本量表的条目及维度设置经检验,各项指标符合要求,信效度检验结果良好,可作为核辐射损伤患者院内护理能力初步评价量表。     

膜辅助蛋白CD46 rs1970530遗传变异对肝癌发病风险的影响

背景与目的：膜辅助蛋白CD46可保护宿主细胞免受补体依赖的细胞毒性作用，研究表明，CD46可能作为肝细胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）患者的潜在生物标志物。探讨CD46基因表达及启动子区遗传变异与HCC发病风险的关系。方法：通过基因表达谱交互分析（gene expression profiling interactive analysis，GEPIA）在线网站分析HCC组织和正常肝组织CD46表达的差异；2011—2015年在华北理工大学附属唐山市工人医院和华北理工大学附属唐山市人民医院经病理学检查确诊且未经放化疗的240例HCC患者作为病例组，对照组为同时期入院体检的500名健康人群。采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析（polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism，PCR-RFLP）法进行基因分型，检测两组基因型频率和等位基因频率，评估CD46 rs1970530遗传变异与HCC发病风险的关系。结果：CD46在HCC组织与正常组织中的表达差异有统计学意义（P<0.05）。经非条件logistic回归分析发现，CD46 rs1970530至少携带一个G等位基因型在病例组及对照组之间差异有统计学意义（OR=0.666，95% CI：0.448~0.990，P<0.05）；两组间等位基因G频率差异有统计学意义（OR=0.689，95% CI：0.478~0.994，P<0.05）。分层分析结果显示，至少携带一个G等位基因者可降低高年龄组（>60岁）（P=0.048）和男性（P=0.023）人群的HCC发病风险，在女性和低年龄组（≤60岁）中差异无统计学意义（P>0.05）。按吸烟状态进行分层分析，rs1970530变异与HCC易感性无明显关联（P>0.05）。结论：HCC中CD46基因高表达及CD46 rs1970530遗传变异影响HCC发病风险。     

中性粒细胞胞外诱捕网在抗寄生虫免疫中的作用研究进展

中性粒细胞胞外诱捕网（neutrophil extracellular traps, NETs）是活化的炎性中性粒细胞在感染或炎症应答期主动释放的一种串珠样纤维网状物质,由染色质DNA和多种胞内蛋白成分组成,可通过缠绕致病菌限制其扩散,同时通过各种抗菌蛋白杀伤致病菌,被认为是中性粒细胞除吞噬和脱颗粒作用外的第三种杀菌机制。近年研究显示,NETs也参与抗寄生虫免疫过程。本文就NETs在抗寄生虫免疫中作用的研究进展作一综述,以期为寄生虫病发病机制研究以及相关治疗药物开发提供参考。     

蓝氏贾第鞭毛虫α-19贾第素的单克隆抗体制备与亚细胞定位研究

目的 制备蓝氏贾第鞭毛虫(Giardia lamblia,简称贾第虫)α-19贾第素的特异性抗体,并通过免疫荧光对该贾第素的亚细胞定位进行鉴定。方法 经PCR获得α-19贾第素编码区片段,双酶切将目的 片段连入原核表达载体pET-28a(+)-α-19,重组载体转化E.coli Rosetta(DE3),IPTG诱导表达,SDS-PAGE及 Western blot验证表达情况;采用设计的合成抗原肽免疫小鼠经细胞融合和筛选制备特异性单克隆抗体,分别用贾第虫滋养体裂解物和α-19贾第素重组蛋白Western blot验证抗体特异性和结合力,选择特异性最好的单克隆抗体通过免疫荧光技术对α-19贾第素的亚细胞定位进行观察。结果 成功构建了原核表达载体pET-28a(+)-α-19,经SDS-PAGE及 Westernblot分析显示重组载体在大肠杆菌中表达出相对分子量约49 kD的重组蛋白,与理论值相符;Western blot显示单克隆杂交瘤细胞株α-19-3-7-3-5分泌的抗体结合力和特异性俱佳,可用于定位研究;免疫荧光定位结果表明α-19贾第素主要位于贾第虫滋养体的腹鞭毛。结论 制备了α-19贾第素的特异性单克隆抗体,免疫荧光显示α-19贾第素定位于贾第虫滋养体的腹鞭毛。     

唐山市苯丙酮尿症患儿筛查及PAH基因突变情况分析

摘要：目的　分析唐山市苯丙酮尿症（PKU）患儿筛查结果及苯丙氨酸羟化酶（PAH）基因突变的情况。方法　选取2015年1月—2018年12月唐山市新生儿303 777例,通过茚三酮免疫荧光法检测新生儿足跟血中苯丙氨酸（PA）含量。再利用聚合酶链反应（PCR）和基因测序的方法对筛查出的PKU患儿PAH基因进行检测。结果　303 777例新生儿初步筛查共发现609例可疑阳性,召回其中411例（67.49%）进行复查,确诊42例（13.8/10万）。42例PKU患者的PAH基因测序显示,在84条染色体上共检测到62个（73.81%）12种突变,其中错义突变8种,无义突变2种,缺失突变1种,剪接突变1种。患者PAH基因突变分布在第2、3、6、7、9外显子上,其中第7外显子最多（35个,56.45%）,其次为第3外显子（14个,22.58%）。最常见的突变基因为Exon7-R243Q（18个,29.03%）和Exon3-R111X（10个,16.13%）、Exon7-R261Q（10个,16.13%）。筛查中发现1例典型PKU患儿,该患儿在PAH基因外显子区域同时发现2处杂合突变：c.208-210delTCT（缺失突变）和c.964G＞A（鸟嘌呤＞腺嘌呤）。结论　唐山市新生儿PKU发病率略高于全国,PAH基因突变以错义突变为主,第7外显子是唐山市患儿PAH基因高频突变位点。     

玉泉丸HPLC指纹图谱的建立及6个成分定量分析

目的建立玉泉丸HPLC指纹图谱,并同时测定玉泉丸中6种成分含量,为玉泉丸质量控制提供科学依据。方法采用HPLC法,Symmetery C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相梯度洗脱,体积流量1.0m L/min,柱温30℃。建立11批玉泉丸HPLC指纹图谱,用中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件(2012A版)、聚类分析及主成分分析进行评价,同时测定葛根素、大豆苷元、毛蕊花糖苷、五味子醇甲、甘草酸及甘草苷的含量。结果建立了玉泉丸的HPLC指纹图谱,标定了共有峰12个,各批相似度均在0.9以上。多成分定量分析条件通过方法学考察,6个成分加样回收率均在92.06%～109.34%,RSD均在0.22%～2.76%。11批玉泉丸中葛根素、大豆苷元、毛蕊花糖苷、五味子醇甲、甘草酸及甘草苷含量范围分别为0.838～2.777、0.550～1.014、0.312～0.618、0.023～0.092、1.154～1.674、0.035～0.052 mg/g。结论 HPLC指纹图谱结合多成分同时测定的方法,快速、简便、重复性好,可为玉泉丸的质量控制提供方法学参考。     

唐山市高龄老年人日常生活照顾需求现状及影响因素分析

目的了解河北省唐山市高龄老年人日常生活照顾需求情况并分析其影响因素。方法于2016年7月—2017年1月采取分层随机整群抽样的方法,选取河北省唐山市工人医院和唐山市弘慈医院直属10个卫生服务中心下属的32个社区(分布于唐山市区东南西北中),对在社区登记户籍的年龄≥75岁的3 448位居民应用日常生活照顾需求问卷、The CFAI衰弱综合评估量表、孤独量表、社会支持评定量表进行问卷调查。结果对日常生活照顾无需求者1 784人(51.7%),轻度需求者860人(24.9%),重度需求者804人(23.3%),需求率48.3%。其中,需求项目中需求率前5位依次为使用公共车辆(38.7%),做饭菜(32.4%),购物(31.8%),做家务(31.7%),洗衣(28.0%)。有序logistic回归分析显示,较低年龄(OR=0.263)、空巢(OR=0.591)、高社区活动参与度(OR=0.366)、高月收入(OR=0.324)、低孤独感(OR=0.022)、衰弱程度轻(OR=0.179)、认知功能好(OR=0.269)、无慢性病(OR=0.490)为日常生活照顾需求的保护因素;接受居委会提供服务低(OR=1.631)、自评健康差(OR=14.850)、与子女交流少(OR=2.012)、无医保(OR=1.761)为日常生活照顾需求的危险因素。结论高龄老年人日常生活照顾需求者近半,形势堪忧,应建立完善照顾服务体系,以满足老年人日常生活照顾需求,提高其生存质量。