二氧化锆梯度复合羟基磷灰石生物材料对大鼠成骨细胞体外活性的影响

目的探讨二氧化锆（ZrO2）梯度复合羟基磷灰石（HAP）生物陶瓷材料体外对原代大鼠成骨细胞活性的影响。方法以纯ZrO2材料为对照，测量两种材料的表面粗糙度，并用扫描电镜、X射线衍射仪对复合材料进行分析；体外将新生SD大鼠颅骨分离培养的成骨细胞直接于两种材料上培养；用对硝基酚磷酸盐法测定成骨细胞碱性磷酸酶（ALP）活性；酶联免疫（ELISA）法检测成骨细胞分泌白细胞介素（IL）-6和转化生长因子（TGF）-β的水平；RT—PCR法检测成骨细胞TGF—β的mRNA水平；扫描电镜观察成骨细胞与两种材料的体外复合情况；用复合材料的浸提液进行细胞毒性实验，计算相对增殖率（relative proliferationrate，RGR）及毒性分级。结果梯度复合材料的表面粗糙度明显高于对照材料（P〈0．01）；梯度复合材料组成骨细胞不同时间点的ALP活性显著高于对照组；培养2～4d，两组细胞IL-6和TGF-β的分泌水平差异也有统计学意义（P〈0．05，0．01）；两组在TGF—β mRNA水平差异也有统计学意义（P〈0．01）；14d后，梯度复合材料表面的成骨细胞骨化明显。四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法检测，阴性对照组与材料组的毒性级分别为0级和Ⅰ级，差异无统计学意义（P〉0．05）。结论ZrO2梯度复合HAP生物材料明显促进体外培养的大鼠成骨细胞增殖和分化，具有较好的生物相容性。     

细菌氧化还原蛋白azurin诱导U2OS细胞凋亡过程中caspase-3的活化

目的:探讨细菌氧化还原蛋白azurin 诱导人骨肉瘤细胞U2OS凋亡过程中是否有caspase-3 的活化。方法:Annexin-V/PI FCM 检测细胞凋亡情况,用Western blot 分析caspase-3 酶原的变化,半定量RT-PCR 检测caspase-3 mRNA 水平的改变,比色法测定caspase-3 的相对活性。结果:用0、25、50、100、200 mg/L azurin处理U2OS细胞24 h,随药物浓度的增加,caspase-3 酶原的蛋白水平减少,caspase-3 的mRNA 水平增加(P<0.01) 。用100 mg/L azurin分别处理细胞3、6、12、24、48 h,caspase-3活性于6 h开始升高,24 h 达高峰(为对照组的7.2倍,P<0.01),48 h 仍高于对照组(P<0.01);用不同浓度的azurin 处理细胞,caspase-3 活性呈浓度依赖性升高。结论:Azurin诱导人骨肉瘤U2OS细胞凋亡过程中有caspase-3 的活化,caspase-3在azurin诱导的骨肉瘤细胞凋亡机制中发挥了重要的作用。     

脑腱性黄色素瘤病一例报告

男,38岁,双侧跟腱部肿块2年,活动受限1年余入院.体格检查:跛行,双侧跟腱部可扪及肿块,约3 cm×8 cm×1cm,边界清,无红肿、压痛,可随跟腱屈伸而活动,患肢末端血运及活动良好,痛觉、触觉正常,跟膝胫试验阳性,Babinski征及Hoffmann征阳性.双上肢活动好,肌力、肌张力正常.X线片及MRI示左侧跟腱及腓骨长短肌肿块,右侧跟腱及腓骨长短肌腱、胫骨前后肌腱肿块,考虑黄色素瘤.     

基于三柱理论的选择性柱融合术治疗Lisfranc损伤畸形愈合的中期疗效分析北大核心CSCD

目的分析采用基于三柱理论的选择性柱融合术治疗Lisfranc损伤畸形愈合的中期疗效。方法回顾性分析2011年1月至2020年1月于浙江大学医学院附属第二医院骨科行选择性柱融合术治疗的28例Lisfranc损伤畸形愈合患者资料。男18例,女10例;年龄平均37.2岁(18~65岁);左侧12例,右侧16例;根据Myerson三柱分型理论分型:内侧柱损伤(A型)1例,中间柱损伤(B型)4例,内侧柱合并中间柱损伤7例,三柱损伤16例。内侧柱融合7例,中间柱融合4例,内侧柱+中间柱融合17例。比较术前、末次随访时美国足踝外科协会(AOFAS)的中足评分、疼痛视觉模拟评分(VAS)评估改善情况,并记录手术相关并发症。结果所有患者均获随访,时间平均为35.6个月(18~60个月)。AOFAS的中足评分由术前(43.1±4.1)分(32~62分)升至末次随访时(84.1±7.4)分(78~94分),VAS评分由术前(5.7±1.3)分(6~9分)降至末次随访时(2.0±0.9)分(0~3分),差异均有统计学意义(P<0.001)。28例患者伤口均愈合,其中3例患者术后伤口渗出,经换药后获得延迟愈合。无患者出现腓深神经损伤、深静脉血栓形成等并发症。5例患者于融合术后1年左右取出内固定。结论基于三柱理论的选择性柱融合术治疗Lisfranc损伤畸形愈合,可获得满意的中期疗效。     

可溶性AZURIN分子重组子构建对人骨肉瘤U2OS细胞的杀伤和诱导凋亡

目的:研究可溶性细菌氧化还原蛋白AZURIN对人骨肉瘤U2OS细胞的生长抑制效应及凋亡诱导作用.方法:用PCR方法由假单胞菌染色体DNA扩增AZURIN基因片段,将其融合插入原核表达载体pQE30中,并在M15大肠杆菌表达可溶性的AZURIN蛋白.该蛋白经纯化和复性后,诱导人骨肉瘤U2OS细胞,通过MTT法、Hoechest 33258荧光染色法及倒置显微镜观察凋亡细胞;流式细胞仪分析细胞周期、凋亡率、线粒体膜电位变化和DNA断裂实验检测细胞增殖和细胞凋亡.结果:AZURIN的蛋白纯度达99.1%以上.用50～200 mg/L的蛋白诱导人骨肉瘤U2OS细胞12 h以上细胞的生长和增殖被显著抑制,并且观察到典型的凋亡细胞、凋亡小体、凋亡峰及DNA的片段化等凋亡的特征性变化,线粒体跨膜电位随着AZURIN作用的时间和浓度的增加而逐渐降低,对照组和50 mg/L AZURIN、100 mg/L AZURIN、200 mg/L AZURIN组细胞线粒体跨膜电位分别降低(7.76±0.47)%、(9.01±0.87)%、(24.13±2.12)%、(37.48±3.59)%(P<0.01).细胞的凋亡率也呈剂量依赖和时间依赖关系,作用48 h时凋亡率达峰值(35.8±3.78)%.结论:利用大肠杆菌制备的小分子蛋白AZURIN对人骨肉瘤U2OS细胞有明显的增殖抑制效应和凋亡诱导作用,线粒体途径可能是AZURIN诱导细胞凋亡的机制之一.     

垂直动态冲击下骶孔骨折伴神经根损伤的生物力学研究

目的：探讨垂直冲击下骶孔骨折伴神经根损伤的生物力学特点。方法：采集人体新鲜骨盆骨骼标本10具，行动态冲击试验。测量动态骨折时的一系列动力学参数，确定骨折的动力学特性；并取骶孔骨块脱钙，作石腊切片，再用Masson三色法、Mallory改良法和HE染色，并进行组织学观察。结果：①骶孔边的应力集中明显，S1、S2孔边上缘的应变为2703με和1689με，相应的压应力分别为25MPa和16MPa；左右两侧边缘的最大拉应力可达40SPa和31SPa，比骶骨处应力高3．1倍。此时可计算得到S1、S2椎体应力集中系数分别为1．6和1．9。②骶孔发生以下四种骨折方式：Ⅰ型为单纯骶孔骨折，Ⅱ型为骶孔骨折伴骶骨翼骨折，Ⅲ型为整侧骶孔纵形骨折，Ⅳ型骶孔劈裂状骨折。当冲击能量达到25J以上时，发生粉碎性脆性状态骨折，形成骶孔劈裂状骨折，并产生广泛的软组织损伤及神经根损伤，常累及一侧或两侧的腹侧神经根损伤。③从骶孔断面的电镜观察来看，骨折裂纹大多数在薄弱断面，高低不平，并在孔边的应力集中处交汇、集合、发散、扩散和发展，骨折面较为锐利，孔边并有一些宽度不大于120舯微裂隙存在。结论：骶孔状骨折为高能量伤，损伤常累及神经根，与骶骨的力学结构、力的传导、冲击动力学特性以及应力、应变分布相关。     

微创切取全长长屈肌腱重建陈旧性KuwadaⅣ型跟腱断裂

 目的 探讨微创切取全长长屈肌腱重建陈旧性Kuwada Ⅳ型跟腱断裂的临床效果。方法回顾性分析 2006 年7 月至2011 年6月,微创切取全长长屈肌腱重建35例陈旧性KuwadaⅣ型跟腱断裂患者资料,男21例,女14例;年龄为23～71岁,平均42.1岁;均为单侧损伤。MRI 示跟腱断裂间隙为6.0～9.2 cm。观察术后踝关节外形及功能恢复情况,并采用美国足踝外科协会(American Orthopaedic Foot and Ankle Society,AOFAS)踝与后足评分及Leppilahti跟腱修复评分评价疗效。结果 32例获得随访,随访时间为 18～72个月,平均33.2个月。除1例患者因术后10 d拆线致切口裂开重新缝合6周后获得延迟愈合外,其余患者切口均一期愈合。术后踝关节外形及功能恢复良好,AOFAS踝与后足评分从术前(51.92±7.08)分提高到术后(92.56±6.71)分;其中优27例,良3例,可2 例,优良率为93.8%(30/32)。Leppilahti跟腱修复评分从术前(72.56±7.43)分提高到术后(92.58±5.1)分。无一例发生腓肠神经及胫神经损伤、跖部痛性瘢痕、足底内外侧神经损伤。踝关节MRI示跟腱部信号均匀无撕裂和囊性变。结论 微创切取长屈肌腱转移重建陈旧性KuwadaⅣ跟腱断裂具有术后恢复快、肌腱固定强度高、并发症少的优点。     

新疆不同民族骨肉瘤患者病变组织中p53及bcl-2和增殖细胞核抗原表达的差异

背景骨肉瘤在好发于轻少年恶性骨与软组织的肿瘤中居第一位,在临床中,发现新疆少数民族中的发病率较为多见,其发病和预后在基因水平是否存在种族差异.目的观察新疆不同民族骨肉瘤发生发展中的p53,bcl-2,增殖细胞核抗原基因表达差异情况.设计非随机临床病理标本对照的实验.单位新疆医科大学病理中心免疫组织化学实验室.对象取自新疆医科大学第一附属医院及石河子大学第一附属医院病理科1984-01-01/2001-12-31手术切除的52例骨肉瘤患者组织标本(52块),男29例,女23例;其中哈族12例,维族17例,汉族23例);另取32例瘤样病变患者组织(骨纤维结构不良,纤维异常增殖症)标本(32块),其中哈族7例,维族11例,汉族14例.所取标本患者均获完全知情同意将自己的标本用于此项研究.方法实验在新疆医科大学病理中心免疫组织化学实验室进行.两种标本中p53,bcl-2和增殖细胞核抗原表达监测应用免疫组织化学ISAB法.以磷酸盐缓冲液代替一抗作空白对照,以已知阳性的肿瘤标本作阳性对照.P53蛋白和增殖细胞核抗原阳性表达在细胞核内,有明显的红棕色颗粒状染色为阳性,而Bcl-2蛋白阳性则定位于胞浆上.主要观察指标①不同民族骨肉瘤中p53,bcl-2和增殖细胞核抗原的表达结果.②p53,bcl-2,增殖细胞核抗原在骨肉瘤和骨的瘤样病变组织的表达情况.③骨肉瘤中bcl-2与p53和增殖细胞核抗原间的相关性.结果①不同民族骨肉瘤中p53,bcI-2和增殖细胞核抗原的表达结果哈族、维族及汉各之间p53,bcl-2,增殖细胞核抗原阳性率无显著差别(P＞0.05).②p53,bcl-2,增殖细胞核抗原在骨肉瘤和骨的瘤样病变组织的表达情况骨肉瘤中P53,Bcl-2蛋白、增殖细胞核抗原表达阳性率均显著高于瘤样病变组织(42.31%比3.13%,59.62%比0.75%比31.25%,P＜0.01).③骨肉瘤中bcl-2与p53和增殖细胞核抗原间的相关性骨肉瘤中bcl-2与p53之间、bcl-2与增殖细胞核抗原之间有相关关系(X2=5.8182,4.9000,P＜0.05).结论结果表明骨肉瘤组织内p53,bcl-2和增殖细胞核抗原表达与肿瘤分化程度,民族分布未见统计学差别,说明这些基因在骨肉肿瘤发生过程中具有共同调控环节,与不同民族的遗传背景关系不大.     

带骨性止点的同种异体跟腱肌腱移植术1例报道

陈旧性跟腱断裂的修复比较困难,尤其对于缺损大于5 cm的MyersonⅣ处理起来更加困难,常用自体或人工韧带修复可以获得比较好的临床疗效。但对于一些拒绝自体肌腱移植患者,有时同种异体跟腱移植也是一个选择[1-3]。最近我们对一位男性老年患者,采用带骨性止点同种异体跟腱肌腱移植术进行治疗,获得了较好的近期疗效。