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1.
超声介导上调Smad7表达对腹膜炎大鼠腹膜炎症和功能的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 通过基因转染的方法上调Smad7在大鼠腹膜组织的表达,旨在探讨Smad7的高表达对大鼠腹膜炎模型的炎症反应和腹膜功能的影响。方法 Ⅱ级雄性SD大鼠18只随机分入正常组、对照组和模型组,后两组分别给予空载体和Smad7质粒转染,72 h后腹腔内注射大肠杆菌(E.Coli, ATCC 25922) 109 CFU/kg体重诱导腹膜炎,在48 h后做腹膜功能试验并杀检大鼠。检测腹水及血白细胞计数、腹水细菌菌落计数。间接免疫荧光检测Smad7和CD45在腹膜组织的表达。Western印迹检测腹膜组织Smad7蛋白的表达。应用SPSS 11.0统计软件对腹膜功能与腹水白细胞数和细菌菌落数进行Pearson多元线性相关分析。 结果 与空载体组比较,Smad7转基因组大鼠腹膜组织Smad7的表达、腹水白细胞计数和腹膜组织浸润的白细胞数均显著增加,但腹水细菌菌落计数显著降低、腹膜功能显著恶化。相关分析显示腹膜功能的恶化与腹水白细胞计数相关而与腹水细菌菌落计数无相关。结论 Smad7在大鼠腹膜组织的高表达增强了腹膜局部的炎症反应,而过强的炎症反应导致腹膜功能进一步受损。 相似文献
2.
目的:观察肾小管上皮细胞的更新、再生有无来源于骨髓干细胞。方法:建立性别不匹配大鼠间的骨髓移植和肾脏移植模型,通过激光切割技术,将肾小管上皮细胞切割下来,提取其基因组DNA,用针对大鼠Y染色体上性别决定基因(Sry基因)的引物进行PCR反应,以观察提取的DNA中有无Sry基因。结果:据PCR反应结果,在2种模型所取标本的肾小管上皮细胞中,大部分可见Sry基因的存在。结论:骨髓干细胞可能是肾小管上皮细胞再生的一个来源。 相似文献
3.
目的探讨镜下所见消化道出血常见病因及治疗方法。方法对2009年3月~2013年10月昆明市第一人民医院内镜检查所见老年人消化道出血52例病例资料进行回顾性分析。结果52例老年患者发现镜下出血,胃溃疡占30.77%(16/52),十二指肠溃疡占25%(13/52),贲门溃疡2例,贲门黏膜撕裂4例,Dieulafoy病6例,吻合口溃疡3例,活检术后2例,息肉切除术后4例,肠道不明原因渗血2例。52例均行镜下治疗,镜下即时止血成功率92.31%(48/52),所有病例均无穿孔及其他术后并发症。结论镜检所见老年人消化道出血最常见病因为消化性溃疡,镜下治疗以金属钛夹止血为主,其特点是创伤小,急诊止血率高,病死率低,并发症少,已成为主要的治疗方法,值得临床推广。 相似文献
4.
5.
6.
转化生长因子β1诱导肾小管上皮细胞转分化的蛋白质组学研究 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 研究转化生长因子(TGF)β1诱导肾小管上皮细胞(NRK52E)转分化(EMT)过程中相关靶蛋白的表达变化。 方法 应用比较蛋白质组学方法。用双向凝胶电泳(2-DE)对TGF-β1刺激组和对照组 NRK52E细胞总蛋白进行分离。两组间差异蛋白点用质谱和数据库搜索鉴定,并用RT-PCR和Western 印迹在蛋白质和mRNA水平上进一步检测验证。 结果 鉴定出22个差异蛋白,包括与细胞骨架相关蛋白、参与物质转化和能量代谢的酶类、与蛋白翻译后修饰相关蛋白、细胞因子及其他蛋白等。应用RT-PCR验证了转胶蛋白(transgelin)、ATP合成酶α亚型、苹果酸脱氢酶、丝氨酸(半胱氨酸)蛋白酶抑制因子、泛素结合酶9(Ubc9)和表皮生长因子8在mRNA水平的表达差异,与2-DE结果一致。用Western 印迹验证了transgelin、ATP 合成酶α亚型两种蛋白的表达差异,亦与2-DE结果一致。 结论 TGF-β1刺激NRK52E细胞EMT发生过程中可诱导包括与细胞骨架相关蛋白、与翻译后修饰相关蛋白、代谢酶类及细胞因子等多种蛋白表达变化。本研究结果有助于深入理解EMT的具体分子机制及阐明肾脏疾病慢性进展的机制。 相似文献
7.
目的 观察Notch通路在高浓度葡萄糖透析液所致大鼠腹膜纤维化模型中的变化并探讨其可能机制。 方法 给予SD雄性大鼠每日腹腔注射高浓度葡萄糖腹膜透析液,于实验后2周和4周杀检。取壁层腹膜组织行光镜检查;免疫印迹检测转化生长因子β1 (TGF-β1)、 E钙黏蛋白(E-cadherin)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA) 和I型胶原蛋白(Col I)的表达;RT-PCR检测Notch通路的下游靶基因Hes-1的表达;免疫印迹和RT-PCR检测Notch配体Jagged-1和Notch通路的负性调节因子Numb的表达。 结果 HE染色显示模型组腹膜明显增厚,间皮细胞减少;Masson染色显示壁层腹膜中可见明显的胶原沉积。与健康对照组相比,模型组的TGF-β1、α-SMA 和 Col I的表达增加而E-cadherin的表达下降(均P < 0.01)。4周模型组与对照组相比Jagged-1表达明显增加(P < 0.05),同时Hes-1的表达亦明显增加(P < 0.01),而Notch通路的负性调节因子Numb的表达下降(P < 0.01)。 结论 在高浓度葡萄糖腹膜透析液所致的大鼠腹膜纤维化模型中有Notch通路的活化,而该通路的活化可能与Notch通路的负性调节因子Numb表达的下调有关。高表达Notch通路的负性调节因子,如Numb,可能是治疗腹膜透析患者腹膜纤维化的新途径。 相似文献
8.
目的 探讨Numb在大鼠肾小管上皮细胞转分化过程中的作用。 方法 重组人转化生长因子β1(TGF-β1)刺激大鼠近端肾小管上皮细胞(NRK52E细胞),不同浓度TGF-β1 (0、1、5、10、15、20 μg/L)作用48 h与TGF-β1 10 μg/L作用不同时间(0、24、48、72 h)后,采用RT-PCR、Western印迹和免疫荧光染色分别检测NRK52E细胞内E钙黏蛋白(E-cadherin)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Numb 的表达。采用RNA干扰技术下调Numb表达,Western印迹观察改变Numb水平对E-cadherin、α-SMA蛋白水平的影响。 结果 TGF-β1以剂量及时间依赖的方式诱导NRK52E细胞E-cadherin 蛋白表达下调,α-SMA 蛋白表达增高。Numb蛋白的表达随TGF-β1浓度的增加而增高,在5、10、15和20 μg/L时分别为0 μg/L时的1.33倍(P = 0.024)、1.39倍(P = 0.035)、1.45倍(P = 0.025)和1.51倍(P = 0.000)。而Numb蛋白和mRNA的表达亦随TGF-β1作用时间的延长而增高,作用24 h、48 h、72 h,Numb蛋白分别为0 h的1.48倍(P = 0.046)、1.54倍(P = 0.011)、1.79倍(P = 0.028),Numb mRNA分别为0 h的1.56倍(P = 0.012)、1.82倍(P = 0.008)、1.82倍(P = 0.002);同时Numb的分布也发生了改变,大量聚集在胞质中。下调Numb表达可以显著抑制TGF-β1诱导的α-SMA表达上调(为Numb表达正常时的18.1%,P = 0.004)、E-cadherin表达下调(为Numb表达正常时的2.19倍,P = 0.004)。 结论 Numb可以促进肾小管上皮细胞发生转分化。 相似文献
9.
目的:观察高糖环境下人近端肾小管上皮细胞HK-2中p66Shc的表达和磷酸化,以及p66Shc瞬时高表达对高糖诱导的HK-2线粒体活性氧簇产生的影响,为探讨糖尿病肾病线粒体ROS产生的机制提供新的思路。方法:常规培养正常人近端肾小管上皮细胞(HK-2),将30mmol/LD-葡萄糖在不同时间点作用于体外培养的HK-2细胞,采用Real—time—PCR检测p66ShcmRNA的表达变化,Western blot检测p66Shc蛋白、磷酸化p66Shc—Ser36蛋白的表达;进一步将pcDNA3.1hisp66Shc质粒转染HK-2细胞,采用激光共聚焦显微镜观察p66Shc高表达对高糖诱导的线粒体活性氧簇产生的影响。结果:30mmol/LD-葡萄糖能呈时间依赖性上调p66ShcmRNA和蛋白表达水平,同时增强p66Shc第36位丝氨酸的磷酸化;在30mmol/LD-葡萄糖作用下,转染p66Shc的HK-2线粒体ROS水平明显高于未转染组及空载体转染组(P〈0.05)。结论:p66Shc参与了高糖诱导的线粒体活性氧簇的产生,可能在糖尿病肾病早期肾小管氧化损伤过程中发挥重要作用。 相似文献
10.