转Cry1Ab-ma基因玉米的蛋白质功效比

目的评价转Cry1Ab-ma基因玉米和亲本玉米的蛋白质功效比。方法 60只SD大鼠,按体重随机分为酪蛋白对照组、亲本玉米组和转基因玉米组,每组20只,雌雄各半。酪蛋白对照组酪蛋白添加量占饲料的10%,亲本玉米组和转基因玉米组饲料按照玉米最大掺入的原则掺入后蛋白质含量仍不够10%时,以酪蛋白补充。大鼠自由饮食饮水,喂养28天。每周记录各组摄食量及体重,试验末期采血测定血常规和血生化指标,主要脏器称重计算脏器体重比,并计算蛋白质功效比及校正蛋白质功效比。结果各组动物的体重均呈增长趋势,体重增长正常,末期的血液学和血生化指标中个别指标差异虽有统计学意义,但并无生物学意义。各主要脏器系数也均未发现有生物学意义的改变。转基因玉米、亲本玉米和酪蛋白的蛋白质功效比分别为2.01±0.22、1.77±0.30和3.64±0.48。转基因玉米和亲本玉米的校正蛋白质功效比分别为1.38和1.22。结论该批次转Cry1Ab-ma基因玉米的蛋白质功效比优于亲本玉米,劣于酪蛋白。     

超高效液相色谱-串联质谱法同时快速检测微量血清中6种脂溶性维生素

目的 建立超高效液相色谱-串联质谱法（UPLC-MS/MS）同时快速检测微量血清中维生素A、维生素D（25-OH-VD2 、25-OH-VD3 ）、维生素E（α-、β-和γ-生育酚）的方法。方法 血清中脂溶性维生素经甲醇-乙腈（50:50, v/v)沉淀蛋白、正己烷萃取,以Phenomenex Kinetex F5色谱柱为分离柱,2.5 mmol/L甲酸铵-0.1%甲酸水溶液和甲醇为流动相,梯度洗脱,电喷雾电离（ESI+ ）、多反应监测（MRM）模式下检测,同位素内标法定量。结果 血清中6种脂溶性维生素线性范围内线性关系良好,相关系数 r >0.995;6种脂溶性维生素的检测限为0.20~1.25 ng/ml,定量限为0.39~3.88 ng/ml;加标回收率为86.6%~107.7%,日内精密度<9.6%,日间精密度<9.3%。NIST标准参照品SRM 968f验证方法准确度,结果偏差均在5%以内。结论 本方法准确度高、重现性好、用血量少,适于婴幼儿等采血困难者微量血样中多种脂溶性维生素的同时快速检测。     

TG2和Mertk基因共沉默腺病毒干扰载体的构建及其基因沉默作用

目的构建转谷氨酰胺酶2（TG2）和Mer受体酪氨酸激酶（Mertk）基因共沉默腺病毒干扰载体,并检测其基因沉默作用。方法首先构建能干扰TG2和Mertk蛋白表达的质粒载体pSUPER/TG2及pSUPER/Mertk,再将其干扰序列和H1启动子序列切下并连接到pAdTrack上,构建成pAdTrack/TG2/Mertk载体。将其转入含有pAdEasy-1的BJ5183感受态细菌中,回收并酶切鉴定重组腺病毒载体。将阳性腺病毒载体感染HEK293细胞,收集病毒,反复扩增后测定病毒滴度。分别以pAdTrack/TG2/Mertk、pAdTrack/TG2、pAdTrack/Mertk及pAdTrack/绿色荧光蛋白（GFP）感染RAW264.7细胞,采用免疫印迹法检测其TG2蛋白和Mertk蛋白的表达水平。结果pAdTrack/TG2/Mertk载体的病毒滴度为6.13×1010GFU/mL。经酶切鉴定,pAdTrack/TG2/Mertk含有插入的2个启动子和2个干扰序列,载体构建成功。pAdTrack/TG2和pAdTrack/TG2/Mertk组TG2蛋白的表达水平比较差异无统计学意义（P〉0.05）,但均低于pAdTrack/GFP和pAdTrack/Mertk组（P〈0.01）,后两者比较差异无统计学意义（P〉0.05）。pAdTrack/Mertk和pAdTrack/TG2/Mertk组Mertk蛋白的表达水平比较差异无统计学意义（P〉0.05）,但均低于pAdTrack/GFP和pAdTrack/TG2组（P〈0.01）,后两者比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 TG2和Mertk基因共沉默腺病毒干扰载体pAdTrack/TG2/Mertk构建成功,其能显著降低小鼠巨噬细胞样RAW246.7细胞中TG2蛋白和Mertk蛋白的表达水平。     

4种富硒植物预防MNNG诱发大鼠胃癌效果研究——不同源硒抑制大鼠胃窦黏膜上皮细胞异倍体发生率对比研究

目的筛选具有高效低毒特征的高健康价值硒。方法选择3种代表性富硒植物,以预防胃癌效果较好的富硒大蒜为生物硒对照材料,以亚硒酸钠为合成硒对照化合物,应用N-甲基-N′-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)诱发大鼠胃窦黏膜上皮细胞异倍体发生(IAC)模型,调查比较5种富硒材料防癌效果。结果150μg/kgbw(以Se计,以下同)富硒大蒜组和富硒青花菜组大鼠IAC分别为25%和30%,两组间没有显著性差异;300μg/kgbw富硒大蒜组、富硒绿羽组和富硒红羽组大鼠IAC依次为22%、30%和50%,三组间没有显著性差异。150μg/kgbw亚硒酸钠组大鼠全部死亡,无法比较富硒植物与合成硒化合物亚硒酸钠的抑癌效果,但表明富硒植物毒性远小于亚硒酸钠。结论初步证实三种新选择的富硒植物具有高效低毒特征。     

高剂量富硒植物硒对胃癌模型大鼠的安全性研究

目的:对比研究长期摄入高剂量不同富硒植物硒对大鼠重要肝指标的影响,为安全合理利用不同植物硒源提供科学依据。方法:采用N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)诱发大鼠胃癌模型,连续灌喂四种高剂量不同富硒植物硒17w,于18w末测定大鼠肝脏硒累积、丙二醛(MDA)含量和谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性。结果:摄入富硒青花菜、富硒红羽、富硒绿羽的大鼠肝硒水平显著高于摄入富硒大蒜。补充植物硒显著降低了大鼠的肝MDA水平,提高了肝GPx活性。富硒大蒜高、低剂量组大鼠肝MDA含量差异显著,而GPx活性差异不显著。结论:长期摄入高剂量富硒大蒜后,动物肝组织低硒累积可作为富硒大蒜高安全性的重要依据。植物硒可通过GPx清除肝组织MDA,防止肝氧化损伤。     

用噬菌体抗体库技术筛选单克隆抗体

用噬菌体抗体库技术制备单克隆抗体是近年来抗体技术中的革命性进展，本文简要介绍了我们在这方面所进行的研究工作：从乳癌细胞免疫后的小鼠脾脏细胞和接种过HBsAg疫苗的志愿者的外周血淋巴细胞扩增出k链和Fd段基因，组装到Fab段噬菌体抗体表达载体pCOMB3中,分别建立了鼠源性和人源性噬菌体抗体库，以固相化的HBsAg和乳癌细胞为抗原．通过“吸附-洗脱-扩增”富集性筛选过程获得了鼠抗人乳癌细胞和人抗HBsAg的噬菌体抗体，并通过对表达载体的改造，在大肠杆菌表达出了可溶性的Fab段,对所获得的抗体Fab段进行了特异性、亲和力以及DNA序列的分析，显示噬菌体抗体库技术是一个行之有效的抗体制备手段。     

毛细管电泳法测定人血浆胸腺九肽的含量

目的建立定量测定人血浆中胸腺九肽的毛细管区带电泳法。方法运行缓冲液为50 mmol·L^-1 Na₂B₄O₇-10 mmol·L^-1 Na₂HPO₄ (pH 9.10)。毛细管总长57 cm,有效长度50 cm,内径75 μm。运行电压12 kV,运行温度25℃。检测波长:200 nm。结果胸腺九肽的线性范围为1～10 μg·mL^-1,γ=0.9990,重现性RSD为3.05%,回收率为70.97%,RSD为3.32%。结论毛细管电泳法可检测人血浆胸腺九肽的含量,方法简便、可靠、快速。     

应用 PLC/PRF/5细胞分离到两株南京地区的甲型肝炎病毒

应用PLC/PRF/5细胞株从两份南京地区患儿的粪便中分离到两株甲肝病毒,称为南京一株(NJ-1)和南京二株(NJ-2)。采用免疫荧光方法,初代病毒检出时间为19天。经传代后,缩短至接种后第四天即可见荧光阳性细胞,培养至2～3周,阳性细胞可达95%,荧光颗粒存在于胞浆内。免疫电镜见有成堆的空心和实心病毒颗粒,直径27nm。采用细胞培养的病毒提取物可代替大便提取的HAAg,用ELISA 法检测病人的抗HAV-IgM。     

互动教学在临床带教中的应用

互动学习法是以学生为本 ,调动教师主动性与学生主体性相结合的一种学习方法。也就是在带教过程中 ,通过教师有意识地指导 ,引发和激励护生主动参与到临床实习中来 ,师生互相交流 ,相互沟通 ,亲密合作 ,共同探究如何更好地满足病人健康需要。从而有效提高护生临床工作能力 ,使其感性知识在实践中得到理性升华的一种先进模式。1　具体作法1.1　实施情感教育　让学生对患者、对社会充满无限的爱。带教老师要针对学生的思想 ,给她们讲南丁格尔的故事 ,让她们认识到工作无贵贱之分 ,护理工作是一个崇高的职业。让学生变被动学习为主动学习 ,发挥…     

Acrp30生物学功能及调控的研究进展

Acrp30是脂肪来源的血浆蛋白，其生理学功能包括调节糖、脂代谢，提高胰岛素敏感性，抗动脉粥样硬化等。新近的研究表明，Acrp30有抗炎保肝的效果，有可能成为一种新的肝病治疗药物。Acrp30表达调控是与代谢相关的多种因素综合作用的结果，其中肾脏在Acrp30生物降解和清除中起重要作用，但目前Acrp30在体内的作用机制还有待于进一步研究。