二烯丙基二硫启动人白血病HL-60细胞凋亡模型的建立

目的寻找二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)诱导人白血病HL-60细胞凋亡的启动点,建立DADS启动HL-60细胞凋亡模型。方法实验设未处理组、处理组和撤药组,分别采用细胞计数、流式细胞术、DNA凝胶电泳、Western blot等方法,绘制生长曲线,检测凋亡率、活化的caspase-3表达率以及DNALadder、凋亡相关蛋白的检测。结果3.6mg.L-1DADS作用HL-60细胞1d,与对照组相比,细胞数没有明显变化,而作用2～6d,细胞数分别减少24.1%、36.5%、44.2%、52%、53.6%。DADS作用1、2d,凋亡率分别为3.1%、4.3%,与未处理组(3.0%)差异无显著性,而作用3～5d的凋亡率分别达到8.5%,15.2%,27.4%,均高于未处理组(P<0.05)。DADS作用2～5d撤药后再培养至d6,凋亡率分别为7.9%,12.4%,16.5%,18.8%,高于未处理组的3.3%(P<0.05)。处理2～5d后,活化的caspase-3的表达率分别为10.0%、10.4%、14.9%、17.3%,均高于未处理组5.4%(P<0.05)。处理组中DADS处理4d后DNA凝胶电泳出现梯状条带,而DADS作用2～5d撤药后再培养至d6均出现明显梯状条带。Westernblot结果表明,从作用2d起,caspase-3表达开始上调,而Bcl-2表达开始下调。结论3.6mg.L-1DADS诱导人白血病HL-60细胞凋亡的启动点为处理2d。     

肾片治疗IgA肾病脾虚湿热证的临床观察

目的：观察健肾片治疗IgA肾病（IgAN）脾虚湿热证的临床疗效。方法：用健肾片治疗IgA肾病40例，与32例肾炎四味片对照治疗组进行比较。结果：健肾片能有效降低患尿红细胞计数，降低患蛋白尿，改善临床症状，临床总有效率85％。结论：健肾片具有较好的治疗IgA肾病脾虚湿热证的临床疗效，综合疗效优于对照组。     

两种冰冻全血基因组DNA提取方法的比较

目的比较挑取白细胞法和裂解红细胞法获得人冰冻全血中的白细胞，提取基因组DNA的方法。方法分别分析DNA的收获量和OD260／0D280比值，同时，用PCR/SNP敏感性分子开关技术对两种方法获得的模板DNA进行SNP分析。结果挑取白细胞法DNA收获率高，纯度高，裂解红细胞法得到的DNA的产量和纯度相对较低；用PCR/SNP敏感性分子开关检测表明挑取白细胞法和裂解红细胞法制备的DNA模板可进行有效的体外扩增，但挑取白细胞法目的条带特异，而裂解红细胞法有扩增条带但有非特异带。结论对冰冻全血推荐采用挑取白细胞法进行大规模血样DNA的提取，建立高质量的DNA库，用于复杂疾病的基因检测和疾病SNP相关性研究。     

DADS诱导人白血病细胞HL-60凋亡的流式细胞术检测

目的 运用流式细胞术检测二烯丙基二硫(diallyl disulfide, DADS)诱导人白血病HL-60细胞凋亡的作用. 方法 实验分对照组和DADS处理组,进行体外细胞培养,进行细胞形态学观察,应用流式细胞术检测凋亡率、早期凋亡细胞以及caspase-3活性. 结果 DADS诱导前后,HL-60细胞形态学发生明显改变,PI单染法检测结果 :随着不同浓度DADS作用HL-60细胞24 h,HL-60细胞出现明显亚二倍峰,细胞周期也发生了相应的改变;Annexin V/PI 双染法检测结果 :10 mg/L DADS作用HL-60细胞4、8、12和24 h后,早期凋亡细胞显著增加,具有明显的时间依赖性(P<0.05);间接免疫荧光流式细胞术结果 显示在DADS诱导HL-60细胞凋亡过程中有caspase-3的活化,且与作用时间呈依赖关系. 结论 流式细胞术检测结果 表明,DADS能有效诱导HL-60细胞凋亡.     

从SARS防治绩效对比研究各国公共卫生应急反应体系

目的选择SARS危机中公共卫生应急反应体系完善、应急迅速的有代表性的国家,对其公共卫生应急反应体系的机构机制与绩效进行对比分析,为我国建立和完善公共卫生应急反应体系提供依据.方法采用循证科学的原理和方法,通过系统查阅、收集和评价中国、美国、英国、澳大利亚和新加坡官方网站的信息,比较其SARS防治绩效及公共卫生应急反应体系的机构设置和运作机制,分析原因,总结问题,提出对策.结果美国、英国和澳大利亚的SARS防治绩效最好;新加坡的应急反应措施受到WHO高度评价.我国公共卫生应急反应体系的结构与发达国家相似,但投入不足、管理落后、运作机制不成熟导致效率低下.结论我国公共卫生体系改革应以加强机制建设为突破口.我国幅员辽阔,不同地区宜采用适合本地区条件的公共卫生防御体系和机制.上述国家的经验有助于我们建立和完善有中国特色的公共卫生预警应急体系.     

颈胸联合进路颈神经鞘瘤切除术一例的护理

颈部、胸腔交界区域肿瘤,因其区域血管神经密集,手术危险性高,难度大,该区域肿瘤常常涉及头颈外科、胸外科、骨科、血管外科等多个学科,手术有其特殊性、复杂性［1］。其对术后护理要求较高,护理难度较大,不仅包括颈部伤口及管路的护理,还包括部分胸外科疾病的护理技术,如胸腔闭式引流管的护理、体位护理,并发症的观察和护理。因此术后护理对患者疾病的恢复至关重要,我科收治了一位右侧颈胸交界处的神经鞘瘤的患者,现将该病例的护理过程进行整理和总结,以期指导临床。     

二烯丙基二硫上调p21、STAT1和CAMTA1诱导人白血病HL-60细胞分化

目的应用抑制性消减杂交(SSH)研究二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)诱导人白血病HL-60细胞分化的分子机制。方法在前期工作中,我们成功地构建了具有高消减效率的DADS诱导白血病分化的cDNA文库,本实验通过挑取文库中的30个克隆制备质粒并酶切分析、测序和同源性检索。结果18个克隆均具有100～600bp左右的插入片段,测序分析发现10个差异表达基因,分别与细胞周期、信号转导、代谢、RNA结合等有关。RT-PCR验证其中上调的3个基因:p21、STAT1和CAMTA1,结果与SSH相符。结论p21、STAT1和CAMTA1表达上调与DADS诱导白血病分化密切相关。     

国医大师邹燕勤从咽论治IgA肾病临证撷菁

国医大师邹燕勤教授指出咽喉是经脉循行交会之处,在脏腑经络结构上与肾紧密相连,IgA肾病与咽密切相关,其中呼吸道感染是IgA肾病病情波动的重要因素。临床多从咽论治IgA肾病,包括清热利咽与养阴利咽法,同时配合调脾治肾清利等法,临床收效满意。附验案2则以佐证。     

国医大师邹燕勤的独特养肾经

江苏省中医院国医大师邹燕勤教授是全国知名的肾病学家,虽然已经88岁高龄,但她面色红润、耳聪目明、身姿矫健。如此精气神十足,无疑跟她自幼随父学医,从医数十年,深谙中医养生之道有很大关系。下面介绍邹燕勤教授的独特养肾经,希望对大家有所启迪。     

姜黄素致HepG-2细胞的凋亡作用及对bcl-2/bax表达的影响

目的:研究姜黄素致人肝癌HepG-2细胞的凋亡作用及bax与bcl-2 mRNA表达的变化,为姜黄素的临床应用提供实验依据.方法:当HepG-2细胞处于对数生长期时,分别加入不同浓度(0、2.5、5、10、20、30 mg/L)的姜黄素处理48 h,MTT试验检测细胞的抑制率;流式细胞仪检测细胞凋亡率;实时荧光定量PCR检测bax和bcl-2mRNA的含量.结果:随着姜黄素浓度的增高,其对HepG-2细胞的抑制作用逐渐增强.当姜黄素浓度为30mg/L时,其抑制率达到(58.23±2.56)%,IC50=25.44 mg/L,而细胞的凋亡率由对照组的(1.1±0.3)%上升到(38.4±1.5)%;bax和bcl-2分别是对照组的(5.00±0.55)倍和(0.28±0.05)倍.结论:姜黄素能抑制HepG-2细胞的生长,诱导细胞凋亡,它的分子机制可能是上调bax基因和下调bcl-2基因的表达.