青光安Ⅱ号对慢性高眼压SD大鼠模型中视网膜PAX6和Ngn1及Ngn2 mRNA表达的影响

目的:观察青光安Ⅱ号方对SD大鼠慢性高眼压模型中视网膜PAX6、Ngn1及Ngn2 mRNA表达影响.方法:将40只80眼雄性SD大鼠随机分成6组,分别为:A组(空白组)、B组(模型组)、C组(青光安Ⅱ号方低剂量组)、D组(青光安Ⅱ号方中剂量组)、E组(青光安Ⅱ号方高剂量组)、F组(益脉康分散片组).将B、C、D、E、F五组实验大鼠采用烧灼巩膜表浅静脉法建立大鼠慢性高眼压模型,术后监测眼压,使眼压维持在25mmHg以上持续2mo视为慢性高眼压造模成功.动物维持高眼压状态2mo后开始灌胃,灌胃后2、4wk分别处死,qPCR检测PAX6、Ngn1、Ngn2 mRNA的相对表达量.结果:PCR结果显示:SD大鼠慢性高眼压模型成模灌胃2wk后,各组PAX6、Ngn1、Ngn2 mRNA表达量与B组比较,差异有统计学意义(P<0.05);C、D、E、F组组间比较,差异无统计学意义(P>0.05).SD大鼠慢性高眼压模型成模灌胃4wk后,C、D、E组与F组比较,差异有统计学意义(P<0.05).C、D组与E组比较,差异有统计学意义(P<0.05).C组与D组比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论:青光安Ⅱ号方及益脉康分散片均能增加PAX6、Ngn1、Ngn2 mRNA的相对表达量,对慢性高眼压大鼠视网膜神经节细胞有一定的保护作用;在对慢性高眼压大鼠视神经的保护中,青光安Ⅱ号方高剂量灌胃后4wk时效果最优.     

枸杞子-丹参对小鼠视网膜Caspase-12前体、Caspase-2表达的影响

目的观察枸杞子-丹参对rd10小鼠视网膜Caspase-12前体、Caspase-2表达的影响。方法将40只rd10小鼠随机分为5组,空白组灌胃生理盐水;对照组灌胃维生素A溶剂;枸杞组灌胃枸杞子中药超微配方颗粒溶液;丹参组灌胃丹参中药超微配方颗粒溶液;枸杞加丹参组(杞参组)灌胃枸杞子加丹参中药超微配方颗粒溶液;8只C57小鼠为野生组,灌胃生理盐水。给药28 d后,RT-qPCR检测小鼠视网膜Caspase-12前体、Caspase-2 mRNA表达情况,免疫组化、免疫荧光法检测小鼠视网膜Caspase-12前体、Caspase-2蛋白表达情况。结果 RT-qPCR检测显示:除杞参组外,各组小鼠视网膜Caspase-12前体、Caspase-2 mRNA相对表达量高于野生组,差异有统计学意义(P<0.05);杞参组小鼠视网膜Caspase-12前体、Caspase-2 mRNA相对表达量低于空白组、对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。免疫组化检测显示:各组小鼠视网膜Caspase-12前体、Caspase-2平均光密度高于野生组,差异均有统计学意义(P<0.05);杞参组Caspase-12前体、Caspase-2蛋白平均光密度低于空白组、对照组、枸杞组、丹参组,差异均有统计学意义(P<0.05)。免疫荧光检测显示:各组小鼠视网膜Caspase-12前体、Caspase-2蛋白平均荧光强度高于野生组,差异均有统计学意义(P<0.05);杞参组Caspase-12前体、Caspase-2蛋白平均荧光强度低于空白组、对照组、枸杞组、丹参组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论枸杞子-丹参可以抑制rd10小鼠视网膜Caspase-12前体、Caspase-2 mRNA和蛋白的表达,从而抑制感光细胞的凋亡,维持视网膜正常功能结构,保护视功能。     

丹参对视网膜色素变性病理过程Müller细胞特征性基因变化及关键蛋白表达的影响

目的基于网络药理学和生物信息学方法探讨丹参(SM)通过干预Müller细胞(MC)特征性基因和关键蛋白表达治疗视网膜色素变性(RP)的分子机制。方法运用中药系统药理学数据库和分析平台(TCMSP)检索、筛选SM的入血活性成分和作用靶点;通过GEO数据库获取正常和RP小鼠MC差异表达基因;通过疾病数据库检索RP相关的基因靶点;采用Cytoscape构建MC差异表达基因和疾病靶点、成分靶点的蛋白质-蛋白质交互作用网络并提取交集;运用DAVID数据库对特征性基因进行基因本体和KEGG通路分析;采用cytoHubba分析筛选关键蛋白靶点。结果检索得到与SM相关的化学成分202个,依据ADME参数筛得活性成分65个,其中入血活性成分13个,进一步检索配对得到这些成分可能作用的靶点117个;从芯片数据中分析得到正常和RP小鼠MC中差异表达基因242个;从疾病数据库获得与RP密切相关的靶点206个;提取交集得到85个SM影响RP病理过程MC的特征性基因;这些基因主要涉及转录调控、凋亡信号通路调控、DNA核内复制调节等生物学过程,分子功能主要包括转录辅激活子活性、蛋白激酶活性、核心启动子结合等,富集于细胞核、核质、转录因子复合物、Rb-E2F复合体等区域,主要与剪接体信号通路、肌动蛋白细胞骨架调控信号途径、细胞周期调控通路等有关;分析筛选出SM干预RP病理过程MC中的8个关键蛋白靶点。结论 SM药效作用的物质基础为隐丹参酮、木犀草素、丹参酮ⅡA等13个化学成分;其所干预的RP病理过程MC特征性基因与剪接体信号通路、肌动蛋白细胞骨架调控信号途径、细胞周期调控通路等机制相关,关键靶点包括RB1、E2F1、TFDP1等8个蛋白。     

基于网络药理学探讨枸杞子治疗视网膜色素变性的作用机制

目的:运用网络药理学方法探究枸杞子干预视网膜色素变性(RP)可能的作用机制。方法:检索国家知识基础设施数据库、中国学术期刊数据库、中文科技期刊数据库上正式公开发表的有关中药方剂治疗RP临床疗效的文献,记录其方剂中使用的中药名称及使用频数。运用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)筛选出枸杞子口服生物利用度≥30%和类药性≥0.18的化合物作为候选药效成分,根据TCMSP的"Related Targets"对枸杞子的活性成分的作用靶点进行预测,采用Cytoscape3.6.0软件构建化合物-靶点网络。通过DrugBank、DisGeNET数据库查找RP相关基因,通过STRING数据库进行蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)分析。通过韦恩图将枸杞子活性成分靶点与RP疾病靶点取交集,得到枸杞子有效活性成分治疗RP的关键靶点。使用DAVID数据库对关键靶点进行GO功能注释和KEGG信号通路富集。结果:筛选出了62个中药方剂,共记录中药97种。其中使用频率最高的中药为枸杞子,共42次。得到枸杞子有对应靶点的活性成分29个,预测作用靶点188个,RP相关基因244个,枸杞子治疗RP的关键靶点12个,靶点参与的功能主要有基因表达的调控、细胞增殖、RNA转录调控、血管生成、缺氧等,主要的作用通路为PI3K-AKT信号通路、神经营养因子信号通路。结论:枸杞子可能通过PI3K-AKT信号通路、神经营养因子信号通路调节视神经细胞凋亡和视网膜神经退行性病变,保护视功能,从而达到治疗RP的目的。     

枸杞子-丹参对rd10小鼠视网膜Caspase-8、 Caspase-12、Caspase-3、αB-crystallin表达的影响

目的 观察枸杞子-丹参对rd10小鼠视网膜Caspase-8、Caspase-12、Caspase-3、α晶状体球蛋白B(αB-crystallin)表达的影响,探讨枸杞子-丹参治疗视网膜色素变性的作用机制.方法 40只rd10小鼠随机分为空白组、对照组、枸杞子组、丹参组、杞参组,每组8只,分别予生理盐水、维生素A溶液...     

枸杞子-丹参药对治疗视网膜色素变性的分子机制探讨

目的:基于网络药理学和生物信息学方法探讨枸杞子-丹参(LFSMR)药对治疗视网膜色素变性(RP)的分子机制。方法:通过中药系统药理学数据库和分析平台(TCMSP)筛选和预测LFSMR药对可能的入血活性成分和作用靶点;通过疾病基因数据库挖掘视网膜色素变性相关的基因靶点;采用功能蛋白联合网络数据库(STRING)绘制成分-靶点和疾病-靶点的蛋白质-蛋白质交互作用(PPI)网络,并取这两个网络的交集;运用注释、可视化和整合发现数据库(DAVID)对交集网络进行基因本体和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路分析;采用cyto Hubba分析筛选关键靶点。结果:在TCMSP数据库共检索出与LFSMR相关的活性成分390个,根据药代动力学参数筛得活性成分110个,进一步筛选获得19个入血活性成分,并检索出与这些成分相关的靶点208个;从疾病基因数据库获得与RP直接相关的基因206个;成分靶点和疾病靶点PPI网络取交集后得到79个基因;这些基因主要涉及蛋白自体磷酸化、转录调节、细胞增殖等生物学过程,分子功能主要涉及三磷酸腺苷结合、转录因子活性、核心启动子结合等,富集于核质、转录因子复合物、细胞核、细胞质等区域,主要与神经营养素信号通路,细胞周期相关通路,Wnt信号通路有关;进一步分析筛选得到LFSMR治疗RP的8个关键性基因靶点。结论:LFSMR药效作用的物质基础为多孔甾醇、丹参酮ⅡA等19个入血活性成分,其治疗RP的关键靶点包括E2F转录因子1(E2F1),视网膜母细胞瘤基因1(RB1)等8个基因,主要作用机制与调控神经营养素信号通路、细胞周期相关通路等信号网络有关。     

中医综合疗法治疗日本籍视网膜色素变性297例回顾性分析

目的回顾性整理采用中医综合疗法治疗日本籍视网膜色素变性患者297例594只眼的临床疗效。方法采用中医辨证论治,辨证分为肾阳不足、肝肾阴虚、脾气虚弱、气虚血瘀4个证型,分别采用温补肾阳、活血明目,滋补肝肾、活血明目,补脾益气、活血明目,益气活血、化瘀明目的治法,给予右归丸、明目地黄丸、补中益气汤、补阳还五汤加减、针灸治疗、耳穴贴压、穴位注射、辨证使用中成药等中医综合治法,观察治疗前后日本籍视网膜色素变性患者的视力、视野改善情况。结果视力方面:显效121只眼,有效343只眼,无效130只眼,总有效率为78.12%。视野方面:显效108只眼,有效294只眼,无效192只眼,总有效率为67.68%。患者治疗后视力与视野较治疗前明显提高,差异有统计学意义(P0.01)。结论中医综合疗法能有效治疗日本籍视网膜色素变性患者,能提高患者的视力,并扩大视野。