辽宁产东亚钳蝎毒镇痛作用与脑内中枢关系的研究

应用立体定位、核团内注射与电解损毁核团技术及微电极细胞外记录方法，以猫丘脑后核内脏大神经诱发单位放电为内脏痛指标，观察向尾状核、中脑导水管周围灰质及杏仁内侧核内注入东亚钳蝎毒及在电解损毁３个核团前后ＰＯ内脏大神经诱发单位放电的变化。在损毁诸核之前刺激内脏大神经引起单位诱发放电，损毁诸核之后诱发放电减弱或消失，这与辽宁产东亚钳蝎毒注入诸核团中的作用相一致。表明蝎毒的作用部位与上述核团有关，更进一步证明蝎毒作用部位     

蝎毒重组蛋白对人肺腺癌A549细胞的抑制作用及其机制

目的 探讨蝎毒重组蛋白对人肺腺癌A549细胞的抑制作用及其抗肿瘤机制.方法 四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测蝎毒重组蛋白对人肺癌A549细胞增殖的抑制作用;荧光显微镜及流式细胞仪(FCM)技术观测蝎毒重组蛋白对肿瘤细胞内钙离子浓度([Ca2+]I)的影响,探讨[Ca2+]I变化时Ca2+的可能来源.结果 蝎毒重组蛋白对人肺癌A549细胞生长有明显抑制作用;荧光显微镜显示,蝎毒重组蛋白作用细胞48 h后细胞内钙离子荧光强度增强,提示[Ca2+]I升高;流式细胞仪显示蝎毒重组蛋白在不同情况下可显著增加肿瘤[Ca2+]I(P<0.05).结论 蝎毒重组蛋白对人肺腺癌A549细胞增殖具有显著抑制作用,可能与升高肿瘤[Ca2+]I继而诱导肿瘤细胞凋亡有关;其升高肿瘤[Ca2+]I是通过开放肿瘤细胞膜钙通道和肿瘤细胞内钙库释放两条途径实现.     

蝎毒重组蛋白对人肺腺癌A549细胞的抑制作用及其机制

目的 探讨蝎毒重组蛋白对人肺腺癌A549细胞的抑制作用及其抗肿瘤机制.方法 四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测蝎毒重组蛋白对人肺癌A549细胞增殖的抑制作用;荧光显微镜及流式细胞仪(FCM)技术观测蝎毒重组蛋白对肿瘤细胞内钙离子浓度([Ca2+]I)的影响,探讨[Ca2+]I变化时Ca2+的可能来源.结果 蝎毒重组蛋白对人肺癌A549细胞生长有明显抑制作用;荧光显微镜显示,蝎毒重组蛋白作用细胞48 h后细胞内钙离子荧光强度增强,提示[Ca2+]I升高;流式细胞仪显示蝎毒重组蛋白在不同情况下可显著增加肿瘤[Ca2+]I(P<0.05).结论 蝎毒重组蛋白对人肺腺癌A549细胞增殖具有显著抑制作用,可能与升高肿瘤[Ca2+]I继而诱导肿瘤细胞凋亡有关;其升高肿瘤[Ca2+]I是通过开放肿瘤细胞膜钙通道和肿瘤细胞内钙库释放两条途径实现.     

东亚钳蝎氯毒素在胶质瘤靶向显像与治疗中的研究进展

神经胶质瘤是颅内最常见的肿瘤,尤其是恶性胶质瘤,具有高复发率和致死率的特点。因其侵袭性生长,目前采取的手术联合放化疗的综合治疗方案疗效欠佳。如何靶向显像和治疗胶质瘤成为研究的重点。近年来,大量研究表明,作为氯毒素的类似物,东亚钳蝎氯毒素能特异性地结合神经胶质瘤细胞表达的氯离子通道和基质金属蛋白酶2,从而抑制胶质瘤细胞的侵润生长和迁移。以东亚钳蝎氯毒素为配体的生物结合物在胶质瘤靶向显像和治疗中的研究越来越多。笔者将全面介绍东亚钳蝎氯毒素的来源、化学结构、作用机制及其在胶质瘤靶向显像与治疗中的应用研究进展,并总结其优势及在未来研究中所面临的挑战。     

东亚钳蝎毒对动物血压作用的研究

研究了山东泗水东亚钳蝎毒对麻醉猫和犬血压的影响。实验结果表明iv0.06mg/kg蝎毒明显升高猫和犬的血压(P<0.05或P<0.01),妥拉苏林能拮抗蝎毒的升压作用。iv0.18mg/kg蝎毒血压呈先降后升双相变化。     

蝎毒镇痛活性肽基因BmK AngM1的密码子优化及其真核表达分析

密码子的偏爱性是影响基因异源表达的重要因素,通过对外源基因的密码子序列进行优化可提高其表达水平。为了获得蝎毒镇痛活性肽基因BmK AngM1在毕赤酵母中的高效表达,根据毕赤酵母密码子偏爱性,将BmK AngM1基因中的毕赤酵母低利用率密码子突变为其高利用率简并密码子,克隆到表达载体pPIC9K中,转化毕赤酵母,甲醇诱导表达;重组蛋白表达量测定结果显示,优化后的BmK AngM1基因在毕赤酵母中的表达水平是优化前的3.7倍。研究结果表明,密码子优化能显著提高BmK AngM1基因在毕赤酵母中的表达水平。     

合浦珠母贝珍珠细胞相容性的初步评价

本文报道了合浦珠母贝珍珠的体外细胞毒性试验结果。将珍珠粉的浸提液加L_(929)细胞培养瓶中,通过细胞相对增殖率(RGR)及细胞形态观察表明,合浦珠母贝珍珠具有较好的细胞相容性,对L_(929)细胞形态无明显影响,但细胞相对增殖率略低于羟基磷灰石陶瓷。     

不同提取方法盐全蝎水溶性蛋白含量对比研究

目的通过对不同提取方法盐全蝎水溶性蛋白含量的比较研究,寻找水溶性蛋白含量较高的提取方法,为全蝎的临床用药提供借鉴。方法对活体东亚钳蝎进行盐制后,分别对水浸泡24h、水煎30、60、90、120min、75%乙醇浸泡24h六组样品浸出液进行粗蛋白、蛋白氮和氨基酸含量的测定。结果水煎60min盐全蝎水提液的粗蛋白、蛋白氮、氨基酸的含量与清水浸泡24h,水煎30min、90min、120min相比具有极显著差异。结论临床应用上采取水煎60min的方法可能更有利于全蝎的药效发挥。     

蝎毒对家兔心电图的影响

观察了山东泗水产东亚钳蝎对清醒家兔心电图的作用。结果表明静脉注射蝎毒溶液(0.75mg/kg)引起R—R间期显著延长(p<0.01),心率减慢,而对P—R间期和QRS波时程无明显影响。大剂量静注蝎毒出现窦房结活动抑制,房室传导阻滞,室性心律和心室内传导阻滞等心律失常。     

Identification of BmKAPi, a novel type of scorpion venom peptide with peculiar disulfide bridge pattern from Buthus martensii Karsch.

A novel cDNA sequence encoding a new type of scorpion venom peptide (BmKAPi) was first isolated from the venom gland of Buthus martensiiKarsch by cDNA library screening combined with 5′-race. The encoded precursor of BmKAPi consisted of 89 amino acid residues including a signal peptide of 24 residues, a putative mature peptide of 64 residues (BmKAPi) and an extra basic residue at the C-terminus which might be removed in the post-translational processing. BmKAPi is stabilized by five disulfide bridges, whereas all other disulfide-bridged scorpion toxins described are cross-linked by three or four disulfide bridges. It suggested the three-dimensinal scaffold of BmKAPi might be different from other scorpion toxins. The amino acid sequence of BmKAPi showed no homology with other scorpion venom peptides, but shared a little similarity with some anticoagulant peptides and proteinase inhibitors isolated from hookworm, honeybee or European frog, respectively. RT-PCR analysis showed that BmKAPi mRNA could be induced by venom extraction suggesting BmKAPi might be a component of scorpion venom. These results suggest that BmKAPi is a new type of scorpion venom peptide different from other described scorpion toxins in structural and functional aspects.