犬细小病毒VP2蛋白在家蚕/昆虫细胞中表达

目的犬细小病毒(canine parvovirus,CPV)能够引起犬急性出血性肠炎,在幼犬中的死亡率很高,为我国养犬业和经济动物养殖业带来巨大的经济损失。因而,寻找一种新型、安全、高效的疫苗为细小病毒性肠炎的防控具有重要意义。方法本研究利用Bac-to-Bac表达系统构建了表达CPV VP2蛋白的重组杆状病毒rBV-D-VP2。该重组病毒感染昆虫细胞和家蚕后,表达CPV VP2蛋白。体外表达的VP2蛋白自动装配成病毒样粒子。随后用蚕蛹中大量组装成的病毒样粒子分别通过口服和肌注两种途径免疫豚鼠。结果经电镜检测,观察到直径为25nm大小的球形病毒样粒子,表明重组杆状病毒表达的VP2能形成病毒样粒子,且在大小、形态上与天然病毒相似。间接免疫荧光检测表明成功构建了表达VP2的病毒样粒子。口服和肌注两种途径免疫豚鼠,均产生了血凝抑制效价。结论本研究为CPV新型亚单位疫苗的研究提供了依据。     

Central administration of Orphanin FQ inhibits GnRH secretion by ORL1 receptor in the median eminence of freely moving ovariectomized rats

Objective

This study aimed to investigate the possible role of Orphanin FQ (OFQ) in the regulation of hypothalamic gonadotropin-releasing hormone (GnRH) secretion.

Methods

The method of push-pull perfusion and radioimmunoassay (RIA) were adopted to examine the secretory profile of GnRH in the median eminence (ME) in freely moving ovariectomized (OVX) rats after intracerebroventricular (icv) injection of OFQ and/or [Nphe¹]NC(1–13)NH² (NC13), a competitive antagonists of the opioid receptor-like 1 receptor (ORL1 receptor).

Results

GnRH release from ME significantly decreased from 40 min to 80 min after the administration of 20 and 200 nmol OFQ in OVX rats (P< 0.05). This inhibitory effect of 20 nmol OFQ could be abolished by pretreatment with equal dose of NC13. More interestingly, GnRH secretion from ME was increased markedly 60 min after icv injection of 100 and 200 nmol NC13 (P < 0.05).

Conclusion

Our results suggested central administration of OFQ could inhibit the release of GnRH in the ME of hypothalamus through ORL1 receptor, providing further in vivo evidence supporting the role of OFQ in the control of GnRH secretion.     

连枷胸合并血气胸的急诊处理临床分析

目的观察连枷胸合并血气胸根据手术时机行急诊肋骨内固定术的临床效果。方法回顾性分析2013年1月~2014年2月收治的49例连枷胸合并血气胸患者的临床资料,其中男性31例,女性18例;年龄19~79岁,平均年龄(49.2±7.8)岁。按手术时机分组:受伤后2d内接受早期手术者26例为观察组,2~7d接受晚期手术者23例为对照组,分析两组患者的机械通气时间、下床时间、拔管时间、疼痛程度以及并发症情况。结果观察组机械通气时间、下床时间、拔管时间分别为(95.2±13.1)h、(48.8±11.2)h、(32.8±10.7)h,显著少于对照组的相应指标(P0.05);观察组术后疼痛视觉模拟评分(VAS)和重度疼痛比例显著低于对照组(P0.05),观察组肺不张、肺部感染发生率和死亡率明显低于对照组,而两组患者胸廓畸形和肋间神经痛发生率无明显差别。结论早期急诊肋骨内固定术治疗连枷胸合并血气胸可以及时消除胸壁软化及反常呼吸运动,改善呼吸功能,减少并发症,明显有利于病情恢复。     

扶正除疫颗粒抗甲型H1N1流感病毒感染作用评价

目的 评价扶正除疫颗粒抗甲型H1N1流感病毒感染的效果。方法 将112只小鼠随机分为正常对照组、病毒模型组、达菲对照组、扶正除疫组,每组28只。正常对照组和病毒模型组以生理盐水灌胃,每次0.4 ml/只;达菲对照组以达菲水溶液0.025 g/(kg·d)灌胃,扶正除疫组以扶正除疫颗粒水溶液12 g/(kg·d)灌胃,均每日1次,共连续灌胃7天。给药第3天,除正常对照组外其余3组以H1N1亚型季节性流感病毒鼠肺适应株FM1-6-E2滴鼻造模,攻毒剂量为5LD50,50μl/只,造模后1h各组继续给药。从攻毒后感染之日起,每组取10只,连续观察14天,观察小鼠死亡情况;各组余18只于攻毒后3天、6天、9天计算肺指数,检测病毒滴度,观察肺组织病理变化。结果 病毒模型组10只小鼠全部死亡;达菲对照组和扶正除疫组死亡率均为0。攻毒后第9天,达菲对照组、扶正除疫组与病毒模型组比较,肺指数明显降低(P<0.05或P<0.01);攻毒后第3天、6天,达菲对照组、扶正除疫组与病毒模型组比较,肺组织病毒滴定度明显降低(P<0.05或P<0.01)。达菲对照组与扶正除疫组小鼠肺脏病理变化较为轻微,炎症反应程度明显弱于病毒模型组。结论 扶正除疫颗粒对小鼠感染甲型H1N1流感病毒后具有死亡保护作用,对流感病毒在宿主体内复制有抑制作用。     

吴茱萸挥发油对小鼠急性毒性研究

目的研究吴茱萸挥发油对小鼠的急性毒性作用。方法采用多浓度试验进行吴茱萸挥发油急性毒性研究,不同浓度的挥发油提取液进行灌胃,灌胃体积按25 mL/kg计算,1次/d,连续14 d给药。给药后对小鼠急性毒性症状进行观察,记录小鼠体质量变化情况,通过测定挥发油LD50值来评价吴茱萸挥发油急性毒性。结果灌服低浓度的挥发油后,小鼠死亡率低,但出现怠动、活动减少、安静等症状;灌服高浓度挥发油后小鼠全部死亡,同时观察到小鼠出现呼吸抑制、腹泻等症状。计算得出吴茱萸挥发油LD50值为1.708 mL/(kg·d),95%可信限为1.496～1.899 mL/(kg·d)。结论吴茱萸挥发油具有急性毒性。     

基于UHPLC-Q-TOF-MS/MS技术分析吴茱萸的化学成分

[目的] 利用快速、灵敏的UHPLC-Q-TOF-MS/MS分析技术对吴茱萸药材的化学成分定性分析。[方法] 色谱条件为ZORBAX Eclipse plus C₁₈色谱柱（2.1 mm×100 mm,1.8 μm）,水（0.2%甲酸）-乙腈（0.2%甲酸）为流动相,流速为0.3 mL/min,柱温30℃;采用电喷雾离子源,正负离子扫描检测,经PeakView软件对数据进行分析。[结果] 共鉴定出64个化合物,包括生42个生物碱、8个柠檬苦素、8个黄酮苷、3个苯丙素和3个其他类型化合物。[结论] 本实验方案能快速、精准地对吴茱萸的化学成分进行分析,为研究吴茱萸毒性成分和药效成分打下基础。     

腰椎间盘退变患者髓核组织中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1、白细胞介素-1β表达及相关性研究

目的:探讨在腰椎间盘退变(LDD)患者髓核组织中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、白细胞介素-1β(IL-1β)表达水平及相关性。方法:选取LDD患者40例为观察组,选取同期非退行性椎间盘病变患者43例为对照组。根据Pfirrmann分级系统,观察组又分为轻度病变组(10例)、中度病变组(16例)和重度病变组(14例)。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测Caspase-1、IL-1βmRNA表达水平。采用Western blot法及免疫组化染色检测Caspase-1、IL-1β蛋白表达水平。采用HE染色和病理学评分(HDS)对椎间盘组织的病理损伤程度进行组织学评分。比较各组患者髓核组织Caspase-1、IL-1βmRNA及蛋白表达水平。分析Caspase-1、IL-1βmRNA表达水平与Pfirrmann分级、HDS组织学评分的相关性,以及Caspase-1与IL-1βmRNA表达水平间的相关性。分析LDD患者疾病严重程度的影响因素。结果:观察组Caspase-1、IL-1βmRNA及蛋白表达水平高于对照组(均P<0.05);在观察组中,随着疾病程度逐...     

基于平均能量耗散的睡眠分期研究

目的 睡眠质量影响身体健康与工作效率,睡眠分期结果是衡量睡眠质量的重要指标和诊治睡眠障碍性疾病的重要途径.方法 通过提取相同个体相同时刻的清醒期和非快速眼动睡眠Ⅰ期的EEG信号,分别符号化后计算平均能量耗散,对两个睡眠阶段的相对熵进行统计分析及多样本验证.结果 研究结果表明,平均能量耗散很好地反映了睡眠状态的变化,在清醒期较大,在非快速眼动睡眠Ⅰ期较小,并通过差异显著性检验和多样本验证.结论 平均能量耗散可以作为睡眠自动化分期参数补充到睡眠分期研究中来,在临床上可通过多参数分析,提高睡眠分期的准确性.     

腹腔镜与开腹宫颈癌根治术对机体细胞免疫影响的对比研究*

目的对比研究腹腔镜及传统开腹宫颈癌根治术对早期宫颈癌患者细胞免疫的影响。方法收集昆明医科大学第三附属医院妇科早期(Ⅰ_(a2)～Ⅱ_(a1)期)宫颈癌患者60例,开腹组、腹腔镜组各30例。采用流式细胞术检测患者手术前1天、术后1天、术后5天及术后28天外周血中T淋巴细胞亚群、自然杀伤细胞(NK)、多种细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)和T淋巴细胞活化功能,比较两组手术前后免疫指标的变化。结果①术后1天两组患者T淋巴细胞亚群数量较术前1天下降(P0.05),术后5天各指标较术后1天有所升高,腹腔镜组下降程度小于开腹组(P0.05),且恢复快;②术后1天两组患者外周血人白细胞抗原(HLA)-DR+CD3~+数量较术前下降,HLA-DR+CD8~+较术前升高,腹腔镜组变化程度小,在术后5天恢复快。结论腹腔镜组术后免疫功能变化幅度小,恢复快,对患者免疫功能抑制程度轻,可能更好地保护了患者的免疫功能。     

基于“辨状论质”的地域性市售丹参饮片质量等级评价研究

目的：考察丹参饮片性状指标与内在成分含量的相关性,筛选获得可行可控的质控指标,建立科学合理的地域性市售丹参饮片等级标准。方法：基于“辨状论质”理论,将来源于上海市售的不同直径和不同切面颜色丹参饮片分等,采用色差仪对不同切面颜色丹参饮片粉末颜色值进行测量,结合饮片指标性化学成分含量,使用OriginLab 2021软件进行Pearson相关性分析。结果：丹参饮片直径与总丹参酮和丹参酮ⅡA含量呈极显著负相关,与丹酚酸含量呈极显著正相关;丹参饮片切面颜色与粉末L值呈极显著负相关。丹参饮片粉末L值与丹酚酸B含量呈极显著正相关,b值与丹酚酸B含量呈极显著负相关。结论：丹参饮片直径和切面颜色指标可作为其内在品质判断指标,为上海地区市售丹参饮片等级标准提供客观、科学的理论依据。