双重实时荧光PCR快速鉴别人参和西洋参＊

目的 建立一种能够快速鉴定人参和西洋参的双重实时荧光PCR方法。方法 通过对人参属及其近似种基因序列的分析比对，设计特异性的引物探针，建立双重实时荧光PCR检测方法。PCR反应体系为Premix Ex Taq （Probe qPCR） 10 μL，人参上下游引物各0.5 μL，西洋参上下游引物各0.3 μL，人参与西洋参特异性探针各0.4 μL，DNA模板2 μL，灭菌去离子水补至20 μL。反应条件为95℃预变性30 s；然后以95℃变性5 s，60℃退火延伸30 s进行40个循环。应用该方法测试了27份DNA样品，包括7份人参、6份西洋参、4份人参与西洋参混合样、10份其他人参属样品及其他常见中药材样品的DNA，以确定该方法的特异性。将人参与西洋参样品DNA混合后10倍稀释成不同浓度后进行检测，用以确定该方法的灵敏度。结果 人参及西洋参样品均在特定的荧光通道下出现典型的阳性扩增曲线，人参与西洋参混合样品均同时出现两条阳性扩增曲线，其它对照样品及空白对照均没有出现阳性扩增曲线。灵敏度检测结果显示该方法检测人参及西洋参的最低检测限均为2 pg DNA/反应。结论 本实验建立的双重实时荧光PCR方法能够同时快速、准确、灵敏地鉴别出人参和西洋参。     

结核患者痰结核杆菌检验的方法分析

目的结核是威胁人类健康的流行性传染性疾病,为了早期对结核患者进行诊断治疗,我院对痰结核杆菌检验在结核患者临床诊断中的检验效果进行讨论分析。方法选取我院接受结核病治疗的66例患者入组,入组时间为2018年2月至2019年2月,采取双色球分组法分为两组,对照组及观察组各33例,分别给予痰涂片镜检与聚合酶链式反应(PCR)法,比较观察两种不同检验方法的临床阳性检出率。结果观察组应用PCR法检验的阳性检出率为78.79%(26/33),对照组应用痰涂片镜检的阳性检出率为24.24%(8/34),两组数据比较观察组明显高于对照组,差异存在统计学意义(P<0.05)。结论结核患者临床诊断中选取PCR法进行检验,具有高敏感度、较强特异性、检查速度快等优势,在临床诊断中具有较高优势,可作为结核患者临床诊断的首选方法,为临床诊疗工作提供准确依据的同时,减轻患者的经济负担。     

中华普外科手术学杂志(电子版)稿约

中华普外科手术学杂志(电子版)是新闻出版总署"十一五"国家重点出版规划立项的电子连续出版物之一(新出音[2006]817号),是由中华人民共和国卫生部主管冲华医学会主办的系列杂志之一,主要由纸质版杂志导读和多媒体光盘(DVD-ROM)组成。该杂志保留传统杂志的全部内容和功能,在光盘上除以电子资料的形式编录纸版的全部内容外,同时运用影视语言和多媒体技术、发挥图文声像并茂、实时互动等形式.专栏设有;院士和专家述评,专家论坛,专家手术联播等。     

酪氨酸激酶受体RON与E-cadherin在子宫内膜异位症上的表达及意义

目的探讨酪氨酸激酶受体RON及上皮型钙粘蛋白(E-cadherin)在子宫内膜异位症(endometriosis,EMs)上的表达及意义。方法选择2017年7~12月深圳市龙岗区人民医院收治的42例EMs患者,术中分别留取新鲜异位内膜组织和在位内膜组织,随机选取子宫切除或诊断性刮宫治疗的非EMs患者42例,术中留取其正常子宫内膜组织。采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测子宫内膜组织中RON mRNA的表达,采用免疫组织化学方法检测对应42例石蜡组织中RON蛋白和E-cadherin的表达,并分析RON蛋白和E-cadherin的相关性。结果EMs异位内膜组织RON mRNA及RON蛋白阳性表达率显著高于在位内膜组织及正常子宫内膜组织(P<0.001),在位内膜组织及正常内膜组织中E-cadherin阳性表达率显著高于异位内膜组织(P<0.001),且异位内膜组织中RON mRNA及RON蛋白的表达与临床分期有关(P<0.001)。在同一标本中RON蛋白和E-cadherin表达呈负相关关系(r=-0.497,P<0.05)。结论RON的过度表达与EMs的发生发展密切相关,联合检测RON和E-cadherin的异常对判断EMs的发生发展有一定的参考价值,RON可能成为诊断治疗EMs的新靶点。     

微滴式数字PCR和实时荧光定量PCR对新型冠状病毒肺炎患者不同时间血便尿中核酸检测结果初步探讨

目的 分析微滴式数字PCR(droplet digital PCR, ddPCR)和实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)的核酸检测结果,比较两种方法检测各类样本的差异性,为改进新型冠状病毒核酸检测方案提供数据支持。 方法 利用ddPCR和qPCR技术对已经确诊的3例新型冠状病毒肺炎患者发病不同时间的全血、尿液、粪便共22份标本进行新型冠状病毒核酸检测。 结果 两种方法对人保守区域基因扩增结果一致:全血标本信号最强,尿液次之,粪便最少;ddPCR在1份全血,1份尿液,5份粪便中检出ORF-1ab和N基因的阳性微滴,qPCR仅在3份粪便中检出上述基因,漏检的3个标本基因拷贝数平均浓度为128 copies/ml;ddPCR在发病<5、5~15、>15 d的各类标本中都有检出,qPCR检出以中晚期为主;重症病例用ddPCR均可测到阳性微滴,qPCR检测的各类标本均为阴性;轻症病例的各类标本中qPCR只有粪便核酸检测阳性,ddPCR检出率高于qPCR。 结论 ddPCR可以有效克服qPCR 灵敏度不足的难题,是对qPCR 的有益补充,尤其是针对病毒载量比较低的血液、尿液和可疑的粪便或肛拭子标本,适用于早期感染的判断及患者治愈后出院诊断。     

高血压患者左房容积标准化指标的初步研究

目的:分析高血压患者左房容积常规指标及标化指标的变化,探讨各项指标与高血压程度及个体形体之间的关系。方法:选择60例高血压患者(1级、2级、3级各20例)和20例正常成人,分别用Simpson法和实时三维(real time three-dimensional、RT3D)容积法于收缩期末测量左房容积,得出Simpson法(LAVsimpson)左房容积和实时三维法(LAVRT3D)左房容积。用体表面积标化分别得出相应指数LAVisimpson和LAViRT3D,对比观察正常人和各级高血压患者上述4项指标的变化。结果:高血压1级的LAVsimpson和正常对照组比较无明显变化(P>0.05),高血压2级、3级的LAVsimpson与正常对照组之间的比较有差异(其中2级P<0.05,3级P<0.01)。高血压各级的LAVisimpson、LAVRT3D、LAViRT3D与正常对照组比较都有差异(P<0.05,其中高血压1级的LAVRT3DP<0.05,余指标P<0.01)。LAVisimpson、LAVRT3D、LAViRT3D在高血压各级之间的比较都有显著差异(P<0.01)。结论:各级高血压患者左房容积均表现增大,体表面积标化的LAVisimpson、LAViRT3D比未标化的LAVsimpson、LAVRT3D更早更敏感地反映高血压患者的左房容积变化。     

胃癌淋巴结微转移的研究现状

淋巴结转移是影响胃癌患者预后的重要因素,无淋巴结转移胃癌患者预后一般优于淋巴结转移者。但临床仍有一定比例淋巴结转移阴性(常规苏木精-伊红染色)胃癌患者术后出现肿瘤复发转移,此类不良预后可能与淋巴结微转移(LNM)相关。随着免疫组织化学和反转录聚合酶链反应等诊断方法的应用,LNM的检出率不断提高,尤其在内镜黏膜下剥离、腹腔镜手术等微创治疗中。因此,LNM的准确诊断是胃癌患者治疗的关键,但目前对LNM的临床意义尚未达成一致共识。     

722实时动态血糖监测系统的临床应用条件与效果

目的:探讨722实时动态血糖监测系统在临床中的应用条件与效果。方法:选取181例行722实时动态血糖监测的患者,在探头植入、初始化、监测过程中给予个性化的宣教与护理。结果:1181例患者中174例顺利完成动态血糖监测且耐受性良好;2监测时间:平均(76±5.5)h;3181例患者中同时接受胰岛素治疗者76例;监测前空腹平均血糖(11.8±1.6)mmol/L,餐后2 h平均血糖(16.7±.2.2)mmol/L,监测后空腹血糖(7.3±1.1)mmol/L,餐后2 h血糖(10.6±.1.2)mmol/L。结论:在护士熟练掌握操作技能和对患者必要的宣教与护理前提下,722实时动态血糖监测系统在临床应用中取得良好效果。