应用单克隆抗体分析四川东部疫区汉坦病毒株的抗原特征

近年来陈伯权、阎侗有等应用单克隆抗体(McAb)对国内外的汉坦病毒株进行了抗原性分析的研究,证明从四川不同动物宿主和EHF病人急性期血分离出的A410,Al-216,Al-223,Rf84-1,Rn84-162,S85-46,P84-010,P84-20等毒株均属野鼠型,1986年我们在四川东     

四川省D型肝炎病毒感染的研究

D型肝炎病毒(HDV,6因子)系Rizzetto于1977年在意大利首次发现的一种缺陷性嗜肝RNA病毒,它在人体的表达和复制需要B型肝炎病毒(HBV)的预先存在或伴随感染。HDV感染可加重急性和慢性B型肝炎的病情。血清流行病     

四川省流行性出血热的流行特征及其控制措施

历史的回顾1960年秋季,南充地区人民医院门诊部陆续出现发热、面部浮肿和蛋白尿的患者,开始多诊断为“急性肾炎”。由于不少患者在住院后很快死亡,遂引起重视。经临床医师深入的观察和探讨,于同年10月28日确诊南充县青居乡农民任治安(男,56岁)为流行性出血热(EHF)患者。11月对另一名病     

赖型钩体重组质粒pDJH_2亚克隆及其在大肠杆菌中的高效表达

为了探讨ｐＤＪＨ２的１．９ｋｂ０１７株钩体ＤＮＡ片段可否作为钩体重组疫苗广谱保护性抗原的候选，采用重组ＤＮＡ技术，将ｐＤＪＨ２的１．９ｋｂＤＮＡ片段分别与ｐＴ７－７，ｐＲＳＥＴ系列重组，转化入大肠杆菌进行亚克隆，ＩＰＴＧ诱导表达。结果显示：阳性亚克隆ｐＤＪｔ．ｐＤＪｒＢ１能在大肠杆菌中高效表达；对其进行ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析，可见６８ｋｄ和２３ｋｄ处出现新带，与钩体０１７株外膜同分子量蛋白带位置一致，免疫印迹（特异性抗０１７株外膜抗血清）在６８ｋｄ和２３ｋｄ处分别有印迹；用ｐＤＪｔ亚克隆重组质粒主动免疫豚鼠，可抵抗强毒力株攻击，表现出免疫保护作用。本实验结果提示：（１）ｐＤＪＨ２１．９ｋｂ重组ＤＮＡ片段能以不同质粒为载体，在不同大肠杆菌株中高效表达；（２）该重组ＤＮＡ片段表达产物——６８ｋｄ和２３ｋｄ蛋白，可能是赖型钩体０１７株外膜的保护性抗原。     

我国钩端螺旋体病地理分布的研究

１９５５年本病列入法定传染病。１９５５～１９９３年全国累计报告２４２４０５７例，平均发病率为７．０８３４／１０万，死亡２４６３７例，平均病死率为１．０２％。全国有２６个省（市）自治区（不包括台湾省）均有本病报道。９０年代初钩端螺旋体病疫情相对稳定，常有局部爆发流行，并存在潜在流行因素。我国疫区分布广泛，钩端螺旋体病主要分布在北纬２５°～３５°，东经１００°～１２０°之间，也是长江流域的一些省份。     

四川省新疆出血热血清流行病学研究

1991年月至1992年4月,在本省南坪县、道孚县、西昌市、大邑县和巫溪县等地采集了人和家畜动物血清共677份,用反向被动血凝抑制试验(RPHI)、酶联免疫吸附试验(FLISA)和间接免疫荧光方法(IFAT)检测血清中抗新疆出血热病毒抗体,其中南坪县绵羊阳性1份(1/7,14.28%),道孚县绵羊阳性26份(26/70,37.14%),西昌市山羊阳性3份(8/30,10.00%),奶牛阳性1份(1/60,1.67%),黄牛阳性7份(7/45,15.56%)。鉴于这些牛、羊均为各调查点当地所产,证实南坪县、道孚县和西昌市是新疆出血热自然疫源地。     

问号赖型钩体重组质粒rpDJt表达蛋白P68免疫原性的研究

为构建一种新型钩体重组亚单位疫苗，采用问号钩体ｒｐＤＪｔ基因的蛋白表达物Ｐ６８免疫动物，对其免疫原性进行研究。结果显示：在体外，Ｐ６８能与其特异性抗血清及赖型钩体死菌苗抗血清呈明显高效价Ａｇ－Ａｂ反应；在体内，Ｐ６８能激起明显的Ｔ淋巴细胞转化，ＴＨ细胞活化，ＩＬ－２，ＩＬ－６活性增加。提示：ｒｐＤＪｔ表达蛋白Ｐ６８能激起机体强有力的Ｔ－Ｂ细胞协同性特异性体液免疫反应，是致病性强毒力钩体重组亚单位疫苗好的候选抗原之一。     

为普及儿童免疫目标贡献力量

为了进一步推动全国计划免疫工作,卫生部于1985年12月在长沙召开了全国计划免疫工作会议。会议宣布了“七五”期间我国分两步实现普及儿童免疫的目标,即1988年以省为单位卡介苗、百白破、脊髓灰质炎、麻疹四种疫苗接种率分别达到85%;1990年以县为单位四种疫苗接种率分别达到85%。为了争取早日实现这一目标,本刊邀请全国计划免疫专题委员会的几位同志,针对当前计划免疫工作中存在的问题,撰写此笔谈,供各地参考。     

钩体017株基因库pDJH_2与L．alstoni重组DNA探针同源性及pDJH_2在大肠杆菌中表达产物的分析

用地高辛标记含完整ＯｍｐＬ１结构基因之Ｌ．ａｌｓｔｏｎｉ２．５ｋｂＥｃｏＲ１重组ＤＮＡ探针与我们构建的赖型钩体０１７株基因库重组质粒ｐＤＪＨ＿２进行ＤＮＡ－ＤＮＡ杂交。结果显示：该重组ＤＮＡ探针与ｐＤＪＨ＿２１．９ｋｂ插入片段同源；使用ＩＰＴＧ诱导重组质粒ｐＤＪＨ＿２后，其在大肠杆菌中表达了６８ｋｄ产物。经蛋白酶Ｋ消化、免疫印迹及斑点一酶联免疫吸附试验，提示此６８ｋｂ产物是蛋内质抗原；用该６８ｋｂ蛋白质抗原主动免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，可抵抗强毒力赖型钩体０１７株的攻击，表现出对小鼠的免疫保护性，从而为赖型钩体０１７株基因工程疫苗的研制奠定了一定基础。此赖型０１７株钩体重组ＤＮＡ经ＩＰＴＧ诱导后能在大肠杆茵中表达，以及其表达产物的保护性动物试验结果，在所查国内外文献中尚属首次报道。     

赖型钩体内鞭毛基因的扩增、克隆、核苷酸序列测定及其在大肠杆菌中的表达

根据钩体内鞭毛蛋白（Ｅｎｄｏｆｌａｇｅｌｌｉｎ）ｆｌａＢ基因核苷酸序列自行设计一对引物，以赖型钩体ＤＮＡ为模板，用ＰＣＲ扩增到约８４０ｂｐ的片段。扩增片段经酶切（ＢａｍＨＩ、ＰｓｔＩ）定向克隆入ｐＵＣ８。重组质粒ｐＬＦ１插入片段与哈勒焦型钩体ｆｌａβ基因相比，核苷酸序列和推测的氨基酸序列同源性很高。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ表明有一约３３ｋｄ的特异蛋白带，表达量占菌体蛋白１１％。免疫印迹试验表明此区带能被抗赖型钧体内鞭毛（轴丝）抗血清识别。首次以ＢＡＬＢ／ｃ小鼠钧体病模型为基础，用含重组质粒ｐＬＦ１的大肠杆菌作免疫原进行免疫保护试验，实验组存活率高子对照组，表现了一定程度的保护作用。本研究结果在所查国内外文献中尚属首次报道。